Isolement des vaisseaux sanguins dérivés multipotentes précurseurs du muscle squelettique humain

William C.W. Chen; Arman Saparov; Mirko Corselli; Mihaela Crisan; Bo Zheng; Bruno Péault; Johnny Huard

doi:10.3791/51195

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Article de méthode

Isolement des vaisseaux sanguins dérivés multipotentes précurseurs du muscle squelettique humain

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DOI :

10.3791/51195

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21 août 2014

William C.W. Chen¹ , Arman Saparov²^,³ , Mirko Corselli⁴ , Mihaela Crisan⁵ , Bo Zheng⁶ , Bruno Péault⁷^,⁸ , Johnny Huard⁹

¹Stem Cell Research Center, Department of Bioengineering and Orthopedic Surgery, University of Pittsburgh, ²Department of Orthopedic Surgery, University of Pittsburgh, ³Nazarbayev University Research and Innovation System, Nazarbayev University, ⁴Department of Orthopaedic Surgery, UCLA Orthopaedic Hospital and the Orthopaedic Hospital Research Center, University of California at Los Angeles, ⁵Department of Cell Biology, Erasmus MC Stem Cell Institute, ⁶OHSU Center for Regenerative Medicine, Oregon Health & Science University, ⁷Centre for Cardiovascular Science and MRC Centre for Regenerative Medicine, Queen's Medical Research Institute and University of Edinburgh, ⁸David Geffen School of Medicine and the Orthopaedic Hospital Research Center, University of California at Los Angeles, ⁹Stem Cell Research Center, Department of Orthopedic Surgery and McGowan Institute for Regenerative Medicine, University of Pittsburgh

Dans cet article

Résumé

Les vaisseaux sanguins à l'intérieur du squelette port musculaire plusieurs populations de précurseurs multi-lignée humaine qui sont idéales pour les applications de régénération. Cette méthode permet l'isolement de purification simultanée de trois populations de cellules précurseurs pluripotentes respectivement à partir de trois couches de structure des vaisseaux sanguins: les cellules myogéniques endotheliales de l'intima, média de péricytes et les cellules de l'adventice de l'adventice.

Résumé

Depuis la découverte de cellules souches stromales / mésenchymateuses (CSM), l'identité d'origine et la localisation des cellules souches mésenchymateuses ont été obscurcies par leur isolement rétrospective en culture. Récemment, en utilisant le tri de cellules activé par fluorescence (FACS), nous et d'autres chercheurs ont identifié et purifié de façon prospective les trois sous-populations de cellules précurseurs pluripotentes associées à la vascularisation du muscle squelettique humain. Ces trois populations de cellules: les cellules endothéliales myogéniques (CEM), les péricytes (PC), et les cellules de l'adventice (ACS), sont localisés respectivement aux trois couches structurelles des vaisseaux sanguins: intima, les médias, et l'adventice. Tous ces cellules souches humaines vaisseaux sanguins dérivés (hBVSC) les populations non seulement expriment des marqueurs de MSC classiques mais possèdent également des potentiels de développement du mésoderme similaires à MSC typiques. Auparavant, CEM, PC, et les CA ont été isolés au moyen de protocoles distincts et caractérisé par la suite dans des études séparées. La prot d'isolement courantocol, grâce à des modifications au processus d'isolement et des ajustements dans les marqueurs de surface cellulaire sélectifs, nous permet de purifier simultanément les trois sous-populations hBVSC par FACS à partir d'une seule biopsie musculaire humaine. Cette nouvelle méthode permettra non seulement de simplifier l'isolement de plusieurs sous-populations de BVSC mais aussi faciliter futures applications cliniques de hBVSCs à des fins thérapeutiques distincts.

Introduction

Muscle squelettique humain a été considéré comme une source cliniquement intéressante de cellules souches / progénitrices. Le muscle squelettique contient pas seulement commis progéniteurs myogéniques myoblastes squelettiques, mais aussi des cellules souches myogéniques primitives, y compris les cellules satellites et les cellules souches dérivées du muscle (MDSC) ^1. L'utilisation de cellules humaines dérivées du muscle souches / progénitrices, autologues ou allogéniques, en médecine régénérative a été étudiée dans des modèles animaux précliniques et des essais cliniques. Les applications de régénération des cellules souches / progénitrices musculaires....