The ability to assess executive functions such as behavioral flexibility in rats is useful for investigating the neurobiology of cognition in both intact animals and disease models. Here we describe automated tasks for assessing strategy shifting and reversal learning, which are particularly sensitive to disruptions in prefrontal cortical networks.
집행 기능은 규칙 생성 및 행동 선택을 구동 여러 높은 수준의인지 과정으로 구성되어 있습니다. 이러한 프로세스의 발적 속성은 하나의 환경 (즉, 행동의 유연성)의 변화에 대응하여 동작을 조정하는 기능입니다. 이러한 프로세스는 정상적인 인간의 행동에 필수적이며, 정신 분열증, 알코올 중독, 우울증, 뇌졸중, 알츠하이머 병 등 다양한 신경 정신 상태에서 중단 될 수 있습니다. 집행 기능의 신경 생물학의 이해는 크게 행동의 유연성, 특히 전략 이동 및 반전 학습의 개별 구성 요소를 평가하기위한 동물 작업의 가용성에 의해 진행되고있다. 여러 종류의 작업이 개발되었지만, 대부분이 자동화 된 비 노동 집약적이며, 한 번에 하나의 실험 동물을 허용한다. 행동의 유연성을 평가하기위한 자동화, 조작 적 기반 작업의 최근 개발 TES를 간소화팅은, 자극 프레 젠 테이션 및 데이터 기록을 표준화하고, 극적으로 처리량을 향상시킵니다. 여기서 우리는 사용자 정의 작성된 소프트웨어 프로그램에 의해 제어 조건화 챔버를 사용하여, 전략 이동과 반전 작업을 자동화 설명합니다. 이러한 작업을 사용하여, 우리는 내측 전전두엽 피질 전략 변속을 제어하지만 반전 인간에서 관찰 해리 유사한 쥐의 학습 것으로 나타났다. 또한, 신생아 해마 병변, 정신 분열증의 신경 발달 모델 동물은 선택적 전략 변속 태스크 아닌 반전 작업에 장애가된다. 전략 이동 작업은 별개의 신경 기판에 기인 각각의 성능 오류, 별도의 유형을 식별 할 수 있습니다. 이러한 자동화 된 작업의 가용성 및 별도의 전두엽 영역의 해리 기여를지지하는 증거는, 그들을 특히 적합 기본 신경 생물학적 과정의 조사에 대한 분석뿐만 아니라 박사한다질병 모델에 UG 검색 및 심사.
규칙 생성, 행동 선택 및 전략 평가 포함한 하이 레벨인지 과정이 모두 "집행 기능"또는라고도 "행동 유연성 하나."은 프로세스가 정상인지 기능에 중요하고, 정신 분열증과 같은 다양한 질환에서 손상 될 수있다 , 알코올 중독, 우울증, 뇌졸중, 알츠하이머 병 2-7. 집행 기능의 조절 방법은 주로 배 외측 전전두엽 인간 8-10에서 안와 전두엽 피질 포함한 전두엽 피질 영역에 의해 매개된다.
작업의 개발은 집행 기능 및 / 또는 인간이 아닌 동물, 특히 쥐의 행동의 유연성을 평가하기 위해,인지 11 ~ 14의 신경 생물학의 이해를 고급 크게하고있다. 이러한 과제는 다음과 같은 별개의 뚜렷한 행동 유연성 성분을 측정하는 것을 가능하게했다전략 변속 반전 학습. 전략 시프 팅 기능을 말합니다 특히 자극 크기 (extradimensional 변화)를 통해, 새로운 경쟁 전략을 취득하면서 적극적으로 이전에 배운 대응 전략을 억제 – 빨강은 녹색, 대 (빨간색 시각 차별을 수행에서 전환, 예를 들어, "올바른"과 촉각 자극 (여기서 부드러운 것은 "올바른"이고 시각적 자극이 지금 무관, 대 거친 부드럽게) 촉각 차별을 수행하기에) 관련이 있습니다. 한편, 반전 학습 또한 응답 전략의 변화를 포함하지만, 동일한 자극 치수 내에 – 레드 이전 정확 경우 등은, "레드 그린 vs"예에서는, 반전이 녹색을 지시 할 지금 정확 촉각 자극 관련이 남아있을 것있다.
