JoVE Journal > Medicine
Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Résultats
Discussion
Divulgations
Acknowledgements
Materials
References
Traduction automatique
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.
Médecine

Kvantifiering av neurovaskulär skydd Efter Repetitiva Hypoxisk Förkonditionering och Transient Middle Cerebral artärocklusion hos möss

Published: May 04, 2015
doi:
10.3791/52675
, , , , , ,
1Department of Neurology and Neurotherapeutics,University of Texas Southwestern Medical Center, 2Department of Neurological Surgery,Washington University School of Medicine

Summary

This protocol describes repetitive hypoxic preconditioning, or brief exposures to systemic hypoxia that reduce infarct volumes and blood-brain barrier disruption following transient middle cerebral artery occlusion in mice. It also details dual quantification of infarct volume and blood-brain barrier disruption after stroke to assess the efficacy of neurovascular protection.

Abstract

Experimentella djurmodeller för stroke är ovärderliga verktyg för att förstå stroke patologi samt utveckla effektivare behandlingsstrategier. En 2 vecka protokoll för repetitiva hypoxisk prekonditionering (RHP) inducerar långtidsskydd mot centrala nervsystemet (CNS) skada i en musmodell av fokal ischemisk stroke. RHP består av nio stokastiska exponeringar mot hypoxi som varierar i både varaktighet (2 eller 4 timmar) och intensitet (8% och 11% O2). RHP minskar infarktvolymer, blod-hjärnbarriären (BBB) ​​störningar, och den post-stroke inflammatoriskt svar i veckor efter den sista exponeringen för hypoxi, vilket tyder på en långsiktig induktion av en endogen CNS-skyddande fenotyp. Metoden för den dubbla kvantifiering av infarktvolymen och BBB störningar är effektiv vid bedömningen neurovaskulära skydd hos möss med RHP eller andra förmodade neuroprotectants. Vuxna manliga Schweiziska Webster möss förbehandlas med RHP eller löptid motsvarande exponeringar mot 21% O <sub> 2 (dvs rumsluft). En 60 min gående mellersta cerebral artärocklusion (tMCAo) inducerades 2 veckor efter den sista hypoxisk exponering. Både ocklusion och reperfusion bekräftades av transkraniell laser Doppler flowmetry. Tjugotvå h efter reperfusion, Evans Blue (EB) administrerades intravenöst genom en svansveninjektion. 2 h senare avlivades djuren genom isofluran överdos och hjärnsektioner färgades med 2,3,5- trifenyltetrazoliumklorid (TTC). Infarkter volymer sedan kvantifieras. Därefter EB extraherats från vävnaden över 48 timmar för att bestämma BBB störningar efter tMCAo. Sammanfattningsvis är RHP ett enkelt protokoll som kan replikeras, med minimal kostnad, att inducera långsiktig endogen neurovaskulära skydd mot stroke skador hos möss med translationell potential för andra CNS-baserade och system pro-inflammatoriska sjukdomstillstånd.

Introduction

Som den ledande orsaken till vuxen funktionshinder och den fjärde vanligaste dödsorsaken är stroke en av de mest försvagande sjukdomstillstånd inför den vuxna befolkningen i USA. 1 Djurmodeller av stroke möjliggör experimentella undersökningar av nya metoder för att minska ischemisk skada och förbättra efter stroke återhämtning. En ny väg för en sådan translationell forskning prekonditionering. Förbehandling är avsiktlig användning av ett icke-skadliga stimulans för att minska skadorna från en efterföljande, och allvarligare, skada. 2 hypoxisk prekonditionering har visat sig ge pleiotropiska förändringar i hjärnan som ger skydd mot stroke både in vivo och in vitro-studier . 3 emellertid en enda exponering för hypoxi erbjuder endast kortsiktiga neuroprotektion, förmå mindre än 72 timmar av tolerans mot ischemi hos vuxna möss. 4 Även efter fyra veckor av 14 tim daglig exponering till hypobaric hypoxi, Lin et al. found att neuroprotektion endast upprätthållas under en vecka. 5 Upprepad hypoxisk prekonditionering (RHP) kännetecknas av stokastiska variationer i frekvens, varaktighet och intensitet hypoxiska exponeringar. I motsats till en enda förkonditionering utmaning, RHP inducerar en cerebroprotektiva fenotyp som varar upp till åtta veckor i möss. 6 RHP minskad infarktvolymer, blod-hjärnbarriären (BBB) ​​störningar, inflammation i blodkärlen, och leukocyter diapedes för veckor efter den sista hypoxisk exponering . RHP särskilt minskad inflammation i den ischemiska hjärnan genom att minska T-cell, monocyt- och macrophage populationer, medan B-cellspopulationer bibehålla den ischemiska hemisfären. 7 I själva verket, RHP inducerade en immunsuppressiv fenotyp i möss innan någon CNS-skada, inklusive stroke. RHP-behandlade B-celler isolerade från RHP-behandlade friska möss uppvisade en unik anti-inflammatorisk fenotyp, med en nedreglering av både antigenpresentation och antikroppsproduktion. Dentotal minskning av proinflammatoriska adaptiva immunmekanismer gör RHP en utmärkt metod för att inducera endogen immunosuppression för att inte bara CNS-specifika inflammatoriska sjukdomar, men även system skada eller sjukdom modeller som inkluderar en pro-inflammatorisk patologi.

