Method Article

Un modèle murin d'irréversible et réversible unilatérale obstruction urétérale

DOI:

10.3791/52559

December 20th, 2014

In This Article

Summary

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Le modèle murin de l’obstruction urétérale unilatérale irréversible (UUO) est présenté en même temps que le modèle de l’UUO réversible dans lequel l’obstruction urétérale est soulagée par anastomose de l’uretère sectionné dans la vessie. Ces modèles permettent l’étude de l’inflammation et de la cicatrisation rénales ainsi que le remodelage tissulaire.

Abstract

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L’obstruction du rein peut affecter les reins natifs ou transplantés et entraîner des lésions rénales et des cicatrices. Nous présentons ici un modèle de néphropathie obstructive induite par une obstruction urétérale unilatérale (UUO), qui peut être soit irréversible (UUO), soit réversible (R-UUO). Dans le modèle UUO irréversible, l’uretère peut être obstrué pendant des périodes de temps variables afin d’induire une inflammation rénale de plus en plus sévère et une cicatrisation fibrotique interstitielle. Dans le modèle R-UUO réversible, l’uretère est obstrué pour induire une hydronéphrose, une dilatation tubulaire et une inflammation. Après une période de temps appropriée, l’obstruction urétérale est ensuite inversée chirurgicalement par anastomose de l’uretère sectionné précédemment obstrué de la vessie afin de permettre une décompression complète du rein et la restauration du flux urinaire vers la vessie. Le modèle UUO irréversible a été utilisé pour étudier divers aspects de l’inflammation et de la cicatrisation rénales, y compris la pathogenèse de la maladie et la mise à l’essai de thérapies anti-inflammatoires ou anti-fibrotiques potentielles. Le modèle le plus difficile de la R-UUO a été utilisé par certains chercheurs et offre un potentiel de recherche important car il permet d’étudier les processus inflammatoires et immunitaires et le remodelage tissulaire dans un rein blessé et cicatrisé après l’élimination du stimulus nuisible. Par conséquent, le modèle R-UUO offre aux chercheurs la possibilité d’explorer la résolution de l’inflammation rénale ainsi que des aspects clés de la réparation tissulaire. Ces modèles expérimentaux sont pertinents pour les maladies humaines, car les patients présentent souvent une obstruction des voies rénales qui nécessite une décompression et se retrouvent souvent avec une insuffisance rénale résiduelle importante qui n’a pas d’options de traitement actuelles et peut conduire à une insuffisance rénale terminale.

Introduction

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L’objectif global du modèle expérimental décrit ici est d’induire une néphropathie obstructive par obstruction urétérale unilatérale (UUO), qui peut être soit irréversible (UUO), soit réversible (R-UUO). Un modèle simple et irréversible d’UUO est présenté dans lequel l’uretère gauche est obstrué de façon permanente par une ligature avec une suture ou par l’application d’un clip de ligature. Il en résulte une dilatation marquée de l’uretère associée à une réduction du débit sanguin rénal et de la filtration glomérulaire. L’histologie rénale met en évidence une dilatation tubulaire et une inflammation rénale interstitielle et une fibrose de plus en plus sévères. L’UUO ....

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Protocol

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Directives générales: expériences sur les animaux ont été effectuées en conformité avec les directives et règlements imposés par les animaux (Scientific Procedures) de Loi 1986. Ce protocole et le protocole de vidéo qui l'accompagne sont à la fois un UUO standard et un R-UUO, qui peut être effectuée sur plusieurs souches de souris. Dans la vidéo d'accompagnement, les deux procédures sont effectuées sur des souris C57BL / 6 mâles âgées de 8 semaines les souris. Les données présentées dans la section des résultats représentatifs ont été obtenus auprès de sexe masculin souris FVB / n.

NOTE: Ce protocole et accompagner détails de la v....

