Summary

Номера для терминалов методы проб крови у морских свинок

Published: October 11, 2014
doi:

Summary

Хотя известной модели, морская свинка настоящее время представляет собой нишу в экспериментальных науках животных и ограниченные данные о выполнении большинства процедур. Здесь мы представляем четыре различных подхода к не-терминала в естественных методов отбора проб крови в любом сознательных или наркозом морских свинок.

Abstract

Морские свинки обладают рядом биологических сходство с людьми и проверяются экспериментальные модели на животных 1-3. Тем не менее, использование морских свинок в настоящее время представляет собой относительно узкую область исследований и описательных данных на конкретные методики, соответственно мало. Анатомические особенности морских свинок немного отличаются от других моделей грызунов, следовательно, модуляция методов отбора проб для размещения на конкретные виды различий, например., По сравнению с мышами и крысами, которые необходимы для получения достаточных и высокие образцы качества. Как и долгосрочной и краткосрочной перспективе в естественных условиях исследования часто требуются повторные кровь выборки Выбор метода должен быть хорошо продуманы, чтобы уменьшить стресс и дискомфорт у животных, но и для обеспечения выживания, а также соблюдения требований размера выборки и доступности. Образцы венозной крови можно получить в ряде мест в морских свинок например., Подкожной и яремную венувены, каждая техника, содержащий как преимущества, так и недостатки 4,5. Здесь мы представляем четыре различных методов выборки крови ни для сознательных или наркозом морских свинок. Процедуры все нетерминальные процедуры при условии, что объемы проб и количество образцов не превышает руководящие принципы для сбора крови в лабораторных животных 6. Все описанные способы были тщательно протестированы и применяются для повторяются в выборке естественных крови в исследованиях в рамках нашего научно-исследовательского центра.

Introduction

Морская свинка является ценным и утверждена экспериментальная модель животного в силу ряда биологических сходства с людьми, таких как требование для диетического питания витамина С, сопоставимой плазмы липопротеинов биотрансформации ферменты и профили липопротеинов, а также общие черты с человеческой плаценты и внутриутробного развития 1-3,7,8. Это делает морскую свинку привлекательным и подходящим модели для изучения последствий диеты-ассоциированных заболеваний, таких как безалкогольное жировой болезни печени, сердечно-сосудистых заболеваний и предполагаемых последствий Дефицит витамина С, но и эффектом, например., Материнской диетического вмешательства на развивающихся потомство.

Выборки Повторное крови часто требуется в обоих долгосрочной и краткосрочной перспективе в естественных условиях исследования. В связи с видоспецифических анатомических различий модуляция технике отбора проб необходимо для того, чтобы получить образцы крови у морских свинок по сравнению с другими моделях грызунов <sup> 4,5. Это включает в себя изменение в ходе вен и артерий, а также, что морские свинки не есть хвост, таким образом, имеют различные требования и параметры для обоих проб и обработки. Отбор проб из подкожного нерва или лапок вену, вызывает минимальный дискомфорт и стресс у животного и не требует анестезии 3,9. Этот метод позволяет повторяется образцы небольшого количества крови (100-400 мкл), например., Чтобы определить биохимические маркеры в плазме. Если даже меньше размер выборки достаточно (50-100 мкл), это довольно легко могут быть получены путем прокалывания вены уха. Этот метод также может быть осуществлен в сознании животных, а полезно, например, при измерении уровня глюкозы в крови 10,11. Отбор проб из яремной вены позволяет для сбора больших количеств крови (1-2 мл), но требует анестезии.

Здесь мы представляем четыре различных методов выборки крови ни для сознательных или наркозом морских свинок. Прокedures все нетерминальные процедуры при условии, что объемы проб и количество образцов не превышает руководящие принципы для сбора крови в лабораторных животных 6. Это в интересах хорошей науки, а также защиты животных, что стресс должен быть сведен к минимуму. Следовательно, только хорошо подготовленных и компетентных личный должны выполнять процедуры животных.

Protocol

Показанные процедуры были выполнены в соответствии с протоколами, утвержденными Датский экспериментов на животных инспекцией при Министерстве продовольствия, сельского хозяйства и рыболовства. 1 проб крови от боковых подкожной или предплюсны Вене Выполните эту…

Representative Results

Четыре различные подходы к нетерминальными в естественных условиях методов отбора проб крови в любом сознательных или наркозом морских свинок были представлены. Рисунок 1 иллюстрирует ход боковой подкожного нерва и лапок вены в морской свинки и возможных мест прокола. У…

Discussion

По сравнению с мышами и крысами, морскими свинками являются страх по своей природе и должны подходить спокойно и правильно обработаны с тем, чтобы уменьшить напряжение. С точки защиты животных зрения, действуя с осторожностью, естественно, приоритет; Однако, это также снизить риск трев?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Мы признаем умелую помощь Энни Б. Кристенсен, Элизабет В. Андерсен, Belinda Б. Bringtoft и смотрителей животных на кафедре экспериментальной медицины, Frederiksberg Campus, факультет здравоохранения и медицинских наук, Университет Копенгагена, Дания. Иаков Lønholdt объявлена ​​благодарность за его отличную техническую помощь в съемках процедуры. Это исследование было поддержано частично LIFEPHARM Центра в естественных условиях фармакологии и Университета Копенгагена.

