Photochemically प्रेरित पोस्टीरियर इस्कीमिक ऑप्टिक न्यूरोपैथी के चूहे मॉडल
Summary
इस प्रोटोकॉल के लक्ष्य photochemically चूहे में पीछे ऑप्टिक तंत्रिका इस्कीमिक चोट प्रेरित करने के लिए है। यह मॉडल पीछे इस्कीमिक ऑप्टिक न्यूरोपैथी के pathophysiology का अध्ययन, और इस के लिए चिकित्सकीय दृष्टिकोण और अन्य ऑप्टिक न्यूरोपैथी के लिए महत्वपूर्ण हैं, साथ ही अन्य सीएनएस इस्कीमिक रोगों है।
Abstract
पोस्टीरियर इस्केमिक ऑप्टिक न्यूरोपैथी (PION) नैदानिक व्यवहार में एक दृष्टि से घातक बीमारी है। हालांकि, इसकी रोगजनन और प्राकृतिक इतिहास खराब समझ बनी है। हाल ही में, हम PION का एक विश्वसनीय, प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य पशु मॉडल विकसित किया है और इस मॉडल 1 में कुछ neurotrophic कारकों के उपचार के प्रभाव का परीक्षण किया। इस वीडियो का उद्देश्य पीछे इस्कीमिक ऑप्टिक न्यूरोपैथी की हमारी photochemically प्रेरित मॉडल प्रदर्शित करने के लिए, और रेटिना नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं के प्रतिगामी लेबलिंग के साथ अपने प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए है। पीछे ऑप्टिक तंत्रिका, एक photosensitizing डाई, erythrosin बी की शल्य चिकित्सा जोखिम के बाद, नसों में इंजेक्शन है और एक लेजर बीम ऑप्टिक तंत्रिका सतह पर ध्यान केंद्रित किया है। प्लेटलेट थ्रोम्बोसिस और edematous संपीड़न द्वारा मध्यस्थता microvascular रोड़ा उत्साह विकिरण नुकसान संवहनी अन्तःचूचुक के दौरान erythrosin बी और लेजर के प्रकाश रासायनिक बातचीत। जिसके परिणामस्वरूप इस्कीमिक चोट एक क्रमिक लेकिन pronounc पैदावारएक रिमोट, चोट प्रेरित और चिकित्सकीय प्रासंगिक परिणाम – axonal निवेश का एक नुकसान के कारण रेटिना नाड़ीग्रन्थि सेल dieback एड। इस प्रकार, इस मॉडल PION की pathophysiologic पाठ्यक्रम का अध्ययन करने के लिए एक उपन्यास मंच प्रदान करता है, और आगे ऑप्टिक न्यूरोपैथी के साथ ही अन्य सीएनएस इस्कीमिक रोगों के लिए चिकित्सकीय दृष्टिकोण के परीक्षण के लिए अनुकूलित किया जा सकता।
Introduction
50 साल से अधिक पुराने रोगियों में, इस्कीमिक ऑप्टिक न्यूरोपैथी (आयन) तीव्र ऑप्टिक न्यूरोपैथी 2 का सबसे प्रचलित प्रकार है। पूर्वकाल (Aion) या पीछे (PION) 3: हालत विशिष्ट प्रभावित रक्त की आपूर्ति और नैदानिक प्रस्तुति के स्रोत के अनुसार के रूप में एक से दो उपप्रकारों पेश कर सकते हैं। AION के रोगजनन और बेशक बड़े पैमाने पर 4-7 अध्ययन किया गया है, वहीं PION खराब होने के कारण इसकी कम प्रसार, चर प्रस्तुति, बीमार परिभाषित नैदानिक मानदंड और एक पशु मॉडल की कमी के कारण समझ में आ कर रह गया है। इसके अलावा, कोई उपचार प्रभावी ढंग से रोकने के लिए या AION या PION से दृष्टि हानि रिवर्स करने के लिए सिद्ध किया गया है। इसलिए, PION की एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और विश्वसनीय पशु मॉडल विवो में रोग की प्रक्रिया का अध्ययन करने और neuroprotection और अक्षतंतु उत्थान के लिए नई चिकित्सकीय परहेजों का परीक्षण करने के लिए महान मूल्य का है।
Photochemically vasog में जिसके परिणामस्वरूप microvasculature को इस्कीमिक चोट प्रेरितenic शोफ और थ्रोम्बोसिस प्रभावी रूप से क्षेत्रीय ऊतक ischemia 8-12 बनाता है। संवहनी संचलन में इंजेक्शन के बाद, सहज डाई erythrosin बी लक्ष्य जहाजों की लेजर विकिरण द्वारा सक्रियण पर प्रतिक्रियाशील स्वेटर आणविक ऑक्सीजन पैदा करता है। स्वेटर ऑक्सीजन सीधे प्लेटलेट पालन / एकत्रीकरण उत्तेजक और thrombus गठन पूर्णावरोधक के लिए अग्रणी, नाड़ी अन्तःचूचुक peroxidizes। इस्केमिक क्षति आसपास के इलाकों में फैल गया है और आगे की वजह से vasogenic शोफ को microvascular संपीड़न द्वारा exacerbated है। इस प्रोटोकॉल के समग्र लक्ष्य photochemically PION की वजह से नुकसान को प्रतिबिंबित करने के पश्चनेत्रगोलकीय ऑप्टिक तंत्रिका में ischemia प्रेरित करने के लिए है।
