شراء عالية الجودة الفيديو الرقمية<em> ذبابة الفاكهة</em> السلوكيات اليرقات والكبار من منظور الجانبي
Summary
نحن هنا وصف تقنية المجهر بسيطة ويمكن الوصول إليها على نطاق واسع للحصول على فيديو عالي الجودة الرقمية من ذبابة الفاكهة الكبار والظواهر متحولة اليرقات من منظور جانبي.
Abstract
ذبابة الفاكهة السوداء البطن هو نظام النموذج التجريبي قوية لدراسة وظيفة الجهاز العصبي. طفرات الجينات التي تسبب خلل في الجهاز العصبي غالبا ما تنتج اليرقات قابلة للحياة والكبار التي تحرك الظواهر المعيبة التي يصعب تصف بدقة مع النص أو تمثل تماما مع صورة فوتوغرافية واحدة. أوضاع الحالية النشر العلمي، ومع ذلك، ودعم تقديم وسائط الفيديو الرقمي كمادة تكميلية لمرافقة مخطوطة. نحن هنا وصف تقنية المجهر بسيطة ويمكن الوصول إليها على نطاق واسع للحصول على فيديو عالي الجودة الرقمية لكل من ذبابة الفاكهة الظواهر اليرقات والكبار من منظور جانبي. فيديو للتنقل اليرقات والكبار من الرؤية الجانبية هو مفيد لأنه يسمح للمراقبة وتحليل الفروق الدقيقة والاختلافات في السلوكيات الشاذة قاطرة. لقد استخدمت بنجاح هذه التقنية لتصور وقياس aberranر الزحف السلوكيات في يرقات العمر الثالث، بالإضافة إلى الظواهر والسلوكيات متحولة الكبار بما في ذلك الاستمالة.
Introduction
ذبابة الفاكهة ذبابة الفاكهة السوداء البطن شيوعا هو نظام النموذج التجريبي قوية لدراسة وظيفة الجهاز العصبي 1-3. الحفظ التطوري للبنية ووظيفة الجهاز العصبي مع البشر، فضلا عن سهولة التلاعب الجيني ومجموعة واسعة من الأدوات الوراثية يجعل ذبابة الفاكهة الكائن العرض الأول لنموذج أمراض الاعصاب البشري 4. طفرات الجينات التي تسبب خلل في الجهاز العصبي وغالبا ما يؤدي إلى يرقات متحولة وقابلة للحياة الكبار ذبابة الفاكهة مع ضعف الحركة. وتشمل الظواهر التي لوحظت في الجهاز العصبي المسوخ معيبة معدل الحركة والتنسيق الشاذة، وحركات تشنجية في البالغين، وكذلك العجز في انكماش تحوي من الجسم الجدار العضلي، والشلل الجزئي لليرقات تخفيضها. وقد استغلت هذه الظواهر في تطوير شاشات الوراثية الإنتاجية العالية والمقايسات تنقل اليرقات متحولة 5و 6 و 7-10 الكبار ذبابة الفاكهة التي تهدف إلى قياس انخفاض تنقل وتحديد الجينات الضرورية لوظيفة الجهاز العصبي. في حين أن هذه الأساليب هي مفيدة للغاية لقياس السلوكيات قاطرة اليرقات والكبار، فشلوا في نقل المعلومات النوعية عن كل سلوك منحرف محدد. على سبيل المثال، في حين متحولة الثالثة يرقات العمر قد يحمل المعلمات تنقل المتغيرة في الفحص السلوكي، قد يكون من غير الواضح ما إذا كان هذا هو نتيجة لتغيرات في تقلصات تحوي الإيقاعي خلال دورة الزحف، نقص عام في التنسيق، أو الشلل الجزئي من الجسم الخلفي الجدار العضلي. نحن هنا وصف تقنية المجهر بسيطة ويمكن الوصول إليها على نطاق واسع للحصول على فيديو عالي الجودة الرقمية من ذبابة الفاكهة الكبار والظواهر قاطرة اليرقات من منظور جانبي. الفيديو الرقمي المكتسبة من منظور جانبي يسمح الملاحظة المباشرة وتحليل الفروق الدقيقة في وكوموتيفالبريد السلوكيات من أكثر بالمعلومات الجانبية الرأي التوجه.
