왼쪽 앞쪽에 내림차순 동맥의 결찰을 통해 심근 허혈 - 재관류 손상의 생쥐 모델
Summary
우리는 재현성을 높이기 위해 좌전 하행 동맥 (LAD)에 결찰의 위치에서 더 명확 수 있습니다 마우스 모델에서 심근 경색 (MI)을 시뮬레이션하기 위해 실험 허혈 / 재관류 (I / R) 손상을 유발하는 수술 방법을 소개합니다 마우스에있는 MI 실험.
Abstract
급성 또는 만성 심근 경색 (MI)은 높은 병적 상태와 사망률의 결과로 심혈관 이벤트입니다. MI 동안 직장에서 병리학 적 메커니즘을 수립하고 효과적인 치료 방법을 개발하는 것은 재현 임상 발생을 시뮬레이션하고 MI와 관련된 병태 생리 학적 변화를 반영하는 방법이 필요합니다. 여기, 우리는 단기 허혈 재관류 (I / R) 부상을 입 영구 결찰에 사용할 수있는 마우스 모델에서 MI를 유도 할 수있는 수술 방법에 대해 설명합니다. 이 방법의 주요 이점은 쥐 심장의 좌심실에서 허혈을 유도하기 위해이 동맥의 결찰 정확한 있도록 좌전 하행 동맥 (LAD)의 위치를 용이하게하는 것이다. LAD의 합자의 정확한 위치는 경색 크기의 재현성을 향상하여보다 신뢰성있는 결과를 얻을 수 있습니다. 합자의 배치에 더 큰 정밀도는 t, 마우스, 미시간을 시뮬레이션하는 표준 수술 방법을 향상시킬 것입니다HUS 통계적으로 중요한 연구에 필요한 실험 동물의 수를 감소시키고 다음 MI 심장 부전의 제조 메커니즘에 대한 이해를 향상시킨다. MI의이 마우스 모델은 MI 다음과 심근 손상을 대상으로 치료의 전임상 시험에 유용합니다.
Introduction
심근 경색 (MI)의 동물 모델은 허혈성 심장 질환 (1)의 복잡한 기전 연구에 중요하다. 허혈 – 재관류 (I / R) 부상 MI 중에 발생하는 심근 손상이 주요 원인이다. 관상 동맥 순환의 폐색에 의해 생성 된 초기 허혈 손상은 적시에 살포를 복원하는 혈관 성형술의 사용에 의해 MI 환자에서 최소화 할 수있다. 이 개입은 크게 급성 MI, 심근 죽음에 이르게 I / R 상해에서 허혈 영역의 결과로 혈액의 흐름의 복원에 사망자 수를 감소하고 있지만. 심근 질량이 손실은 심 박출량과 심장 마비를 향해 진행을 감소에 기여한다. 따라서, I / R 상해에서 심근 죽음을 초래하는 메커니즘의 연구는 심장 혈관 연구에서 탐구의 중요한 라인이다. 외과 관상 동맥 결찰은 다양한 동물의 종류에있는 MI의 모델을 유도 할 수있는 유용한 실험 기법, includi에있다쥐, 개, 돼지를 겨. 다른 실험실에서 출판물 I / R 상해 2,3의 쥐 심장 모델의 설립에 관한 다양한 방법을 도입했습니다. 이러한 메커니즘에 대한 통찰력을 얻기 위해 우리는 MI 병리의 여러 측면을 재현 할 수있는 신뢰할 수있는 동물 모델에 액세스 할 수 있어야합니다. 이러한 모델의 개발은 MI의 처리와 관련 I / R 손상에 대한 치료 방법을 테스트하기 위해 필수적이다.