हमारे ज्ञान करने के लिए, यह पीछे ऑप्टिक तंत्रिका 1 में इस्कीमिक चोट का पहला मॉडल है। शारीरिक आघात से परहेज करते हुए इस मॉडल ischemia पैदा करता है, पीछे इस्कीमिक ऑप्टिक न्यूरोपैथी की शारीरिक प्रक्रियाओं बेहतर मजाक उड़ाया और अध्ययन कर रहे हैं। इसके अलावा, इस मॉडल ऑप्टिक न्यूरोपैथी और अन्य सीएनएस इस्कीमिक रोग के लिए उम्मीदवार चिकित्सा विज्ञान की स्क्रीनिंग के लिए एक उपन्यास मंच प्रदान करता है। इधर, एक चूहे PION मॉडल में ऊरु नस कैथीटेराइजेशन, ऑप्टिक तंत्रिका जोखिम, Erythrosin बी की नसों में इंजेक्शन और लेजर विकिरण के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल वर्णित हैं।
Protocol
Representative Results
Discussion
Here we describe in detail a method for inducing PION in a rat model. The most critical part of the protocol is the exposure and irradiation of the optic nerve – to expose the nerve as long as possible while avoiding damage caused by the sharp fine tip forceps or from stretching. In rats, the ophthalmic artery enters the optic nerve ≤1 mm from the optic nerve head. Therefore, irradiation of the optic nerve 3-4 mm away from the optic nerve head should only result in ischemia of the capillaries feeding the nerv…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम वीडियो संपादन के लिए पशु पालन के लिए Eleut हर्नांडेज़, माइक्रोस्कोपी विशेषज्ञता के लिए Gabe Gaidosh, और Khue ट्रॅन और Zhenyang झाओ के लिए आभारी हैं। राष्ट्रीय नेत्र संस्थान द्वारा वित्त पोषित किया गया यह अध्ययन उम को UCSD और EY014801 को जेएलजी और P30 अनुदान EY022589 को R01-EY022129 अनुदान; अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन, जेम्स और एस्थर राजा फाउंडेशन, Fudan विश्वविद्यालय के ग्रेजुएट स्कूल (संख्या 2,010,033) के डॉक्टरेट छात्र विनिमय कार्यक्रम निधि, और अनुसंधान से एक अप्रतिबंधित अनुदान दृष्टिहीनता, इंक को रोकने के लिए
Materials
| 532-nm Nd:YAG laser | Laser glow | LRS-532-KM-200-3 | |
| Beam chopper | custom-made | custom-made | |
| Mechanical shutter and corresponding shutter drive timer | AAM Vincent Associates | SD-10 | |
| 25-cm focal length spherical lens | CVI/Mellles-Griot | 01 LPX 293 | plano-convexBK7 glass lens with HEBBARTM antireflection coating |
| Erythrosin B | MP Biomedicals | 190449 | |
| Fluorogold | Fluorochrome,LLC | ||
| Gelfoam | Cardinal Health | CAH1203421 | |
| Polyethylene tubing (PE10) | BD Intramedic | 427400 | |
| No. 10 Blade | Miltex | 4-110 | |
| Fine Forceps | F.S.T. | 91150-20 | DUMONT #5 RUSTLESS NON-MAGNETIC |
| Forceps with Teeth | F.S.T. | 11153-10 | Germany stainless |
| Forceps | F.S.T. | 18025-10 | Germany stainless |
| Vannas spring scissors | F.S.T. | 2-220 | JJECK Stainless |
| Polyglactin suture | Ethicon | J488G | 7-0 suture |
| hemostat | F.S.T. | 12075-12 | Germany stainless |
References
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