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Article de méthode

Une nouvelle méthode de Drug Administration à la sclérose en poisson zèbre ( Danio rerio) Et la quantification de retrait

12K vues

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DOI :

10.3791/51851

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12 novembre 2014

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Dans cet article

Résumé

Une nouvelle méthode pour réduire la variabilité lors de l’exposition des poissons à des drogues est expliquée. Dans un essai scototaxique clair/foncé, on a constaté que les poissons exposés à divers types d’exposition à l’éthanol présentaient des niveaux d’anxiété modifiés pendant le sevrage.

Résumé

Les tests d’anxiété chez le poisson-zèbre sont souvent étudiés en combinaison avec l’application de substances pharmacologiques. Dans ces études, les poissons sont régulièrement pêchés au filet et transportés entre les aquariums domestiques et les bassins de dosage. Afin d’améliorer la facilité d’administration des composés, une nouvelle méthode de transfert de poissons entre les réservoirs pour l’administration de médicaments a été développée. Des inserts conçus pour le frai ont été utilisés pour transférer des groupes de poissons dans la solution médicamenteuse, ce qui a permis un dosage précis de tous les poissons du groupe. Cela augmente la précision et l’efficacité du dosage, ce qui devient très important dans les longs calendriers d’administration répétée de médicaments. Nous avons mis en œuvre cette procédure pour l’utiliser dans une étude examinant le comportement du poisson-zèbre dans le test lumière/obscurité après avoir administré de l’éthanol avec des calendriers différents de 21 jours. Chez les poissons exposés à des quantités modérées d’alcool quotidiennement, il y avait une différence significative dans la préférence de l’endroit après 2 jours de retrait par rapport au groupe témoin. Cependant, aucune différence significative n’a été observée dans la préférence géographique dans un groupe exposé à une administration hebdomadaire de beuverie.

Ce protocole peut être généralisé pour être utilisé avec tous les types de composés solubles dans l’eau et peut être utilisé dans n’importe quelle situation où le comportement des poissons pendant ou après de longs cycles d’administration de médicaments est examiné. Le test de la lumière et de l’obscurité est également une méthode précieuse pour évaluer les changements d’anxiété induits par le sevrage.

Introduction

Le poisson zèbre (Danio rerio) est une petite espèce de poissons téléostéens originaires de l'Inde qui est un organisme modèle utile pour comportementale 1 et 2,3 médicale recherche. Le poisson zèbre sont aussi couramment utilisé dans l'essai de diverses substances pharmacologiques afin de caractériser leur impact sur le comportement. Diverses doses et schémas d'administration de médicaments ont été utilisés pour étudier le comportement du poisson zèbre après l'administration de composés tels que des stimulants, des anxiolytiques 4 et 5 de l'éthanol 8/6.

N....

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Protocole

Toutes les procédures et les tests comportementaux ont été approuvés par le Conseil d'éthique de la recherche animale de l'Université MacEwan sous le numéro de protocole 11/06/12, qui est en conformité avec le Conseil canadien pour les directives de protection des animaux pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire.

1. Préparer Réservoirs de dosage, des solutions et le schéma d'administration

  1. Préparer un calendrier d'administration tels que les animaux sont traités dans le même environnement et dans le même temps de la journée pour éviter les facteurs de confusion de temps ou de sollicitation à ....

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Résultats

Pour assurer la précision et le contrôle dans le poisson zèbre avec les études pharmacologiques, il est important pour la durée du temps de l'administration d'éthanol uniforme et précise de la manière décrite ci-dessus. Notre procédé permet d'augmenter la facilité et le débit de la procédure de dosage. L'administration de l'éthanol soit toutes les semaines ou tous les jours binge-modérée horaire a donné lieu à des niveaux d'anxiété altérées, mesurées avec le / test sombre de la lumière, par rapport aux témoins. Lors d'u.......

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Discussion

Des études antérieures portant sur ​​l'administration de médicaments chez le poisson zèbre ont simplement compté sur la compensation du poisson pour les transporter à partir de leur réservoir d'origine dans la solution médicamenteuse 12,16. La compensation est pas toujours cohérente et prend souvent plus de temps que prévu en raison de la réaction de fuite du poisson zèbre, qui a la variabilité individuelle importante. Méthodes de transfert classiques, tout en étant utiles, peuvent être améliorées en .......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs reconnaissent Joshua Gallup pour l'utilisation de sa photographie équipement utilisé pour la figure 1. Ce travail a été soutenu par un en sciences naturelles et en génie Conseil de recherches en subvention (CRSNG) du Canada Discovery (à TJH).

Remerciements

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Système de logement de banc à trois étagèresfigure-materials-1 Aquatic HabitatsN/A
Réservoir de reproduction de 1,5 L avec déflecteur de 400 μmfigure-materials-2 Aquatic HabitatsN/A
Éthanol de grain purfigure-materials-3 Luxco, INCN/A
Logiciel de suivi du mouvement Ethovision XTfigure-materials-4 Noldus Information Technology
Pipettefigure-materials-5 Eppendorf Canada
Arena clair/obscurPersonnaliséConstruire selon la description de la procédure. 9,5 cm de large, 9,5 cm de profondeur, 55 cm de long.

Références

  1. Spence, R., Gerlach, G., Lawrence, C., Smith, C. The behaviour and ecology of the zebrafish, Danio rerio. Biological Reviews. 83 (1), 13-34 (2008).
  2. Langheinrich, U. Zebrafish: A new model on the pharmaceutical catwalk. BioEssays. 25 (9), 904-912 (2003).
  3. Santoriell....

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Réimpressions et autorisations

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