Materials

Name of Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
Electric shaver Wella (Contura), Denmark 273207 Alternative product may be used. Multiple suppliers
Syringes  B.Braun-Omnifix-F, Germany 9161406V Alternative product may be used. Multiple suppliers
Needles BD Microlance,Spain 301156 Alternative product may be used. Multiple suppliers
Microvette collection tube  Sarstedt, D-51588Nümbrecht, Germany 201,288,100 Alternative product may be used. Multiple suppliers
Accu-Check analyzer Roche A/S Diagnostics, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Heparin 5000 IE/ml LEO Pharma, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Anesthesia Zoletil 50, Chemvet, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Anesthesia Narcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Anesthesia Torbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, Denmark Alternative product may be used. Multiple suppliers
Neutral eye ointment Alternative product may be used. Multiple suppliers
Gauze or a cotton swab  Alternative product may be used. Multiple suppliers
Disinfectant (70% alcohol) Alternative product may be used. Multiple suppliers

References

  1. DeOgburn, R., et al. Effects of increased dietary cholesterol with carbohydrate restriction on hepatic lipid metabolism in Guinea pigs. Comp.Med. 62 (2), 109-115 (2012).
  2. Fernandez, M., Volek, J. S. Guinea pigs a suitable animal model to study lipoprotein metabolism, atherosclerosis and inflammation. Nutr Metab (Lond). 3 (17), (2006).
  3. Frikke-Schmidt, H., Tveden-Nyborg, P., Birck, M. M., Lykkesfeldt, J. High dietary fat and cholesterol exacerbates chronic vitamin C deficiency in guinea pigs. Br J Nutr. 105 (1), 54-61 (2011).
  4. Hem, A., Smith, A. J., Solberg, P. Saphenous vein puncture for blood sampling of the mouse, rat, hamster, gerbil, guinea pig, ferret and mink. Lab Anim. 32 (4), 364-368 (1998).
  5. Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. Blood sample collection in small laboratory animals. J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).
  6. Guillen, J. FELASA guidelines and recommendations. J Am Assoc Lab Anim Sci. 51 (3), 311-321 (2012).
  7. Ye, P., Cheah, I. K., Halliwell, B. High fat diets and pathology in the guinea pig Atherosclerosis or liver damage. Biochim Biophys Acta. 1832 (2), 355-364 (2013).
  8. Tveden-Nyborg, P., et al. Maternal vitamin C deficiency during pregnancy persistently impairs hippocampal neurogenesis in offspring of guinea pigs. PLoS One. 7 (10), 12-18391 (2012).
  9. Schjoldager, J. G., Tveden-Nyborg, P., Lykkesfeldt, J. Prolonged maternal vitamin C deficiency overrides preferential fetal ascorbate transport but does not influence perinatal survival in guinea pigs. Br J Nutr. 110 (9), 1573-1579 (2013).
  10. Greulich, S., et al. Secretory products of guinea pig epicardial fat induce insulin resistance and impair primary adult rat cardiomyocyte function. J Cell Mol Med. 15 (11), 2399-2410 (2011).
  11. Swifka, J., Weiss, J., Addicks, K., Eckel, J., Rosen, P. Epicardial fat from guinea pig a model to study the paracrine network of interactions between epicardial fat and myocardium. Cardiovasc Drugs Ther. 22 (2), 107-114 (2008).
  12. Pilny, A. A. Clinical hematology of rodent species. Vet.Clin North Am Exot Anim Pract. 11 (3), 523-vii (2008).
  13. Franco, N. H., Olsson, I. A. Scientists and the 3Rs: attitudes to animal use in biomedical research and the effect of mandatory training in laboratory animal science. Lab Anim. 48 (1), 50-60 (2014).
  14. Van, L. J., et al. eAssessing the application of the 3Rs a survey among animal welfare officers in The Netherlands. Lab Anim. 47 (3), 210-219 (2013).
  15. Sloan, R. C., et al. High doses of ketamine-xylazine anesthesia reduce cardiac ischemia-reperfusion injury in guinea pigs. J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (3), 349-354 (2011).
  16. Jacobson, C. A. A novel anaesthetic regimen for surgical procedures in guinea pigs. Lab Anim. 35 (3), 271-276 (2001).
  17. Saha, J. K., Xia, J., Grondin, J. M., Engle, S. K., Jakubowski, J. A. Acute hyperglycemia induced by ketamine xylazine anesthesia in rats mechanisms and implications for preclinical models. Exp Biol Med(Maywood). 230 (10), 777-784 (2005).
check_url/fr/51982?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Birck, M. M., Tveden-Nyborg, P., Lindblad, M. M., Lykkesfeldt, J. Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs. J. Vis. Exp. (92), e51982, doi:10.3791/51982 (2014).

View Video