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Results

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L'apparition des modifications rénales nettement suivante obstruction urétérale et il devient plus pâle et tendu à la palpation avec le temps (Figure 1). Il est de plus en plus la dilatation de l'urètre proximal à l'obstruction et le bassinet du rein. Le rein devient de plus en plus atrophique que la durée de néphropathie obstructive augmente avec obstruction prolongée entraîne un amincissement notable de la moelle et le cortex rénal. Après le renversement de l'obstruction de l'uretère, la couleur du re.......

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Discussion

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L’obstruction du rein peut affecter les reins natifs ou transplantés et entraîner des lésions rénales et des cicatrices. Le modèle R-UUO est pertinent pour les maladies humaines, car les patients présentent souvent une obstruction des voies rénales secondaire à une hypertrophie de la prostate, des valves urétrales postérieures, etc., qui nécessite une décompression, les patients présentant généralement une insuffisance rénale résiduelle importante qui n’a pas d’options de traitement actuelles et peut éventuellement condu.......

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Disclosures

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Les auteurs ne ont pas des intérêts concurrents ou de divulguer contradictoires.

Acknowledgements

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La présente étude a été financée par des subventions de Kidney Research UK (ST4/2011), du Cunningham Trust (CT11/14), du Mrs AE Hogg Charitable Trust for Kidney Research et du Renal Endowment Fund de la Royal Infirmary of Edinburgh.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Ciseaux de dissection émoussésOutils de science fine14072-10
Ciseaux à ressort &ndash ; droitsOutils de science fine15000-10
Pince dentéeOutils de science fine11021-12
Pince coudée x 2Outils de science fine00649-11
Pince droiteOutils de science fine00632-11
Colibri Écarteur de fil de 3 cmFine Science Tools17000-03
Porte-aiguille Castroviejo avec serrureFine Science Tools12565-14
Applicateur de pince à enroulementFine Science Tools12031-07
Pinces de bobine de 7 mmFine Science Tools12032-07
Porte-micro-aiguille Castroviejo avec serrureFine Science Tools12060-01
OPMI pico microscopeCarl ZeissS100
Heat électro padCozee Comfortn/a
6/O suture tressée en soieHarvard Apparatus72-3287
9/O Dafilon (polyamide) sutureB-BraunG1111434
5/O suture en soie tresséeHarvard Apparatus51-7680
Aiguille biseautée régulière, 1 pouce, 21GBecton, Dickinson and Company305175
1 ml d’embout de seringueBecton, Dickinson and Company300184
Wypall Tampons en papierKimberley-ClarkL40Stérilisé (Autoclave)
Cotons-tigesJohnson and Johnsonn/aStérilisé (Autoclave)
Champs unisGuardianCB03Tube
caoutchoucTube en silicone - diamètre intérieur 1,0 mm ; diamètre extérieur 2,0 mm ; épaisseur de paroi 0,6 mm
(Lacri-Lube) Paraffine douce blanche 57,3 %, huile minérale 42,5 % et alcools de lanoline 0,2 %Allergan Ltd21956GB10X
(Videne) Povidone iode 10 %Ecolab LtdPL 04509/0041
(Vetalar V) Chlorhydrate de kétaminePfizer Animal HealthVm 42058/4165100mg/ml solution
(Domitor) Chlorhydrate de médétomidineOrion PharmaVm 06043/40031mg/ml
(Vetergesic) Chlorhydrate de bupernorphineAlsto Animal HealthVm 00063/40020,3mg/ml
(Antisedan) Hydrochoride d’atipamézoleOrion PharmaVm 06043/40045mg/ml
(Adept) 4 % IcodextrinSolution de réduction de l’adhérenceBaxter
NaCl 0,9 %BaxterFKE1323
en de silicone à paroi souple

References

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  1. Chevalier, R. L., Forbes, M. S., Thornhill, B. A. Ureteral obstruction as a model of renal interstitial fibrosis and obstructive nephropathy. Kidney Int. 75, 1145-1152 (2009).
  2. Kipari, T., et al.

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