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Article de méthode

Fabrication et implantation de miniatures à double élément jauges de contrainte pour mesurer

10K vues

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DOI :

10.3791/51739

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18 septembre 2014

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Dans cet article

Résumé

La mesure in vivo des contractions des muscles lisses le long du tractus gastro-intestinal d’animaux de laboratoire reste une technique puissante, bien que sous-utilisée. Les jauges de contrainte flexibles à deux éléments ne sont pas disponibles dans le commerce et nécessitent une fabrication. Ce protocole décrit la construction de jauges de contrainte fiables et peu coûteuses pour une implantation aiguë ou chronique chez les rongeurs.

Résumé

La dysfonction gastro-intestinale reste une cause majeure de morbidité et de mortalité. En effet, la motilité gastro-intestinale (GI) dans la santé et la maladie reste un domaine de recherche productif avec plus de 1 400 études animales publiées au cours des 5 dernières années seulement. De nombreuses techniques ont été développées pour quantifier l’activité des muscles lisses de l’estomac, de l’intestin grêle et du côlon. Les techniques in vitro et ex vivo offrent des outils puissants pour l’étude mécaniste de la fonction gastro-intestinale, mais en dehors du contexte des systèmes intégrés inhérents à un organisme intact. En règle générale, la mesure in vivo des contractions des muscles lisses de l’estomac a impliqué une préparation anesthésiée associée à l’introduction d’un capteur de pression placé chirurgicalement, d’une charge de pression statique telle qu’un ballon légèrement gonflé ou en distendant l’estomac avec du liquide sous une rétroaction contrôlée par barostate. Pourtant, bon nombre de ces approches présentent des inconvénients uniques, tant en ce qui concerne l’interprétation des résultats que l’applicabilité à l’utilisation in vivo dans des modèles animaux expérimentaux conscients. L’utilisation de jauges de contrainte à deux éléments qui ont été fixées à la surface séreuse du tractus gastro-intestinal a offert de nombreux avantages expérimentaux, qui peuvent continuer à l’emporter sur les inconvénients. Étant donné que ces jauges ne sont pas disponibles dans le commerce, cette présentation vidéo fournit un guide détaillé, étape par étape, de la fabrication de la conception actuelle de ces jauges. La jauge de contrainte décrite dans ce protocole est un modèle permettant d’enregistrer la motilité gastrique chez le rat. Cette conception a été modifiée pour enregistrer l’activité des muscles lisses le long de l’ensemble du tractus gastro-intestinal et ne nécessite que de subtiles variations dans la fabrication globale. Des données représentatives de l’ensemble du tractus gastro-intestinal sont incluses, ainsi qu’une discussion sur les méthodes d’analyse, l’interprétation et la présentation des données.

Introduction

Des études expérimentales in vivo que le dossier gastro-intestinal (GI) de la motilité dans un certain nombre de conditions expérimentales restent un outil puissant pour comprendre les processus normaux et physiopathologiques sous-jacents nécessaires à l'homéostasie des éléments nutritifs. Traditionnellement, de nombreuses méthodologies expérimentales, certaines similitudes avec ceux trouvés dans la pratique clinique 1, ont été utilisées pour quantifier directement les changements dans GI taux de contraction 2-5, la pression intraluminale 6, 7, ou le transit gastro-intestinal des marqueurs non-résorbables 8,....

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Protocole

Toutes les procédures suivies Instituts nationaux de la santé et des lignes directrices ont été approuvées par le Comité de protection des animaux dans les institutions et l'utilisation au Hershey Collège Penn State of Medicine. Les rats ont été logés en utilisant des pratiques de vivarium communes. Remarque: Ce protocole utilise des rats mâles Wistar ≥8 semaines et pesant initialement 175 à 200 g.

1. Procédures de fabrication de jauge de contrainte

  1. La plupart outillage et les composants restent disponibles dans les sociétés d'origine ou successeurs et sont résumés dans le tableau 1.
  2. Préparati....