여러 작업은 설치류 행동 유연성을 조사하기 위해 개발되었다. 크로스 MA'제 작업은 먼저 방향을 기반 규칙 (예를 들어, "항상 우회전") 또는 성능의 특정 기준에 시각적 기반 규칙 (예를 들어, "항상 시각적으로 설정")를 배우고 동물을 필요로한다. 그 후, 동물은 예기치 (원래 "nonreversal 교대"(15)라고 함 전략 쉬프팅) 규칙에 대향 양상 가로 질러 이동하거나 또는 반대의 비상 (반전 학습)에 13,14,16 양상에서 전환 할 필요가있다. 이러한 작업은 전두엽 피질, 시상 및 선조체 1,13,14,16-18을 포함, 대뇌 피질 및 피질 네트워크의 중단에 민감하다. (때로는 굴삭 작업이라 함) 주의력 세트 시프트 태스크의 또 다른 유형은 두 개 또는 세 개의 자극 치수 (미디어, 냄새 굴착 및 / 또는 외부 질감)을 따라 다를 두 용기 사이를 구별하기 교육 동물을 필요로한다. 크로스 미로 유사작업은, 다음, 동물 차원에서 (전략 이동)를 이동 또는 동일한 차원 내에서 (반전 학습)하는 데 필요한, 이러한 작업은 전두엽 조작 11,19 유사하게 구분된다. 이 작업의 장점은 여분의 차원의 전략 변화시, 쥐가이 단계에서 성능 장애는 다양한 측면에 주의력 세트를 이동하는 기능의 중단으로 인한 가능성이 보장 자극 (모범)의 소설 세트,되게됩니다 것입니다 복합 자극, 오히려 기능 손상보다 이전에 보상과 관련된 특정 자극에 접근 중지합니다. 그러나,이 기능은 더욱 어렵게 세트 이동하는 동안 적자의 특정 성질을 확인 할 수 있습니다.
상술 한 과제 문헌에 잘 설명되어 있지만, 그들은 모두 절차 많은 단점, 주로 시간의 길이는 동물을 테스트하는 데 걸리는. 모두크로스 미로 태스크 및 굴삭 작업이 단지 하나의 동물은 시간에 테스트 될 수있다; 또한, 테스트는 전용 실험에 의해 실시간으로 관리해야하고, 동물 당 하루에 몇 시간까지 걸릴 수 있습니다. 또한, 자극의 제시 및 작업의 두 가지 유형의 행동 반응의 기록은 수동으로 실험자에 의해 제어하고, 인간의 오류 및 주관적인 해석에 따라서 취약합니다.
여기서는 전략 변속을 평가하고 반전 자극 제어 및 데이터 프리젠 테이션을 간소화하고, 극적으로 데이터 수집 속도를 향상시키고 20,21 스루풋 조건화 절차를 이용하여 쥐의 학습을위한 자동화 된 방법을 설명한다. 모양과 열차 랫트 설명되어 사용되는 방법뿐만 아니라, 작업 자체의 결과 데이터 요소의 분석. 우리는 상호 미로 및 굴착 작업처럼, 이러한 자동화 된 작업은 전두엽의 중단에 민감한 것을 발견했다피질 회로뿐만 아니라 신경 발달 조작에 그 모델 정신 분열증 20-23.
설치류 고차 구조인지를 측정하는 작업 행동인지의 개발은 신경 생물학 기술을 향상시키는 데 필수적이다. 잘 구축 및 검증 작업으로, 설치류는 영장류 또는 인간의 필적하는 복잡한 작업으로 평가 될 수있다. 여기에서 우리는 집행 기능, 전략 이동 및 반전 학습의 두 가지 측면, 자동 조작 적 기술을 사용하여 설치류에서 조사 할 수있는 방법을 보여 주었다. 이러한 자동화 된 작업을 사용하여, 우리는 조작 적 작업이 유효한 평가가 있음을 시사 설정 이동 및 반전 11,13,18-21,27,29 학습의 신경 기판에 대한 상호 미로에 이전 연구 결과 및 굴착 작업을 복제 한 구성한다.