RHP minskar både infarktvolymen och BBB störningar till följd av en övergående mellersta cerebral artärocklusion (tMCAo). Djurmodeller av stroke, såsom vanligen används tMCAo, dramatiskt förbättra förståelsen av patofysiologi av stroke, liksom utformningen av mer effektiva NeuroTherapeutics. Första utvecklats av Koizumi et al., 1986, är en allmänt använd metod för att inducera stroke hos gnagare och en av de vanligaste metoderna för att undersöka inflammation efter reperfusion 8 tMCAo förfarandet. Metoderna för tMCAo utvecklas, den nyare användning av silikonbelagda filamenten ytterligare minska risken för subarachnoid blödning jämfört med andra modeller 9,10 </ Sup> och förbättra tillförlitligheten, men tyvärr tMCAo ger ofta en stor variation i infarktvolymer. 11-13 De flesta av dessa studier avgränsa infarkt regioner i koronala hjärnan sektioner genom färgning med 2,3,5- trifenyltetrazoliumklorid (TTC), anses vara en guldmyntfoten för infarkt kvantifiering, eftersom det är ett enkelt och billigt sätt att producera levande, repliker resultat. TTC tjänar som ett substrat av dehydrogenaser som finns i mitokondrier. När hjärnsnitt exponeras för TTC lösningen, TTC selektivt tas in i levande celler, där dess icke-lösliga reduktionsprodukt, formazan, utfälls till en djup röd färg i livskraftiga mitokondrier. På grund av mitokondriell dysfunktion i ischemisk vävnad, denna vävnad förblir vitt, vilket möjliggör differentiering av skadad och frisk vävnad. 14

RHP minskar också BBB störningar i den ischemiska hemisfären. 6 Därför dubbla kvantifiering av BBB integritet inom samma bregn som TTC-baserade infarktvolymen bestämningar 15 skulle ge värdefull information om den fullständiga effekten av endogen skydd, och potentiella orsakssamband mellan BBB störningar och infarkt i obehandlade och behandlade djur. Inflödet av perifert blod genom en störd BBB, sekundärt till stroke ökar leukocytpopulationer, pro-inflammatoriska cytokiner, oxidativ stress, vasogent ödem och hemorragisk omvandling i den ischemiska hemisfären, i slutändan öka antalet infektioner och dödlighet hos patienter med ischemisk stroke . 16,17 En vanlig metod för mätning av BBB-störningar i djurmodeller är genom kvantifiering av Evans-blått (EB) färgämne läcka in i hjärnan. 15,18-21 EB binds selektivt till serumalbumin, ett globulärt protein (MV = 65 kDa) som inte korsar BBB i oskadade djur. 22 Efter ischemisk stroke, infiltrerar EB hjärnan, och fluorescerar vid 620 nm, vilket möjliggör mätning av optisk densitet within perfusion skadade parenkym. 22 Den optiska densiteten är direkt proportionell mot permeabiliteten hos BBB när EB har tvättats ut ur den efter slakt kortikala vaskulaturen genom transkardial perfusion. Med omedelbar behandling av TTC-färgade hjärnor hos djur med EB administration, kan både infarktvolymen och BBB störningar effektivt kvantifieras. Det bör emellertid noteras, att neuronal skada och BBB störningar inte är samtidiga processer i efter stroke hjärnan, 23,24 så valet av tidpunkten för avlivandet är en viktig faktor.

