흰쥐의 동종 혈액 혈전과 허혈성 뇌졸중에 대한 전성 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO)
Summary
In this paper, we demonstrate a standard method for producing an embolic middle cerebral artery occlusion with homologous blood clots (fibrin-rich) in adult rat. This model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical study of thrombolytic therapy for ischemic stroke.
Abstract
재조합 조직 플라스 미노 겐 활성제 (TPA)의 사용과 임상, 혈전 용해 치료는 급성 허혈성 뇌졸중의 가장 효과적인 치료 남아있다. 그러나, tPA의 사용은 좁은 치료 윈도우 의해 출혈성 변형의 위험 증가에 의해 제한된다. 허혈성 뇌졸중의 치료를위한 새로운 혈전 용해제 및 전략을 연구하기 적합한 뇌졸중 모델을 개발하기위한 시급한 필요성이있다. 관내 봉합 MCAO 및 색전 MCAO : 현재, 허혈성 뇌졸중 모델의 두 가지 주요 유형은 쥐와 생쥐에서 개발되었다. 관내 봉합 MCAO 기법을 통해 모델 널리기구 구동 스트로크 연구에 사용되어 왔지만, 이러한 봉합 모델 임상 상황을 모방하지 혈전 및 연구에 적합하지 않는다. 이러한 모델 중 전성 MCAO 모델은 밀접하게 인간의 허혈성 뇌졸중을 모방하고 혈전 용해 치료의 임상 연구에 적합하다. 이 전성 모델은 첫째 OV에 의해 쥐에서 개발 된1992 년. 등 1 ergaard 또한 장 등이 특징. 1,997 2. 전성 MCAO가 관심을 증가 얻고있다하더라도, 많은 실험실에서 직면 기술적 인 문제가 있습니다. 혈전 용해 연구에 대한 증가하는 요구를 충족하기 위해, 우리는 MCA 영토 내에서 예측 경색 볼륨을 개발할 수 쥐에 전성 MCAO의 높은 재현성 모델을 제시한다. 요컨대, 변성 PE-50 튜브 부드럽게 MCA의 원점에 도달 카테터의 팁까지 내 경동맥 (ICA)의 내강에 외부 경동맥 (ECA)에서 전진된다. 카테터를 통해 하나의 동종 혈액 응고는 MCA의 기원에 배치됩니다. MCA 폐색의 성공을 식별하는 지역 뇌 혈류량을 모니터링하고, 신경 학적 결손 및 경색 부피를 측정 하였다. 이 논문에서 제시 한 기술은 뇌졸중 연구를위한 모델을 구축하기위한 기술적 인 문제를 극복하기 위해 수사관을 도움이 될 것이다. </ P>
Introduction
뇌졸중은 미국에서 사망의 세 번째 주요 원인이지만, 급성 뇌졸중의 치료 옵션이 제한 남아있다. 현재, 혈전을 용해하는 재조합 조직 플라스 미노 겐 활성제 (TPA)의 정맥 주입은 급성 허혈성 뇌졸중에 대한 가장 효과적인 치료법이다. 그러나, tPA의 사용은 좁은 치료 창이과 뇌출혈의 위험 증가에 의해 제한됩니다. 따라서 혈전 용해 연구에 적합한 행정의 모델을 긴급하게 필요합니다.
