Inducir miointimal Hiperplasia Versus aterosclerosis en ratones: una introducción de dos modelos válidos

Summary

Este video muestra a dos modelos de desarrollo de la placa de la íntima en las arterias murinos y hace hincapié en las diferencias en la hiperplasia miointimal y la aterosclerosis.

Abstract

Se han establecido varios modelos in vivo de roedores de laboratorio para la inducción de la estenosis de la arteria para imitar enfermedades que incluyen la formación de placa arterial y la estenosis, como se observa por ejemplo en la enfermedad isquémica del corazón. Dos modelos de ratón altamente reproducibles – tanto resulta en estenosis de la arteria pero cada subyacentes un camino diferente de desarrollo – se introducen aquí. Los modelos representan las dos causas más comunes de la estenosis de la arteria; a saber, se muestran un modelo de ratón para cada hiperplasia miointimal, y la aterosclerosis. Para inducir la hiperplasia miointimal, se realiza una lesión de catéter de balón de la aorta abdominal. Para el desarrollo de la placa aterosclerótica, la ApoE – se utiliza el modelo del ratón en combinación con dieta de grasos occidental – /. Diferentes opciones de modelo-adaptado para la medición y evaluación de los resultados se nombran y describen en este manuscrito. La introducción y la comparación de estos dos modelos ofrece Information para los científicos para elegir el modelo de estenosis de la arteria apropiada de acuerdo a la pregunta científica pedido.

Introduction

En los países industrializados la enfermedad isquémica del corazón sigue siendo una causa principal de mortalidad ^1. Las causas de la estenosis de la arteria coronaria son múltiples e incluyen la hiperplasia miointimal así como la aterosclerosis, con la revascularización restante la estrategia de tratamiento más común ^2. Modelos de investigación que distinguen claramente entre las vías mecanicistas de la hiperplasia de la íntima y la aterosclerosis son esenciales para investigar la pathobiological y los procesos fisiopatológicos en el desarrollo de la placa arterial. En este video se presentan dos modelos diferentes de ratones utilizados para estudiar bien el desarrollo de la hiperplasia miointimal o aterosclerosis.

Hiperplasia miointimal se postula para formar a través del paradigma de la "respuesta a la lesión", originalmente descrito para la aterosclerosis ^3. La ruptura mecánica de la capa endotelial conduce a una intensa remodelación mejorada por los efectos paracrinos. Hay varios diferentes modelos animales comúnmente utilizados para estudiar la hiperplasia miointimal. Algunos grupos utilizan dispositivos metálicos en la aorta ascendente de ⁴ ratas. El modelo de la denudación aórtica se realiza con un catéter de balón también se usa comúnmente en ratas de laboratorio ^5,6. El modelo de hiperplasia de la íntima realizado en ratones de laboratorio ⁷ implementa la ligadura de la arteria carótida e induce lesiones miointimales ^8. En nuestro laboratorio el modelo de la denudación de la aorta abdominal – para estudiar el desarrollo de la hiperplasia miointimal – así como un modelo de reestenosis del stent humanizado ⁹ son de uso general. Este video hace hincapié en que la elección del modelo animal experimental apropiado es crucial para los estudios mecanicistas o fisiopatológicos de la estenosis arterial.

Modelos hiperplasia miointimal deben diferenciarse de los modelos de aterosclerosis. Para estos últimos, la apolipoproteína E-deficiente (ApoE – / -) ratones en combinación con dieta occidental se utilizan comúnmente para inducir atheroscllesiones eróticos ^10,11,12,13. Ejemplos para la inducción de ambos de estos tipos de enfermedad miointimal en ratones se muestran aquí, junto con diferentes opciones de modelo adaptado para analizar estenosis de los vasos ^14.

Protocol

Todo animal de trabajo debe llevarse a cabo según las directrices de cuidado de los animales pertinentes. Obtener la aprobación institucional para el trabajo con animales antes de protocolo de inicio. 1. Miointimales Hiperplasia Modelo (A) Para el modelo de hiperplasia de la íntima, la compra de C57BL/6J (Stock número 000664, C57BL/6J) ratones a la edad de 8 semanas con un peso aproximado de 25 g. Los ratones de estos experimentos en condicione…

Representative Results

La figura 1 muestra las diferentes opciones de análisis y el estado de la enfermedad inducida por ambos modelos. Para el modelo de hiperplasia de la íntima, se muestra el análisis de secciones transversales representativas en la tinción tricrómica. A partir de estas secciones transversales, resultados como relaciones de I / M, espesor máximo de la placa, el espesor máximo de la íntima en el lumen, la obliteración luminal en por ciento, así como área de la placa pueden ser medidos y calculados…

Discussion

Aunque ambas enfermedades resultan en síntomas similares en el paciente, los mecanismos subyacentes de desarrollo de la placa y por lo tanto, los enfoques de tratamiento son muy diferentes ^2. En diferentes formas de estenosis arterial los hallazgos clínicos en los pacientes, así como el marco de tiempo de desarrollo de la placa dependen del mecanismo subyacente.

En función de los hallazgos clínicos en el paciente, diferentes métodos de análisis de la muestra deben realizars…

Materials

Name	Company	Catalog number	Comments
Thyoglycollate Broth 3%	Fluka	70157	powder
PFA 4%	Electron Microscopy Sciences	#157135S	20%
Sudan III staining solution	Sigma Aldrich	S4131	powder
mouse C57BL/6J	Jackson Laboratories	Stock # 0006664
mouse ApoE-/-	Jackson Laboratories	Stock #002052
Western Diet	Harlan Laboratories	TD.88137
hair clipper	WAHL	8786-451A ARCO SE
Forene	Abbott		Isoflurane
microsurgical clamp	Fine Science Tools	18055-04	Micro-Serrefine – 4mm
clamp applicator	Fine Science Tools	18056-14
catheter
10-0 prolene suture	Ethicon	788G
6-0 prolene suture	Ethicon	8709H
5-0 prolene suture	Ethicon	EH7229H
Rimadyl	Pfizer		Carprofen
Metacam 1.5mg/ml	Boehringer Ingelheim		Metamizol