Protokollet som följer detaljer RHP metoden, tMCAo metod för att inducera en tillfällig artärocklusion som modeller mitten cerebral artär ocklusion hos människor, och de dubbla histologiska metoder för att bestämma neurala och vaskulära stroke skada endpoints. TTC mäter celldöd och kumulativ vävnadsskada, vilket möjliggör kvantifiering av en övergripande infarkt volume, medan EB föreskrivs hemisfäriska kvantifiering av BBB skador.

Protocol

OBS: Detta protokoll godkändes av Institutional Animal Care och användning kommittén (IACUC) vid UT Southwestern Medical Center som står fast vid National Institutes for Health (NIH) policy för försöksdjursanvändningen. 1. Repetitiva Hypoxisk Förkonditionering Custom design fyra flödesmätare på gasregulatorer och bifoga standard 15 L induktionskammare med PVC-rör för att tillåta komprimerad gas från syre (O 2) tankar att flyta in i kamrarna via en inlopp…

Representative Results

Denna studie ingick 25 manliga Schweiziska Webster-möss som var 10 veckor gamla vid början av randomisering till RHP (n = 10) eller 21% O 2 (n = 15) grupper. Två veckor efter den sista RHP exponering, har kirurgiska ingrepp utförs med grupper förblindade och motvikts mellan dagar. Efter tMCAo, dog 1 mus under postoperativ återhämtning och 1 mus uteslöts från studien eftersom det inte uppfyller reperfusion CBF kriteriet. Båda uteslutna möss från O2-gruppen 21%. I enlighet med ARRIVE rikt…

Discussion

En enda exponering för system hypoxi (dvs 2 timmar av 11% O 2) i möss "övergående" skyddar hjärnan från tMCAo, 29 vilket innebär att epigenetiska svar på hypoxisk prekonditionering utmaningen är kortvariga och baslinjen fenotypen återställs inom dagar. Upprepade presentationer av hypoxisk prekonditionering stimulans sträcker sig dramatiskt den tid som neuroprotektiva fenotypen. 6 Många studier har visat att frekvensen, omfattningen och varaktigheten av den…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Special thanks to the Gidday lab for their work in developing the RHP protocol, as well as the Neuro-Models Facility (UTSW) for their assistance in the tMCAo surgeries. This work was supported by grants from the American Heart Association (AMS), The Haggerty Center for Brain Injury and Repair (UTSW; AMS), and The Spastic Paralysis Research Foundation of the Illinois-Eastern Iowa District of Kiwanis International (JMG).