실험 동물에서 MI를 시뮬레이션하는 현재 수술 기법의 대부분은 허혈성 이벤트를 생성하는 시간에 정의 된 기간 동안 합자에 의해 폐색되어 동맥 (LAD)를 좌전 하행을 노출 흉강에 수술 절개를 포함한다. 그 합자 I / R 손상의 허혈 영역 및 발생의 재관류를 허용하도록 제거 될 수있다. LAD에 대한 문헌의 위치를 항상 정확하게 재현되지 않도록, 이러한 방법 중 하나를 주요 제한이 방법에 의해 유도 된 MI의 심각도의 변화로 이어질 수 있습니다. 사용 가능한 대부분의 기술은 일반적으로 심장의 앞쪽 벽에 LAD의 대략적인 위치를 설명했다. LAD의 분기 및 방향은 위치가 항상 고정되어 있지 및 수술 6시 발생할 수있는 합병증에 이르는, 4,5 쉽게 혼동 될 수있는 개별 동물 다를 수 있음. 합자의 부적절한 배치의 결과는 완전히 모델의 특이성을 손상하는 좌심실에 유도 경색의 크기 변화에서 실행할 수 있습니다. 여기에서 우리는 심근 I / R 및 LAD의 합자의 위치의 정확도를 향상 할 수 있습니다 생쥐의 영구 결찰에 대한 수정 방법을 제시한다. 초기 절개 및 내부 해부뿐만 아니라,이 대동맥에서 나온다 LAD와 사이트의 더 감사 할 수 있도록 심방을 들어 올리는 조작의 사용에 대한 구체적인 접근 방법을 적용하여. 설립LAD와 그 기원에 위치 재현 방식으로 LAD을 결찰 할 수있는 기회를 제공합니다. 심근 I / R 영구적 결찰 모델 수술 후 경색 크기의 편차를 감소 할뿐 아니라 작동 중에 과도한 출혈의 빈도를 감소시킬 수있다.
Protocol
Representative Results
Discussion
마우스 심근 허혈 – 재관류 모델은 임상 급성 또는 만성 심장 질환 (13, 14)를 시뮬레이션하는 심장 혈관 연구를위한 효과적인 방법입니다. 상당한 노력은 허혈성 이벤트와 여러 가지 동물 유형의 마음 재관류 손상을 일으킬 수술 방법을 개발하고 구체화 적용되었습니다. 다른 동물 시스템의 사용에 특히 장점이 있지만, 마우스는 마우스의 심장에 심근 I / R 생산에 광범위한 관심을 이끌고?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 책에서보고 된 연구는 관절염 및 근골격계의 국립 연구소 및 피부 질환, 대상 번호 R01-AR063084에서 건강의 국립 연구소의 일부에 의해 지원되었다. 내용은 전적으로 저자의 책임이며 반드시 국립 보건원의 공식 견해를 대변하지 않습니다.
Materials
| PhysioSuite with RightTemp Homeothermic Warming | Kent Scientific Corp | PS-RT | |
| Light source | Zeiss | KL 1500 LCD | |
| Mouse Heart Slicer Matrix | Zivic Miller | HSMS001-1 | |
| Micro Tray – Base, Lid, & Mat (6.0 x 10 x 0.75) | Fine Science Tools | 6100A | |
| 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride | Sigma Aldrich | T8877 | |
| Buprenorphine (Buprenex Injectable) | Reckitt Benkiser Healthcare | NDC 12496-0757-1 | |
| bupivacaine | Hospira | NDC 0409-1163-01 | |
| Isoflurane | Abbott | NDC 5260-04-05 | |
| Betadine Soultion | Purdue Pharma | 25655-41-8 | |
| Mouse Cardiac Troponin T(cTnT) ELISA | Kamiya Biomedical Company | KT-58997 | |
| Fine Scissors | Fine Science Tools | 14040-10 | |
| Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools | 11251-30 | |
| Dumont #3 Forceps | Fine Science Tools | 11231-30 | |
| Castroviejo Micro Needle Holders | Fine Science Tools | 12060-01 | |
| Slim Elongated Needle Holder | Fine Science Tools | 12005-15 | |
| Round Handled Needle Holders | Fine Science Tools | 12075-12 | |
| Omano Trinocular Stereoscope | Microscope.com | OM99-V6 | |
| SB2 Boom Stand with Universal Arm | Microscope.com | V6 | |
| Tracheal Tube, 0.5mm, 1/16in Y | Kent Scientific Corp | RSP05T16 | |
| Anesthesia Systems for Rodents and Small Animals | VetEquip, Inc | 901807 | |
| 4-0 silk taper suture | Sharpoint™ Products | DC-2515N | |
| 6-0 silk taper suture | Sharpoint™ Products | DC-2150N |
References
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