के उच्च गुणवत्ता वाले डिजिटल वीडियो का अधिग्रहण<em> ड्रोसोफिला</em> एक पार्श्व परिप्रेक्ष्य से लार्वा और वयस्क व्यवहार
Summary
यहाँ हम एक पार्श्व नजरिए से ड्रोसोफिला वयस्क और लार्वा उत्परिवर्ती phenotypes की उच्च गुणवत्ता वाले डिजिटल वीडियो प्राप्त करने के लिए एक सरल और व्यापक रूप से सुलभ माइक्रोस्कोपी तकनीक का वर्णन.
Abstract
ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर तंत्रिका तंत्र के समारोह के अध्ययन के लिए एक शक्तिशाली प्रयोगात्मक मॉडल प्रणाली है. तंत्रिका तंत्र की शिथिलता का कारण है कि जीन म्यूटेशन अक्सर व्यवहार्य लार्वा और पर्याप्त रूप से पाठ के साथ वर्णन या पूरी तरह से एक भी फोटो छवि के साथ प्रतिनिधित्व करने के लिए मुश्किल हो जाता है कि हरकत दोषपूर्ण phenotypes है कि वयस्कों का उत्पादन. वैज्ञानिक प्रकाशन की वर्तमान मोड, हालांकि, एक पांडुलिपि साथ देने के लिए पूरक सामग्री के रूप में डिजिटल वीडियो मीडिया के प्रस्तुत करने का समर्थन. यहाँ हम एक पार्श्व नजरिए से दोनों ड्रोसोफिला लार्वा और वयस्क phenotypes की उच्च गुणवत्ता वाले डिजिटल वीडियो प्राप्त करने के लिए एक सरल और व्यापक रूप से सुलभ माइक्रोस्कोपी तकनीक का वर्णन. यह न्यायपालिका लोकोमोटिव व्यवहार में अवलोकन और सूक्ष्म भेद और विविधताओं के विश्लेषण की अनुमति देता है क्योंकि एक ओर देखने से लार्वा और वयस्क हरकत का वीडियो फायदेमंद है. हम सफलतापूर्वक कल्पना और aberran यों तकनीक का इस्तेमाल किया हैटी संवारने सहित वयस्क उत्परिवर्ती phenotypes और व्यवहार के अलावा, तीसरे instar लार्वा में व्यवहार रेंगने.
Introduction
आम फल ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर मक्खी तंत्रिका तंत्र 1-3 के समारोह के अध्ययन के लिए एक शक्तिशाली प्रयोगात्मक मॉडल प्रणाली है. विकासवादी संरचना और मनुष्यों के साथ तंत्रिका तंत्र के समारोह के संरक्षण, साथ ही आनुवंशिक हेरफेर की आसानी और आनुवंशिक उपकरणों की एक विशाल सरणी ड्रोसोफिला मानव neurodegenerative रोगों 4 मॉडल के प्रीमियर जीव बनाता है. तंत्रिका तंत्र की शिथिलता का कारण है कि जीन म्यूटेशन अक्सर बिगड़ा हरकत से व्यवहार्य उत्परिवर्ती लार्वा और वयस्क ड्रोसोफिला में परिणाम. तंत्रिका तंत्र दोषपूर्ण म्यूटेंट में मनाया phenotypes हरकत, न्यायपालिका समन्वय, और वयस्कों में मानसिक आंदोलनों की दर है, साथ ही शरीर दीवार मांसलता की क्रमिक वृत्तों में सिकुड़नेवाला संकुचन में घाटे, और लार्वा का आंशिक पक्षाघात कम करना शामिल है. इन phenotypes उच्च throughput आनुवंशिक स्क्रीन और उत्परिवर्ती लार्वा 5 की हरकत assays के विकास में शोषण किया गया है, हरकत हानि बढ़ाता है और तंत्रिका तंत्र के समारोह के लिए आवश्यक जीन की पहचान करने के उद्देश्य से 6 और वयस्क 7-10 ड्रोसोफिला. इन तरीकों लार्वा और वयस्क लोकोमोटिव व्यवहार बढ़ाता के लिए अत्यंत उपयोगी हैं, वे एक विशिष्ट न्यायपालिका व्यवहार के बारे में गुणात्मक जानकारी देने के लिए असफल. उत्परिवर्ती तीसरे instar लार्वा एक व्यवहार परख में बदल हरकत मापदंडों प्रदर्शन कर सकते हैं, जबकि इस रेंगने चक्र के दौरान लयबद्ध क्रमिक वृत्तों में सिकुड़नेवाला संकुचन में परिवर्तन, समन्वय की सामान्य कमी, या पीछे शरीर का आंशिक पक्षाघात का परिणाम है अगर उदाहरण के लिए, यह स्पष्ट नहीं हो सकता है दीवार मांसलता. यहाँ हम एक पार्श्व नजरिए से ड्रोसोफिला वयस्क और लार्वा लोकोमोटिव phenotypes की उच्च गुणवत्ता वाले डिजिटल वीडियो प्राप्त करने के लिए एक सरल और व्यापक रूप से सुलभ माइक्रोस्कोपी तकनीक का वर्णन. एक पार्श्व नजरिए से अधिग्रहीत डिजिटल वीडियो locomotiv में सूक्ष्म भेद का प्रत्यक्ष अवलोकन और विश्लेषण की अनुमति देता हैएक अधिक सूचनात्मक ओर देखने के उन्मुखीकरण से ई व्यवहार.
Protocol
Representative Results
Discussion
तंत्रिका तंत्र समारोह के अध्ययन के लिए एक मॉडल प्रणाली के रूप में ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर की ताकत को काफी हद तक उपलब्ध शक्तिशाली आनुवंशिक उपकरणों के अभिसरण और विकसित मजबूत व्यवहार assays के व्यापक स?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखकों वीडियो कथन प्रदान करने के लिए तकनीकी सहायता और समर्थन, जेम्स बार्टन के लिए एलेक्जेंड्रा ओपी स्वीकार करने के लिए इच्छा है, और साथ वीडियो में दिखने के लिए रमोना Flatz और Joellen स्वीनी. इस काम एम.जे. Murdock चैरिटेबल ट्रस्ट (JED को अनुदान संख्या 2012205) द्वारा समर्थित किया गया.
Materials
| Trinocular Stereozoom Microscope | Olympus Corporation | SZ6145TR | ½ C-mount was removed and replaced with 1x C-mount |
| 1X C-mount | Leeds Precision Instruments | LSZ-1XCMT2 | |
| Digital Camera Coupler (43mm thread) | Qioptiq Imaging Solutions | 25-70-10-02 | |
| 58mm to 48mm Step Down Ring | B&H Video | GBSDR5848 | |
| 48mm to 43mm Step Down Ring | B&H Video | GBSDR4843 | |
| Lensmate Adapter Kit for Canon G10 | LensMateOnline.com | ||
| Canon PowerShot G10 Digital Camera | Canon U.S.A., Inc. | ||
| 1.5ml Spectroscopic PolystereneCuvette | Denville Scientific | U8650-4 |
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