중대 뇌동맥 (MCA)는 가장 자주 인간 스트로크에 가려 동맥이다. 이 동맥에 초점을 맞춘, 허혈성 뇌졸중의 여러 동물 모델이 설정되어있는 것. 현재, MCA를 폐색에 의해 쥐 초점 허혈 모델의 두 가지 주요 유형이 개발되어 있습니다 : 봉합 MCAO 모델과 전성 MCAO 모델. 관내 봉합 MCAO 기법을 통해 모델 널리기구 구동 스트로크 연구에 사용되어 왔지만, 이러한 봉합 모델 몰라인간의 스트로크의 80 %까지로 모방 인간의 스트로크는, 혈전이나 색전에 의해 발생합니다. 그러나, 혈액 응고를 사용하여 색 전성 뇌졸중 모델은 밀접하게 인간의 스트로크를 모방하고 혈전 용해 연구에 적합한 것으로 간주됩니다. 이 전성 모델은 1992 년에 처음 Overgaard 등. 1 쥐에서 개발 및 추가 장 등을 특징으로했다. 1,997 두와 디 나폴리 등에 의해. 2,006 3. 전성 MCAO 증가 주목을 받았다 있지만, 직면 한 기술적 문제가 많은 실험실에 의해.
이 문서에서는, 우리는 MCA 영토 내에서 예측 경색을 개발할 수 있습니다 성인 쥐에서 동종 혈액 응고와 색전 MCAO을 생산하기위한 표준 방법을 보여줍니다. 이 문서에 제시된 기술은 연구자 뇌졸중 연구를위한이 모델을 설정하기위한 기술적 인 문제를 극복하는 데 도움이됩니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
본 연구에서 우리는 MCA의 원점이 풍부한 피브린 응고에 의해 폐색 된 쥐에서 색 전성 뇌졸중 MCAO 모델을 수행하기위한 표준 방법을 설명했다. 이 모델의 주요 장점은 : 피브린 풍부한 혈병과 MCA의 줄기의 폐색은 인간에서 혈전 색 전성 뇌졸중 유사 색 전성 뇌졸중 모델 혈전 용해 요법의 전임상 연구를 수행하기에 적합하고,이 모델을 개발할 수 있음 MCA에 의해 공급 영토 내에서 재현하고 예측 경?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported by National Institutes of Health grants HL087990 (G.L.).
Materials
| rh-tPA | Chemical | Genentech | |
| 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Chemical | Sigma | T8877 |
| Anesthesia vaporizer | Equipment | Soma Technology | Drager Vapor 19.1 |
| Rechargeable high speed micro drill | Equipment | Fine Science Tools | 18000-17 |
| Curved scissors | Equipment | Fine Science Tools | 14117-14 |
| Dumont forceps(Medical #7) | Equipment | Fine Science Tools | 11270-20 |
| Dumont forceps(Medical #5) | Equipment | Fine Science Tools | 11251-35 |
| Vannas-style spring scissors | Equipment | Fine Science Tools | 15000-03 |
| Veterinary recovery chamber | Equipment | Peco Services | V1200 |
| Genie plus syringe pump | Equipment | Kent Scientific Corporation | |
| Rat brain matrix | Equipment | Kent Scientific Corporation | RBMA-310C |
| Digital caliper | Equipment | World Precision Instruments | 501601 |
| Dissecting microscope | Equipment | World Precision Instruments | PZMTIII-BS-LWD |
| Hamilton syringe | Equipment | Hamilton | model 710 |
| Homeothermic blanket control unit | Equipment | Harvard Apparatus | |
| Electric clipper | Equipment | Braintree Scientific | CLP-9931 |
| Veterinary electrosurgical unit | Equipment | MACAN Manufacturing Company | MV-9 |
| Blood flowmeter | Equipment | Adinstruments | |
| PowerLab 4/30 | Equipment | Adinstruments | |
| LabChart 7.2 | software | Adinstruments | |
| 1ml syringe | Consumable | Becton, Dickinson and Company | 309659 |
| 23G needle | Consumable | Becton, Dickinson and Company | 305143 |
| 30G needle | Consumable | Becton, Dickinson and Company | 305106 |
| PE-50 tubing | Consumable | Becton, Dickinson and Company | 427517 |
| PE-10 tubing | Consumable | Becton, Dickinson and Company | 427400 |
| 6-0 Silk suture | Consumable | Harvard apparatus | 723287 |
| 5-0 Silk suture | Consumable | Harvard Apparatus | 517607 |
References
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