Method Article

Murin de transplantation de la cornée: Un modèle pour étudier la forme la plus courante de la transplantation d'organes solides

DOI:

10.3791/51830

November 17th, 2014

In This Article

Summary

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Les souris ont été utilisées comme modèle pour étudier de nombreuses formes de transplantation, y compris la greffe de cornée. Nous décrivons dans ce rapport un modèle murin pour la transplantation cornéenne aiguë et tardive.

Abstract

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La greffe de cornée est la forme la plus courante de transplantation d’organe aux États-Unis, avec entre 45 000 et 55 000 procédures effectuées chaque année. Bien qu’il existe plusieurs modèles animaux pour cette procédure, les souris sont l’espèce la plus couramment utilisée. Les raisons de l’utilisation de souris sont le coût relatif de l’utilisation de cette espèce, l’existence de nombreuses souches génétiquement définies qui permettent l’étude des réponses immunitaires et l’existence d’un large éventail de réactifs qui peuvent être utilisés pour mieux définir les réponses de cette espèce. Ce modèle a été utilisé pour définir les facteurs de la cornée qui sont responsables du statut de privilège immunitaire relatif de ce tissu qui permet aux allogreffes de cornée de survivre au rejet aigu en l’absence de traitement immunosuppresseur. Il a également été utilisé pour définir les facteurs les plus importants dans le rejet de telles allogreffes. Par conséquent, une grande partie de ce que nous savons sur les mécanismes d’acceptation et de rejet de l’allogreffe cornéenne est due à des études utilisant un modèle murin de transplantation cornéenne. En plus de décrire un modèle de rejet aigu d’une allogreffe cornéenne, nous présentons également pour la première fois un modèle de rejet tardif d’une allogreffe cornéenne.

Introduction

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La transplantation de la cornée est un des types les plus communs et succès de la transplantation réalisée chez l'homme. Les raisons pour lesquelles cette intervention chirurgicale est pratiquée sont le résultat de blessures, de maladies infectieuses 1, ou d'autres formes de la maladie de la cornée non-infectieuse 2. Les chiffres de l'Association of America Banque d'yeux indiquent que plus de 46 000 ont été réalisées en 2011 (voir le site Web à l'adresse: restoresight.org/eye_banks/eye_banks.html). Une indication de son succès est que les taux de défaillance d'un an pour greffes de cornée allogéniques vont de 10 à 15% et ....

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Protocol

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REMARQUE: Tous les animaux utilisés dans cette procédure sont traités conformément à l'Association pour la recherche en vision et déclaration d'ophtalmologie pour l'utilisation d'animaux dans ophtalmique et Vision Research ainsi que les lignes directrices établies par le comité de surveillance de l'animal à l'Université de Saint Louis.
NOTE: Tous les instruments et solutions chirurgicales sont stérilisés avant la chirurgie pour limiter l'infection microbienne de l'œil. Il convient de noter que, bien que les animaux font l'expérience de la douleur de cette procédure, nous ne comptons pas les analgésiques. La raison en est que....

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Results

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Le modèle murin de greffe de la cornée a été utilisé pour plus de 20 ans à caractériser avec succès des mécanismes à la fois de l'allogreffe de cornée rejet 19-23 et la cornée allogreffe acceptation 13, 15,16,18, 24-27. Ce modèle a été utilisé pour établir l'importance de l'expression de FasL dans la cornée allogreffe acceptation, par le fait que les animaux qui manquent de FasL sont pas en mesure d'accepter les allogreffes de cornée 15. Il a également été utilisée pour démontrer que le .......

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Discussion

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Le modèle murin de greffe de cornée décrite ici permet à l'enquêteur d'étudier le rejet d'allogreffe de cornée humaine dans un modèle qui permet de prédire quels sont les facteurs associés à la fois meilleur rejet 15,17,18,20, 26-30 et 21-25 acceptation de la cornée allogreffes. Contrairement à la transplantation de la cornée humaine, dans laquelle les patients reçoivent soit un traitement de stéroïde topique ou systémique pour traiter ou prévenir une ou l'autre de rejet 31,

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Disclosures

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Les auteurs n’ont pas d’intérêts financiers concurrents.

Acknowledgements

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Les auteurs tiennent à remercier les nombreuses personnes qui ont travaillé sur cette technique et qui l’ont perfectionnée et qui ont été responsables de la génération de nombreux manuscrits à la fois dans ce laboratoire et dans d’autres. Ce travail a été soutenu par la subvention EY12707 (PMS) des National Institutes of Health et une subvention sans restriction de la recherche pour prévenir la cécité au département d’ophtalmologie.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Microscope chirurgical ZeissRebuilt
SeringueBD305122
3 ml SeringueBD309657
Seringue 10 mlBD309602
Ciseaux VannusStortzE-3387
11-0 SuturesAlcon717939M
Tréphine 2,0 mmKatenaK 2-7520
Trephine 1,5 mmKatenaK 2-7510
Chlorhydrate de tricaïne 0,5 %AlconNDC 0065-0741-12
HealonAbbottHealon OVD
ForcepsFST11251-20
7-0 SuturesAlcon8065
2,5 % Phényléphrine HClAlconNDC 61314-342-02
1 % TropicamideBausch & LombNDC-24208-585-59
Seringue HamiltonHamilton7654-01
Aiguille de calibre 33Hamilton90033
Passoire cellulaire (100 &mu ; m nylon)BD Falcon352360
HémocytomètreCardinal HealthB3175
Trypan BlueSigmaT8154

References

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  1. Farooq, A. V., Shukla, D. Herpes simplex epithelial and stromal keratitis: an epidemiologic update. Surv. Ophthalmol. , 448-462 (2012).
  2. Gipson, I. K. Age-related changes and diseases of the ocular surface and. Invest. Opthlamol. Vis. Sci. 54, 48-53 (201....

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Corneal TransplantationMurine ModelGraft RejectionSurgical ProcedureSuture TechniqueOpacity EvaluationSpleen Cell InjectionAnterior ChamberAllograft SurvivalImmune Privilege

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