Protocol
Representative Results
Discussion
قوة ذبابة الفاكهة السوداء 'ق كنظام نموذج لدراسة وظيفة الجهاز العصبي تنبع إلى حد كبير من التقارب من أدوات قوية الجينية المتاحة ومجموعة واسعة من المقايسات سلوكية قوية المتقدمة. هنا نقدم تقنية المجهر بسيطة ويمكن الوصول إليها على نطاق واسع للحصول على فيديو عالي ا…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
الكتاب نود أن نعترف الكسندرا أوبي للحصول على المساعدة الفنية والدعم، جيمس بارتون لتوفير السرد الفيديو، ورامونا Flatz وJoellen سويني لتظهر في شريط الفيديو المصاحب. وأيد هذا العمل من قبل صندوق موردوك MJ الخيرية (منحة رقم 2012205 لJED).
Materials
| Trinocular Stereozoom Microscope | Olympus Corporation | SZ6145TR | ½ C-mount was removed and replaced with 1x C-mount |
| 1X C-mount | Leeds Precision Instruments | LSZ-1XCMT2 | |
| Digital Camera Coupler (43mm thread) | Qioptiq Imaging Solutions | 25-70-10-02 | |
| 58mm to 48mm Step Down Ring | B&H Video | GBSDR5848 | |
| 48mm to 43mm Step Down Ring | B&H Video | GBSDR4843 | |
| Lensmate Adapter Kit for Canon G10 | LensMateOnline.com | ||
| Canon PowerShot G10 Digital Camera | Canon U.S.A., Inc. | ||
| 1.5ml Spectroscopic PolystereneCuvette | Denville Scientific | U8650-4 |
References
- Zhang, B., Freeman, M. R., Waddell, S. . Drosophila neurobiology: a laboratory manual. , (2010).
- Frank, C. A., et al. New approaches for studying synaptic development, function, and plasticity using Drosophila as a model system. J Neurosci. 33, 17560-17568 (2013).
- Mudher, A., Newman, T. . Drosophila : a toolbox for the study of neurodegenerative disease. , (2008).
- Bilen, J., Bonini, N. M. Drosophila as a model for human neurodegenerative disease. Annu Rev Genet. 39, 153-171 (2005).
- Jakubowski, B. R., Longoria, R. A., Shubeita, G. T. A high throughput and sensitive method correlates neuronal disorder genotypes to Drosophila larvae crawling phenotypes. Fly (Austin). 6, 303-308 (2012).
- Caldwell, J. C., Miller, M. M., Wing, S., Soll, D. R., Eberl, D. F. Dynamic analysis of larval locomotion in Drosophila chordotonal organ mutants). Proc Natl Acad Sci U S A. 100, 16053-16058 (2003).
- Jahn, T. R., et al. Detection of early locomotor abnormalities in a Drosophila model of Alzheimer’s disease. J Neurosci Methods. 197, 186-189 (2011).
- Donelson, N. C., et al. High-resolution positional tracking for long-term analysis of Drosophila sleep and locomotion using the "tracker" program. PLoS ONE. 7, e37250 (2012).
- Slawson, J. B., Kim, E. Z., Griffith, L. C. High-resolution video tracking of locomotion in adult Drosophila melanogaster. J Vis Exp. (24), (2009).
- Colomb, J., Reiter, L., Blaszkiewicz, J., Wessnitzer, J., Brembs, B. Open source tracking and analysis of adult Drosophila locomotion in Buridan’s paradigm with and without visual targets. PLoS ONE. 7, e42247 (2012).
- Demerec, M. . Biology of Drosophila. , (1965).
- Barron, A. B. Anaesthetising Drosophila for behavioural studies. J Insect Physiol. 46, 439-442 (2000).
- Greenspan, R. J. . Fly pushing : the theory and practice of Drosophila genetics.. , (2004).
- Duncan, J. E., Lytle, N. K., Zuniga, A., Goldstein, L. S. The Microtubule Regulatory Protein Stathmin Is Required to Maintain the Integrity of Axonal Microtubules in Drosophila. 8, e683244 (2013).
- Belmont, L. D., Mitchison, T. J. Identification of a protein that interacts with tubulin dimers and increases the catastrophe rate of microtubules. Cell. 84, 623-631 (1996).
- Cassimeris, L. The oncoprotein 18/stathmin family of microtubule destabilizers. Curr Opin Cell Biol. 14, 18-24 (2002).