이러한 자동화 된 작업은 자동화되지 않은 크로스 미로 기존 굴착 작업 위에 이점과 장점을 갖는다. 강제적 자동화 조건화 버전의 데이터 수집 속도가 우수하다. 각각의하루의 훈련이나 시험은 30-60분 소요되며, 컴퓨터 제어 실험에 의해 최소한의 감독을 필요로 완전히이다. 또한, 몇몇 동물은 멀티 챔버 조건화 설치와 동시에 시험 할 수있다. 각 작업 시리즈는, 최종 테스트에 성형에서 약 2~3주에 완료 할 수있다. 자동화 된 작업의 또 다른 중요한 장점은 따라서, 실험 오차의 가능성을 최소화 자극 프레젠테이션의 정밀한 제어이다. 예를 들어, 각각의 시험에 대한 큐 위치의 프리젠 테이션의 순서는 수동 재판 별 목록을 재판 컨설팅 컴퓨터가 아닌 실험자에 의해 랜덤 및 제어된다. 시험 사이의 타이밍을 정확하게 측정 일관하고, 예를 들어, 크로스 미로에서 쥐를 제거하거나 파고 컨테이너를 재 배열 실험 걸리는 시간으로 혼동되지 않습니다. 강화 배달 예를 들어, 망각하면을 미끼로 (자동이며, 오류가 실험 될 수 없습니다크로스 미로의 올바른 팔). 데이터 수집은 마찬가지로 정확한 응답 대기 시간의 측정을 포함하여 응답 패턴의 자동 기록으로 개선된다. 다른 모터에 이상이 없을 경우, 응답 지연 시간의 변화는 변경 처리 속도의 증거를 추론 및 / 또는 태스크 (21, 22)의인지 적 복잡도의 수준을 판단하기 위해 사용될 수있다.
자동화 된 작업은 또한 크로스 – 미로 작업 중 하나의 중요한 장점을 유지 : 시프트 또는 날에 반전하는 오류 유형의 상세한 분석을 수행하는 능력. 이전에 시도되지 않은 전략 (결코 강화되지 오류)를 나타냅니다 세트 시프트 전날의 전략 (보속 또는 퇴행 오류) 복제 오류와 오류 사이에 구별하는 것은 행동의 유연성에 특정 적자를 특성화에 지원할 수 있습니다. 특히, 초기 테스트에서 발생하는 보속 오류는 이전 성을 포기하는 동물의 무능력을 반영rategy는 나중에 발생하는 동안 회귀 오류가 perseveration 20 중단되면 새로운 전략을 유지하기 위해 동물의 무능력을 반영한다. 절대 강화되지 오차 새로운 전략, 또는 규칙에 따른 20 체계적 대응하는 무능력을 획득 실패를 나타낼 수있다. 이러한 유형의 오류의 해리 신경 해부학 적 기초를 보여주는 이전 연구 결과는 16,17,20 또한 이러한 작업의 결과를 해석하는 가치가있다.
우리의 절차 개발 및 쥐와 함께 사용하기에 최적화되어있다. 이는 다른 그룹 쥐 (31)에 설정 이동 능력을 테스트하기 위해 유사한 절차를 사용한했다되고. 그러나 특정 수정은 종의 차이를 수용하기 위해 마우스를 고용 할 필요가있다. 이 레버 확장, 30 시험 / 일 및 잘못된 선택 후 타임 아웃 처벌의 통합 사용하여 여러 일 훈련에 앞서 가시 큐 빛의 긴 프리젠 테이션을 포함한다. AlthouGH 이러한 수정은 약물 문제와 함께 사용, 그것은 (는 이러한 수정 작업의 전두엽 감도를 유지할지 여부 불분명하지만) 유전자 변형 생쥐의인지 적 유연성을 평가하는 데 유용 할 수있는이 분석이 용이하지합니다.