Materials

Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
Flowmeters, regulators VetEquip, Inc Specialty order Four flowmeters are attached to 6.0 mm flexible PVC tubing which connects to the inlet port on each induction chamber with a plastic female connector. These flowmeters are bolted to a 6.5" x 1" x 1" metal bar. This metal bar is bolted to a MI-246-P pressure gauge with a DISS outlet. This pressure gauge and flowmeter equipment can be attached to each new gas cylinder with a wrench.
21% O2 tank AirGas OX USP200
11% O2 tank AirGas Specialty order
8% O2 tank  AirGas Specialty order
15L induction chambers VetEquip 941454
Moor Laber Dopper Flow  Moor Instruments  moorVMS-LDF1-HP 0.8mm diameter probe 
High Intensity Illuminator  Nikon NI-150
Zoom Stereo Microscope  NIkon SMZ800 Other surgical microscopes may be used. 
Kent Scientific Right Temperature CODA Kent Scientific Corporation Discontinued Recommended replacement is PhysioSuite with RightTemp Temperature Monitoring and Homeothermic Control (Kent Scientific, #PS-RT).
Hovabator Incubator Stromberg's 2362-E Our model is the 2362N. 2362E is a later model and includes an electronic thermostat. 
V010 Anesthesia system  VetEquip 901807 Includes: ten foot high-pressure oxygen hose, frame, flowmeter, oxygen flush assembly, vaporizer, breathing circuit, chamber, nosecones, waste gas evacuation tubing and two VapoGuard filters
250 mL isoflurane  Butler Schein NDC-11695
D-6 Vet Trim Animal Cordless Trimmer  Andis  #23905 Replacement blades are available from Andis (#23995)
Betadine  Fisher Scientific 19-898-867 
Q-tips Multiple sellers  Catalog number not available 
Gauze Pads Fisher Scientific 67622
Surgical drape Fisher Scientific GM300 
Silk Sutures  Look/Div Surgical Specialties SP115
Nylon Sutures Look/Div Surgical Specialties SP185
Durmont #5 forceps (2)  Fine Science Tools  11251-35 Angled 45°
Surgical Scissors Fine Science Tools  14028-10
3mm Vannas Kent Scientific Corporation INS600177 Straight blade
Hartman Hemostats  Fine Scientific Tools 13002-10
Occluding filaments Washington University Specialty order Filaments are silicone coated at Washington Univeristy and provided to UTSW facilities for a fee. 
Evans Blue Sigma Aldritch E2129-10G
Filter Paper  Sigma Aldritch WHA1001150 150 mm, circles, Grade 1 
Weigh Boats Fisher Scientific 02-202-101 2.5" diameter
0.9% Sodium Chloride Injection USP  Baxter Pharmaceutics  2B1321
0.3cc insulin syringe with 29 g needle Becton Dickinson Labware 309301
Flat bottom restrainer  Braintree Scientific  FB M 2.0" diameter
TTC Sigma T8877
10X PBS, pH 7.4 Fisher Scientific BP399-20
Water Bath Multiple sellers  Catalog number not available  Scintillation tubes with TTC may be manually held under running warm water as an alternative to the water bath.
Styrofoam board Multiple sellers  Catalog number not available 
Large Syringe Kit PumpSystems Inc P-SYRKIT-LG
Perfusion Pump PumpSystems Inc NE-300 
60 cc syringe Fisher Scientific NC9203256
27g winged infusion set Kawasumi Laboratories, Inc D3K1-25G 1
20 ml scintillation vial Fisher Scientific 50-367-126
Stainless steel spatula Fisher Scientific 14-373-25A
Alto acrylic 1.0 mm mouse brain, coronal CellPoint Scientific  Catalog number not available 
0.21 mm stainless steel blades, 25 pk CellPoint Scientific  Catalog number not available  Reusable cryostat blades are an inexpensive alternative.
4% paraformaldehyde Santa Cruz Biotechnology  SC-281692
Superfrost microscope slides  Fisher Scientific 12-550-15
HP Scanjet G4050 Multiple sellers  Catalog number not available  Other commercial scanners are suitable for this step in the protocol.
ImageJ  National Institute of Health Catalog number not available 
Analytical Balance Mettler Toledo  XSE 205U
Precision Compact Oven   Thermo Scientific  PR305225M
1.7 mL microcentrifuge tubes (Eppendorfs) Denville Scientific  C2170
Formamide Fisher Scientific BP228-100
96-well plates Fisher Scientific 07-200-9
Epoch Microplate Spectrophotometer  BioTek  Catalog number not available 
DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Go, A. S., et al. Heart disease and stroke statistics–2014 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 129 (3), e28-e292 (2014).
  2. Gidday, J. M. Cerebral preconditioning and ischaemic tolerance. Nat Rev Neurosci. 7 (6), 437-448 (2006).
  3. Stetler, R. A., et al. Preconditioning provides neuroprotection in models of CNS disease: paradigms and clinical significance. Prog Neurobiol. 114, 58-83 (2014).
