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Article de méthode

Le lapin de sang-shunt modèle pour l'étude de aiguë et les séquelles tardives de hémorragie méningée: Aspects techniques

13.3K vues

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DOI :

10.3791/52132

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2 octobre 2014

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Dans cet article

Résumé

Le modèle expérimental d’hémorragie sous-arachnoïdienne (HSA) par dérivation sanguine contrôlée par pression intracrânienne chez le lapin combine les procédures standard - canulation de l’artère sous-clavière et ponction transcutanée de la citerne magna, ce qui permet d’imiter étroitement les conditions physiopathologiques humaines après une HSA. Nous présentons des instructions étape par étape et discutons des points chirurgicaux clés pour une création expérimentale réussie de l’HSA.

Résumé

Lésion cérébrale précoce et le vasospasme cérébral retardé à la fois contribuer à des résultats défavorables après une hémorragie méningée (SAH). Modèles animaux reproductibles et contrôlables qui simulent les conditions sont actuellement rares. Par conséquent, de nouveaux modèles sont nécessaires afin de reproduire les conditions physiopathologiques humaines résultant de SEP.

Ce rapport décrit les nuances techniques d'un modèle de SEP sang-shunt lapin qui permet un contrôle de la pression intracrânienne (PIC). Une dérivation extracorporelle est placée entre le système artériel et l'espace sous-arachnoïdien, ce qui permet examinateur indépendant SAH dans un crâne de fermeture. Étape par étape les instructions de procédure et de l'équipement nécessaire sont décrits, ainsi que les considérations techniques pour produire le modèle de la mortalité et une morbidité minimale. Des détails importants nécessaires pour la création chirurgicale réussie de ce modèle robuste, simple et cohérente SAH lapin ICP-contrôlée sont décrits.

Introduction

Hémorragie hémorragie méningée (HSA) est l'une des plus mortelles conditions neuropathologiques, conduisant souvent à des dommages ou la mort 1 neurologiques permanentes. Des recherches antérieures ont mis l'accent sur ​​le vasospasme cérébral retardé (DCVS) que l'étiologie primaire des déficits neurologiques associés à la SEP 2. Cependant, les pauvres en général les résultats cliniques des patients souffrant de SEP après le traitement du vasospasme a conduit à une expansion de l'axe de recherche pour inclure les effets de la petite lésion cérébrale (EBI) après SAH 3. Une meilleure compréhension de l'importance à l....

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Protocole

Trois mois vieilles femelles lapins néo-zélandais pesant 2.5-3.5 kg ont été utilisés pour cette procédure. L'étude a été réalisée en conformité avec les Instituts nationaux de la santé des lignes directrices pour les soins et l'utilisation des animaux de laboratoire et avec l'approbation du Comité du canton de Berne, Suisse (approbation n ° 105/13) de protection des animaux. Toutes les interventions chirurgicales ont été réalisées dans des conditions stériles à l'Institut de chirurgie expérimentale du Département de recherche clinique à l'hôpital universitaire de Berne à Berne, Suisse. Un anesthésiste vétérinaire a suivi les animaux pendant la chi....

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Résultats

Le modèle de shunt de sang de lapin de SAH décrit dans ce rapport produit EBI dans l'hippocampe (figure 2A, B), le cortex basale (Figure 2A, B), et le système vasculaire cérébral (figure 2C) dès 24 h après la blessure et représente une caractéristique distribution du sang (figure 2D) 8. En outre, le modèle déclenche modérée à des degrés sévères de DCVS sur trois jours après SAH induction (figure 3) 10. Le taux de m.......

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Discussion

Le modèle de dérivation produit pathologie similaire à celle observée chez l'homme après aiguë SAH 3,8,10. Il a été suggéré que EBI peut exacerber, maintenir et même déclencher DCVS 12, et que ce tel modèle peut aider à enquêter sur les phases précoces et tardives DCVS, y compris les interactions EBI et DCVS suivantes SAH. En particulier, reproductible in vivo DCVS techniques de surveillance, y compris DSA 13, calculé angiographie par tomographie 14, et Doppler tr.......