물론, 이러한 작업에 제한 사항이 있습니다. 다른 사람이 작업 자체의 매개 변수에 관련하는 동안 이러한 제한 중 일부는 작업의 자동화 된 자연에서 발생한다. 후자와 관련하여, 여기에 설명 된 태스크 집합 시프트 (물론 크로스 미로 설정된 시프트 태스크 26)은 자극 및 응답의 제한된 세트를 이용한다. 신규 모범 (예, 냄새 또는 생소한 굴착 매체) 각 스테이지에서 새로운 11,19 주의력 세트를 구성하는데 사용될 수있는 굴착 작업과는 달리, 조건화 세트 시프트 작업은 반드시에게 친숙한 두 자극 사이의 선택이 필요 동물 – 중 왼쪽 대오른쪽 큐 빛, 또는 오른쪽으로 위치 대 왼쪽. 이것은 새로운, 이전에 관련이없는 자극 차원에 하나의 전략 변화의 개념은 20,23 보존되어 있지만 조건화 및 교차 미로 설정 이동 작업, 응답 갈등뿐만 아니라 전략 이동을 포함하는 것을 의미한다. 관련 메모, 설정 이동 및 반전 파고 미디어, 냄새, 질감 11,19을 포함 할 수있다 굴착 작업에서와 같이, 세 번째 경기 부양 차원을 허용하지 않습니다 여기에 설명 된대로 조작 적 작업에. 조작 적 설정 이동 작업이 여전히 이전에 관련 차별 전략을 억제하고 이전에 무시 자극 차원에 참석하기 위해 동물을 필요로하지만, 우리는이 치명적인 약점을 고려하지 않습니다. 또한, 이러한 추가는 더 어렵고 덜 AME 학습하게 할 가능성이 있지만, 장비 및 작업 파라미터에 대한 수정은, 예컨대 청각 큐 또는 냄새 등의 제 자극 차원의 추가를 지원할 수 있음을 생각할 보인다하나의 일 약리 시험에 송도 신도시.
즉, 더 이상 실험 쥐를보고 – 마지막으로, 임의의 조건화 태스크 기반의 전위 제한은 쥐의 행동에 대한 직접적인 정보의 손실이다. 우리는 자동화에 의해 수여 객관성과 데이터 수집 속도의 장점 이상이 손실을 만회 것을 느끼고, 카메라 조작 적 챔버에 장착하면 원하는 경우 개별 시각적 액세스를 복원 할 수있는 비교적 쉬운 방법입니다.
이러한 조건화 작업을하여 성공을 최대화하기 위해 취할 수있는 방법에는 여러 가지가있다. 첫째, 동물 훈련을 과장 할 수없는 시작되기 전에 처리의 중요성; 어떤 행동 작업에서와 같이, 잘 처리 동물, 작업하기 쉽게 작은 스트레스를 덜 변수 데이터를 생성하는 경향이있다. 둘째, 몇몇 파일럿 테스트는 테스트를 수행하기 위해 하루 중 가장 좋은 시간을 결정할 필요가있을 수있다; 우리는 빛을주기 동안 테스트하고 그 performan를 찾을 수동물이주기의 끝 부분에서 테스트 할 때 CE 최적이다 (예를 들어, 오후 7시 종료 빛을주기 약 오후 4시). 셋째, 치료 동물은 다음 단계로 전진 pretraining 전에 각 단계에서 설정되었다는 안정적인 성능을 확인하기 위해 취해 져야한다. 예를 들어, 개폐식 레버 교육 단계에서 일관되고 강력한 성능의 "설정"차별 작업에 능숙 성능의 우수한 예측이다. 모든 단계가 자동화되어 있지만, 장비와 관련, 실험 개입은 모든 구성 요소가 제대로 동작 중인지 확인할 필요가 남아있다. (동물의 많은 수의 테스트중인 경우 또는 하루에 한 번 이상) 예를 들어, 장비 검사가 매일 실행해야합니다 모든 조명, 레버 및 보상 전달 시스템이 작동하는지 확인합니다. 특히, 보상 전달 시스템 (특히 펠릿 디스펜서) 불량을 대폭 성능에 영향을 줄 수있다. 누락의 비정상적으로 높은 수에주어진 하루는 보상 전달 장치에 문제를 나타낼 수있다, 따라서 데이터 출력은 작업과 예상 성능 수준을 잘 알고 실험에 의해 매일 확인해야합니다. 장비의 고장이없는 경우, 생략의 수가 많으면 의욕이나 동물의 건강과 다른 문제를 나타낼 수있다. 건강한 동물의 경우, 음식 제한 성능을 회복 할 때까지 짧은 시간 동안 자유 먹이 중량 80 ~ 85 %로 동물을 위해 증가 될 수있다.
