マウスにおける恐怖条件付けをトレース
Summary
以下の実験では、マウスでの痕跡恐怖条件付けのためのプロトコルを記述します。連想記憶のこのタイプは、中立的な刺激と無条件刺激を分離し、トレース期間を含む。
Abstract
この実験において、我々は、学習及び記憶を測定するための手法を提示する。ここで紹介する痕跡恐怖条件プロトコルでは中性刺激と無条件刺激の間に5ペアがあります。各空調トライアルを分離20秒トレース期間があります。翌日の凍結を条件刺激（CS）と、トレース期間のプレゼンテーション中に測定される。三日目に文脈記憶を測定するために、8分間の試験があります。代表的な結果は、無条件刺激することなく、音のプレゼンテーションを受けたマウスと比較して嫌悪無条件刺激（ショック）で発表されたマウスからである。痕跡恐怖条件付けに成功し、他の恐怖条件付けの方法で見つからないマウスでは微妙な学習と記憶の欠損や機能強化を検出するために使用されています。恐怖条件付けこのタイプの内側前頭前皮質及び海馬の間の接続に依存すると考えられている。一つは、現在の論争は、このメソッドは扁桃体に依存しないように考えられているかどうかである。そのため、他の恐怖条件付け試験は、このような遅延の恐怖条件付けを介するなど扁桃体依存学習と記憶の効果を調べるために必要とされる。
Introduction
恐怖条件付けでは中性刺激（NS）は、嫌悪無条件刺激（米国）と対になっている。 NSは普通のトーンであり、米国での反復のペアリングを通じて条件刺激（CS）となります。 CSは次に嫌悪米国の非存在下で、例えば凍結などの馴化応答（CR）を誘発することができる。一般的に使用される恐怖条件プロトコルは遅延条件付けである。このプロトコルでは、NSと米国の発症は、連続または刺激提示中に一部重複しています。同時エアコン、後方コンディショニング、および痕跡条件1：遅延恐怖条件が時間的連想コンディショニングの最も一般的に使用されるタイプの一つであっても、連想コンディショニング時間的配置の他のいくつかの種類があります。痕跡恐怖条件付けでは「トレース」の期間に生じた数秒のNSと米国の間で刺激のない区間があります。
いくつかの研究では、財政赤字を報告している痕跡恐怖条件におけるS神経毒性病変は構造で生産されていたときに海馬2-5または薬理学的薬剤は、海馬内受容体機能をブロックするために使用されているに入力。海馬の病変は痕跡条件と文脈条件における赤字になりますが、遅延恐怖条件8を損なわない。痕跡恐怖条件付けを使用するいくつかの利点があります。恐怖条件付けプロトコルは、三日間の試験期間にわたって達成かつ空間依存しない海馬依存性記憶を可能にすることができる。トレース恐怖条件付けは、モリス水迷路、新規物体認識試験、または海馬依存性記憶を調査中の他の迷路試験に相補的試験として使用することができる。
Protocol
以下の実験で使用したマウスは、14時間の明および10時間の暗時（6時00分時間20:00）日周サイクル、22℃の周囲温度でベイラー大学で生成され、収容した。マウスは食餌および水を自由摂取のアクセス権が与えられた。マウスへのすべての手順は、実験動物の管理と使用に関する健康ガイドラインの国立研究所を遵守していた動物のプロトコルは、ベイラー大学動物実験委員会によって?…
Representative Results
代表的な結果のために我々は中立的な刺激を受けたが、無条件刺激（無ショック状態）を受信しなかったマウスと比較して無条件刺激（ショック状態）と中性刺激のペアを受信した制御のC57BL/6J成体マウスからのデータを提示。それは、第1のプロトコルが正しく行われたか否かを決定するために、この行動試験をセットアップするとき、この条件を実行することが重要である。 <p class="jove…
Discussion
痕跡恐怖条件付けの基礎となる神経回路を解明したいくつかの研究が行われている。トレース恐怖条件付けは、海馬CA1 12月14日のに関与すると考えられている。証拠は、内側前頭前皮質（のmPFC）は、トレースまばたき空調15に大きな役割を果たし、のmPFCを痕跡恐怖条件付けに関与することが見出されていることもある。ある研究では、このようにトレース期間17中に?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作品は、ベイラー大学研究評議会の助成金によっててんかん財団からの研究助成金からサポートされています。
Materials
| FreezeFrame | Coulbourn | ||
| 30% Isopropanol | Purchase 90% isopropanol and dilute it down to 30% | ||
| 70% Ethanol | |||
| Amp-meter | Med-Associates | ENV-420 | Windows XP, Vista, and 7 Compatible (32-bit only) |
| Digital Sound Level Meter | 33-2055 | ||
| Vanilla Extract | McCormick Pure Vanilla Extract | ||
| Sticky Notes | Post-it | 3X3 inch |
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Citer Cet Article
Lugo, J. N., Smith, G. D., Holley, A. J. Trace Fear Conditioning in Mice. J. Vis. Exp. (85), e51180, doi:10.3791/51180 (2014).