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Déclarations de divulgation

Aucun. Les auteurs n’ont aucun intérêt financier ou commercial dans les médicaments, le matériel ou l’équipement utilisés. Aucun financement spécifique n’a été reçu pour ces travaux. Les auteurs sont seuls responsables de la conception et de la conduite de l’étude présentée et ne signalent aucun conflit d’intérêts concernant les matériaux et les méthodes utilisés dans cette étude ou les résultats spécifiés dans l’article. Ils confirment le respect des normes éthiques. L’étude a été réalisée conformément aux directives des National Institutes of Health pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire et avec l’approbation du Comité de protection des animaux du canton de Berne, Suisse (approbation #109/07 et #107/09).

Remerciements

Les auteurs remercient Laurie von Melchner, Hôpital universitaire de Berne, Département de Neurochirurgie, Berne, Suisse, pour la relecture et l'édition du manuscrit et Paskus Jérémie, Hôpital pour enfants de Boston, Boston, MA pour la relecture du projet initial. Nous apprécions la gestion habile des soins aux animaux, l'anesthésie et l'assistance opérationnelle de Daniel Mettler, DVM, Max Müller, DVM, Daniel Zalokar, et Olgica Beslac, Expérimental Surgical Institute, Département de Recherche Clinique, Université de Berne, Berne, Suisse. Nous remercions Michael Lensch, chef Infirmière de recherche, Département de médecine de soins intensifs de l'hôpi....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Équipement
Microscope opératoireZeiss, Iéna, AllemagneMicroscope chirurgical Zeiss, OPMI-MD
Matériel chirurgicalB. Braun, AllemagneForceps médical n° 5 ; ciseaux vasculaires 8 cm ; microclip 4 mm
RespirateurHugo Sachs
Tondeuse à cheveux3M Tondeuse chirurgicaleStarter Kit 9667A
Body warm plateFHC
Analyseur de gaz du sangRadiomètre, Copenhague, DanemarkABL 725
Surveillance cardiaqueCamino Multi-Parameter Monitor, Integra, Plainsboro, NJ, USAP-05
Analyse logicielleBIOPAC Systems, Inc., Goleta, CA, USABiopac MP100 et acqKnowledge logiciel, version 3.8.1
Analyse logicielleImagePro Discovery, MediaCybernetics, Silver Spring, MD, USAVersion Image-Pro Plus  ;
Appareil d’angiographieDFP 2000 A-ToshibaMIIXR0001EAA
moniteur ICPCamino Laboratories, San Diego, CA, États-Unis MoniteurICP, modèle 110-4B
Moniteur de débit sanguinOxford Optronix Ltd., Oxford, UKCAL KIT solution
microsphère Laser-Doppler flowmetry sondes à aiguille fineOxford Optronix Ltd., Oxford, Royaume-UniMNP110XP, 0,48 mm de diamètre
Tube de forceB. Braun, GermayPE 1.0 mm × ; 2.0 mm
Moniteur d’anesthésieGE Medical Systems, Suisse  ;Matériau
Cathéter vasculaire 20 G Cathéter intraveineuxSmiths MedicalJelco, REF 4057
5.5 F Cathéter veineux central à trois lumières  ;Connecteurs, Tagelswangen, SuisseCathéter en silicone STH-C040
22 G x 40 mm aiguille  ;Emergo Group Inc., Pays-Bas
Micro-foreuse à grande vitesseStryker, Soleure, Suisse5400-15  ;
Cire d’osEthicon, Johnson & Johnson, NJ, États-UnisETHW31G
Pince bipolaireAesculap, Inc., PA, États-UnisUS349SP  ;
KétamineTout produit générique
XylazineTout produit générique
BuprénorphineTout produit générique
FentanylTout produit générique
Patchs matriciels de fentanyl transdermique  ;Tout produit générique
Lidocaïne 1 %  ;Tout produit générique
4 % papaverine HCl  ;Tout produit générique
Sulfate de néomycine  ;Research Organics Inc., OH, États-UnisTout produit générique
Povidone-iode  ;Tout produit générique
ChlorureTout produit générique
Iopamidol  ;Abott Laboratories, IL, États-UnisTout produit générique
Suture résorbable 3-0Ethicon Inc., États-UnisVCP824G
Suture non résorbable 5-0Ethicon Inc., États-Unis8618G
4-0 Sutures polyfilamentsEthicon Inc., États-UnisVCP284G
de du moniteur Datex S5 de sodium 0,9 %

Références

  1. Taylor, T. N., et al. Lifetime cost of stroke in the United States. Stroke; a journal of cerebral circulation. 27, 1459-1466 (1996).
  2. Kikkawa, Y., Kameda, K., Hirano, M., Sasaki, T., Hirano, K.

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Réimpressions et autorisations

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