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Résultats

Les données représentatives d'un rat thiobutabarbital-anesthésié sont présentés sur la figure 2. L'tracé supérieur représente les contractions corpus gastriques du rat au cours de l'administration du tronc de l'hormone de libération de la thyrotropine (TRH, 100 pmol), une motilité améliorant peptide connu 3, 19. Il montre contractions de base avant l'augmentation de l'activité phasique du muscle lisse gastrique. Note: L'analyse de ces pics de contractions gastrique.......

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Discussion

Les procédures présentées ici permettent de fabriquer des laboratoires individuels sensibles à jauges de contrainte décoratifs pour des applications biologiques, y compris, mais sans s'y limiter, la motilité gastro-intestinale chez le petit animal de laboratoire. Depuis la fabrication commerciale de ces jauges de contrainte a cessé, les laboratoires de l'enquête fonction gastro-intestinale sont limités à d'autres techniques qui peuvent ne pas permettre la gamme complète des applications expérimentales qui so.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents. Les fournisseurs énumérés dans ce manuscrit sont fournis à titre indicatif seulement.

Remerciements

financement de la recherche a été reçue par l'Institut national des troubles neurologiques et des maladies (NS049177 et NS087834). Les auteurs tiennent à souligner la contribution intellectuelle de la fin du Dr. Paul Bass et ses collègues à la conception originale de les jauges de contrainte; et Carol Tollefsrud pour la fabrication et la commercialisation de jauges de contrainte jusqu'à ce que l'arrêt de la production en 2010 ainsi que pour sa correspondance perspicace.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
d’éléments de jauge de contrainte(groupe de produits Vishay)EA-06-031-350  ; Jauge de contrainte linéaire, feuille, analyse des contraintes (2 requises)
www.vishaypg.com/micro-measurements/
or
http://www.vishaypg.com/docs/11070/031ce.pdf
Colle époxy-phénoliqueM-bond 610Colle à usage général pour le collage d’élémentsde jauge de contraintehttp://www.vishaypg.com/docs/11024/wirecable.pdf
Fil isolé à 3 conducteurs336-FTEFil flexible à usage général à écartement finhttp://www.vishaypg.com/docs/11024/wirecable.pdf
Kit de solvant de flux et colophaneFAR-2 M-Flux AR kitFlux de soudure liquidehttp://www.vishaypg.com/docs/11023/soldacce.pdf
Solder361A-20R-25Optimisé et recommandé pour les applications de jauges de contraintehttp://www.vishaypg.com/docs/11023/soldacce.pdf
Connecteurfemelle en orPlasticsOneE363/0Contact femelle pour socle d’électrodes
http://www.plastics1.com/PCR/Catalog/Item.php?item=407
Socle d’électrodesMS363Plate-forme sécurisée pour contacts filaireshttp:// www.plastics1.com/PCR/Catalog/Item.php?item=499
Câble 6 fils363 PRISE AVEC VINYLE SL/6Câble préfabriqué recouvert de vinyle (dans des longueurs personnalisées) avec adaptateur de prise pour s’adapter au socle d’électrode et cosses à souder étamées à l’extrémité
Composé de coulée en caoutchouc de siliconeProduits électriques EIS ElanTron E211Agent d’enrobage pour joints de soudure de fils
http://www.eis-inc.com
HOTweezersMeisei CorporationModel 4BDénudeuses d’isolant de fils
http://www.impexron.us
Station de soudageWeller (Apex Tool Group)WES 51Équipement de soudage de haute qualité
http://www.apexhandtools.com/weller/index.cfm
Disponible via http://www.eis-inc.com ou http://www.amazon.com
Feuille de siliconeTrelleborg Solutions d’étanchéité Northborough-Life SciencesPharmelast 20-20Encapsulation d’éléments de jauges de contrainte
10 B Forbes Road Northborough, MA 01532 (800) 634-2000
AmplifierExperimetria LtdAMP-01-SGbr/> http://experimetria.com/Biological_amplifiers.php
Micro-mesures de la borne<

Références

  1. Szarka, L. A., Camilleri, M. Methods for measurement of gastric motility. Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 296 (3), G461-G475 (2009).
  2. Pascaud XB, F. A. U., Genton, M. J., Bass, P. A miniature transducer....

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Réimpressions et autorisations

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