이러한 설정 변속 반전 작업은 실험 패러다임의 여러가지의 형태로 사용할 수가있다. 예를 들면, 병변, 발달 치료,식이 조작, 장기간 약물 치료, 또는 유전자 조작과 같은 조작의 효과를 조사 할 수있다. 설정 이동 또는 반전 무대에 치료 효과가 주요 관심사가 될 수 있지만 만성 또는 영구적 인 치료가 반드시 TRAI 전에 투여해야하기 때문에, 그주의닝 (특히 초기 차별 또는 "설정"에) 성능의 여러 단계에 대한 영향도 (21)의 검토가 필요합니다, 시작합니다. 이러한 약리학 적 치료 또는 임시 inactivations 급성 신경 해부학 조작의 사용은, 이러한 작업에 특히 적합하다. 그러한 경우 (도 2에 도시 된 바와 같이) 제 3 그룹은 또한 유용하다; 따라서, 하나의 제어 그룹의 학습에 광범위한 효과를 테스트하기 위해 "SET"초기 차별 당일 조작을 수신하는 동안 차 실험군, 시프트 또는 소멸 일에 관심 조작을 수신하고, 제 2 제어 그룹은 수신 모두 20, 22 일에 아무런 조작을하지 (또는 가짜 치료). 급성 조작 연구에, 그것은 초기 설정의 학습하는 동안 성능 쥐와 일치하고 그에 따라 실험 그룹 (초) 제어 그룹에 할당하는 것이 바람직합니다. 이 미님성능 처리에 의한 차이가 쥐가 자극을 구별하는 법을 배워야하는 방법을 쉽게 개별 변화에 의해 혼동 될 수있는 가능성은 izes. 실험은 몇 주 또는 몇 개월 동안 여러 동료의 테스트를 필요로하는 경우 또한, 각 코호트는 모든 실험군에서 동물을 포함해야한다. 예를 들어, 이동하는 동안 급성 약리 조작의 효과를 테스트하는 연구는 16 동물 각각의 세 코호트 시험 총 48 쥐와 3 실험 그룹을 필요로 할 수있다. 이 경우, 각 코호트 각 실험군 5-6 쥐를 포함해야합니다. 이상적으로, 통계 분석은 쥐의 각 코호트에서 성능의 차이가 없었다 확인하는 요소를 포함해야합니다. 마지막으로, 이러한 조작 적 작업은 통제 된 환경, 자극 presentat의 정확한 타이밍으로 인해 구성 요소, 생체에 기록하는 기술에 적용 미세 투석, 전압 전류 법 및 전기 생리학을 포함에 특히 유용 할 수있다이온과 반응하고, 상호 미로 또는 굴착 작업에서 사용할 수 또는 실제하지 않은 동물의 제한된 움직임.
The authors have nothing to disclose.
Research described here was supported by a grant from the Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada to S.B.F.
Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
Behavioral Chamber Package with Retractable Levers | Med Associates, Inc. | MED-008-B2 | Required components include two retractable levers, two stimulus lights, houselight, and reinforcement delivery system |
MED-PC software | Med Associates, Inc. | SOF-735 | |
MPC2XL software | Med Associates, Inc. | SOF-731 | Data transfer utility for importing raw data into Excel format |
Dustless precision pellets, 45 mg, sugar | Bio-Serv | F0042 |