  4. Bernaudin, M., et al. Normobaric hypoxia induces tolerance to focal permanent cerebral ischemia in association with an increased expression of hypoxia-inducible factor-1 and its target genes, erythropoietin and VEGF, in the adult mouse brain. J Cereb Blood Flow Metab. 22 (4), 393-403 (2002).
  5. Lin, A. M., Dung, S. W., Chen, C. F., Chen, W. H., Ho, L. T. Hypoxic preconditioning prevents cortical infarction by transient focal ischemia-reperfusion. Ann N Y Acad Sci. 993, 168-178 (2003).
  6. Stowe, A. M., Altay, T., Freie, A. B., Gidday, J. M. Repetitive hypoxia extends endogenous neurovascular protection for stroke. Ann Neurol. 69 (6), 975-985 (2011).
  7. Monson, N. L., et al. Repetitive hypoxic preconditioning induces an immunosuppressed B cell phenotype during endogenous protection from stroke. J Neuroinflammation. 11, 22 (2014).
  8. Koizumi, J. Y. Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. Experimental studies of ischemic brain edema, I: a new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area. Jpn J Stroke. 8, 1-8 (1986).
  9. Liu, F., McCullough, L. D. The middle cerebral artery occlusion model of transient focal cerebral ischemia. Methods Mol Biol. 1135, 81-93 (2014).
  10. Rousselet, E., Kriz, J., Seidah, N. G. Mouse model of intraluminal MCAO: cerebral infarct evaluation by cresyl violet staining. J Vis Exp. (69), (2012).
  11. Lin, X., et al. Surgery-related thrombosis critically affects the brain infarct volume in mice following transient middle cerebral artery occlusion. PLoS One. 8 (9), e75561 (2013).
  12. Yuan, F., et al. Optimizing suture middle cerebral artery occlusion model in C57BL/6 mice circumvents posterior communicating artery dysplasia. J Neurotrauma. 29 (7), 1499-1505 (2012).
  13. Kuraoka, M., et al. Direct experimental occlusion of the distal middle cerebral artery induces high reproducibility of brain ischemia in mice. Exp Anim. 58 (1), 19-29 (2009).
  14. Feng Zhang, J. C., Chen, X. X. J., Xu, Z. C., JZ, W. a. n. g. Animal Models of Acute Neurolgoical Injuries II. Springer Protocol Handbooks. , 93-98 (2012).
  15. Ludewig, P., et al. Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1 inhibits MMP-9-mediated blood-brain-barrier breakdown in a mouse model for ischemic stroke. Circ Res. 113 (8), 1013-1022 (2013).
  16. Sandoval, K. E., Witt, K. A. Blood-brain barrier tight junction permeability and ischemic stroke. Neurobiol Dis. 32 (2), 200-219 (2008).
  17. Ballabh, P., Braun, A., Nedergaard, M. The blood-brain barrier: an overview: structure, regulation, and clinical implications. Neurobiol Dis. 16 (1), 1-13 (2004).
  18. Benedek, A., et al. Use of TTC staining for the evaluation of tissue injury in the early phases of reperfusion after focal cerebral ischemia in rats. Brain Res. 1116 (1), 159-165 (2006).
  19. Yasmina Martin, C. A., Maria Jose Piedras, A. K. Evaluation of Evans Blue extravasation as a measure of peripheral inflammation. Protocol Exchange. , (2010).
  20. Belayev, L., Busto, R., Zhao, W., Ginsberg, M. D. Quantitative evaluation of blood-brain barrier permeability following middle cerebral artery occlusion in rats. Brain Res. 739 (1-2), 88-96 (1996).
  21. Martin, J. A., Maris, A. S., Ehtesham, M., Singer, R. J. Rat model of blood-brain barrier disruption to allow targeted neurovascular therapeutics. J Vis Exp. (69), e50019 (2012).
  22. Kaya, M., Ahishali, B. Assessment of permeability in barrier type of endothelium in brain using tracers: Evans blue, sodium fluorescein, and horseradish peroxidase. Methods Mol Biol. 763, 369-382 (2011).
  23. Chen, Z. L., et al. Neuronal death and blood-brain barrier breakdown after excitotoxic injury are independent processes. J Neurosci. 19 (22), 9813-9820 (1999).
  24. Abulrob, A., Brunette, E., Slinn, J., Baumann, E., Stanimirovic, D. In vivo optical imaging of ischemic blood-brain barrier disruption. Methods Mol Biol. 763, 423-439 (2011).
  25. Majid, A., et al. Differences in vulnerability to permanent focal cerebral ischemia among 3 common mouse strains. Stroke. 31 (11), 2707-2714 (2000).
  26. Xu, L., et al. Low dose intravenous minocycline is neuroprotective after middle cerebral artery occlusion-reperfusion in rats. BMC Neurol. 4, 7 (2004).
  27. Goldlust, E. J., Paczynski, R. P., He, Y. Y., Hsu, C. Y., Goldberg, M. P. Automated measurement of infarct size with scanned images of triphenyltetrazolium chloride-stained rat brains. Stroke. 27 (9), 1657-1662 (1996).
  28. Drummond, G. B., Paterson, D. J., McGrath, J. C. ARRIVE: new guidelines for reporting animal research. J Physiol. 588 (Pt 14), 2517 (2010).
  29. Miller, B. A., et al. Cerebral protection by hypoxic preconditioning in a murine model of focal ischemia-reperfusion). Neuroreport. 12 (8), 1663-1669 (2001).
  30. Zhu, Y., Zhang, Y., Ojwang, B. A., Brantley, M. A., Gidday, J. M. Long-term tolerance to retinal ischemia by repetitive hypoxic preconditioning role of HIF-1alpha and heme oxygenase-1. Invest Ophthalmol Vis Sci. 48 (4), 1735-1743 (2007).
  31. Cui, M., et al. Decreased extracellular adenosine levels lead to loss of hypoxia-induced neuroprotection after repeated episodes of exposure to hypoxia. PLoS One. 8 (2), e57065 (2013).
  32. Prass, K., et al. Hypoxia-induced stroke tolerance in the mouse is mediated by erythropoietin. Stroke. 34 (8), 1981-1986 (2003).
  33. Svorc, P., Benacka, R. The effect of hypoxic myocardial preconditioning is highly dependent on the light-dark cycle in Wistar rats. Exp Clin Cardiol. 13 (4), 204-208 (2008).
  34. Chen, S. T., Hsu, C. Y., Hogan, E. L., Maricq, H., Balentine, J. D. A model of focal ischemic stroke in the rat: reproducible extensive cortical infarction. Stroke. 17 (4), 738-743 (1986).
  35. Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy. J Cereb Blood Flow Metab. 13 (4), 683-692 (1993).
  36. Carmichael, S. T. Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose. NeuroRx. 2 (3), 396-409 (2005).
  37. Lesak, M. D., Howieson, D. B., Loring, D. W. . Neuropsychological Assessement. , 195-197 (2004).
  38. Kapinya, K. J., Prass, K., Dirnagl, U. Isoflurane induced prolonged protection against cerebral ischemia in mice: a redox sensitive mechanism. Neuroreport. 13 (11), 1431-1435 (2002).
  39. Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. Modeling stroke in mice – middle cerebral artery occlusion with the filament model. J Vis Exp. (47), (2011).
  40. Liu, F., Schafer, D. P., McCullough, L. D. T. T. C. fluoro-Jade B and NeuN staining confirm evolving phases of infarction induced by middle cerebral artery occlusion. J Neurosci Methods. 179 (1), 1-8 (2009).
  41. Wang, Z., Leng, Y., Tsai, L. K., Leeds, P., Chuang, D. M. Valproic acid attenuates blood-brain barrier disruption in a rat model of transient focal cerebral ischemia: the roles of HDAC and MMP-9 inhibition. J Cereb Blood Flow Metab. 31 (1), 52-57 (2011).
  42. Rosenberg, G. A., Estrada, E. Y., Dencoff, J. E. Matrix metalloproteinases and TIMPs are associated with blood-brain barrier opening after reperfusion in rat brain. Stroke. 29 (10), 2189-2195 (1998).
  43. Goryacheva, A. V., et al. Adaptation to intermittent hypoxia restricts nitric oxide overproduction and prevents beta-amyloid toxicity in rat brain. Nitric Oxide. 23 (4), 289-299 (2010).
  44. Lin, A. M., Chen, C. F., Ho, L. T. Neuroprotective effect of intermittent hypoxia on iron-induced oxidative injury in rat brain. Exp Neurol. 176 (2), 328-335 (2002).
  45. Paul, J., Strickland, S., Melchor, J. P. Fibrin deposition accelerates neurovascular damage and neuroinflammation in mouse models of Alzheimer’s disease. J Exp Med. 204 (8), 1999-2008 (2007).
  46. Deumens, R., Blokland, A., Prickaerts, J. Modeling Parkinson’s disease in rats: an evaluation of 6-OHDA lesions of the nigrostriatal pathway. Exp Neurol. 175 (2), 303-317 (2002).
  47. Lee, H., Pienaar, I. S. Disruption of the blood-brain barrier in Parkinson’s disease: curse or route to a cure. Front Biosci (Landmark Ed. 19, 272-280 (2014).
  48. Jenkins, B. G., et al. Non-invasive neurochemical analysis of focal excitotoxic lesions in models of neurodegenerative illness using spectroscopic imaging). J Cereb Blood Flow Metab. 16 (3), 450-461 (1996).
  49. Chen, X., Lan, X., Roche, I., Liu, R., Geiger, J. D. Caffeine protects against MPTP-induced blood-brain barrier dysfunction in mouse striatum. J Neurochem. 107 (4), 1147-1157 (2008).

Tags

Neurovascular ProtectionRepetitive Hypoxic PreconditioningTransient Middle Cerebral Artery OcclusionInfarct VolumeBlood-brain Barrier DisruptionIschemic StrokeMouse ModelCentral Nervous SystemNeuroprotectionPro-inflammatory Disease

Play Video
PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
Citer Cet Article
Poinsatte, K., Selvaraj, U. M., Ortega, S. B., Plautz, E. J., Kong, X., Gidday, J. M., Stowe, A. M. Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice. J. Vis. Exp. (99), e52675, doi:10.3791/52675 (2015).
Télécharger la Citation
Réimpressions et Autorisations

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image