Summary

में बंद सिर पर घाव मस्तिष्क चोट दण्ड के लिए एक विधि<em> ड्रोसोफिला</em

Published: June 30, 2015
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Summary

यहाँ हम ड्रोसोफिला में बंद सिर पर घाव मस्तिष्क चोट (TBI) दण्ड की विधि का वर्णन है। इस विधि मक्खियों के लिए उपलब्ध प्रायोगिक उपकरणों और तकनीकों के विशाल सरणी का उपयोग कर TBI विकृतियों आबाद कि सेलुलर और आणविक तंत्र की जांच करने के लिए एक प्रवेश द्वार प्रदान करता है।

Abstract

घाव मस्तिष्क चोट (TBI) शारीरिक, संज्ञानात्मक, और व्यवहार कार्यों और मौत की हानि के कारण प्रत्येक वर्ष के लाखों लोगों को प्रभावित करता है। ड्रोसोफिला उपयोग अध्ययन मस्तिष्क संबंधी प्रक्रियाओं को समझने में महत्वपूर्ण सफलताओं योगदान दिया है। इस प्रकार, मानव में TBI विकृतियों के सेलुलर और आणविक आधार को समझने के लक्ष्य के साथ, हम मक्खियों में बंद सिर TBI के दण्ड उच्च प्रभाव आघात (प्रभावित) डिवाइस विकसित की है। मक्खियों इस तरह के अस्थायी अशक्त और प्रगतिशील neurodegeneration के रूप में मानव TBI के साथ लगातार प्रभावित डिवाइस प्रदर्शन phenotypes के अधीन है। प्रभावित डिवाइस मक्खी मस्तिष्क को यांत्रिक क्षति के कारण, एक शीशी की दीवार के खिलाफ मक्खियों प्रेरित करने के लिए एक स्प्रिंग-आधारित तंत्र का उपयोग करता है। डिवाइस अपने ऑपरेशन सरल और तेजी से है, के निर्माण के लिए सस्ती और आसान हो गया है, और यह प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणामों का उत्पादन। नतीजतन, प्रभावित डिवाइस मौजूदा प्रयोगात्मक उपकरण और मक्खियों मौलिक को संबोधित करने के लिए तकनीक के साथ जोड़ा जा सकता हैTBI के लिए निदान और उपचार के विकास के लिए नेतृत्व कर सकते हैं कि TBI के बारे में सवालों के जवाब। विशेष रूप से, प्रभावित डिवाइस TBI विकृतियों के आनुवंशिक आधार को समझने के लिए बड़े पैमाने पर आनुवंशिक स्क्रीन प्रदर्शन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।

Introduction

घाव मस्तिष्क चोट (TBI) एक बाहरी यांत्रिक बल से मस्तिष्क को चोट के रूप में परिभाषित किया गया है। सबसे अधिक, इस तरह कुंद बलों और जड़त्वीय त्वरण और मस्तिष्क खोपड़ी के अंदर हड़ताल करने का कारण है कि मंदी बलों के रूप में बंद सिर ताकतों से TBI का परिणाम है। संयुक्त राज्य अमेरिका में, यह 50,000 व्यक्तियों TBI से हर साल मरते हैं और 2.5-6,500,000 व्यक्तियों, TBI के परिणामों के साथ रह शारीरिक, संज्ञानात्मक दुर्बल सहित, और 1,2 व्यवहार की समस्याओं कर रहे हैं कि अनुमान है। TBI के परिणामों के कारण मस्तिष्क के लिए प्राथमिक यांत्रिक चोटों के लिए लेकिन यह भी समय 3-5 से अधिक होती है कि मस्तिष्क के लिए माध्यमिक सेलुलर और आणविक चोटों के साथ-साथ अन्य ऊतकों के लिए ही नहीं हैं। निदान और TBI के इलाज के लिए दृष्टिकोण के विकास TBI के एक जटिल रोग की प्रक्रिया है क्योंकि मुश्किल साबित हो गया है। प्राथमिक चोटों, मानव शरीर क्रिया विज्ञान, और पर्यावरणीय कारकों के चर प्रकृति विषम माध्यमिक मैं में यह परिणामnjuries और विकृतियों। अंतर्निहित चर कारकों व्यक्ति की प्राथमिक चोट की गंभीरता, दोहराए प्राथमिक चोटों के बीच का समय है, और उम्र और जीनोटाइप शामिल हैं। प्रत्येक चर कारक TBI के परिणामों के लिए योगदान देता समझौता कैसे निदान करने और TBI के 6,7 के इलाज के लिए दृष्टिकोण के विकास में सहायता करने के लिए की संभावना है।

यहाँ हम TBI के परिणाम के लिए परिवर्तनीय कारकों का योगदान चित्रित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर (फल मक्खियों) में बंद सिर TBI पहुंचाने के लिए एक विधि का वर्णन। विधि तीव्रता से एक हाथ की हथेली के खिलाफ एक मक्खी संस्कृति शीशी की तरफ से टकराने के जंगली प्रकार के कारण होता है कि एक प्रारंभिक अवलोकन के आधार पर किया जाता है, अस्थायी रूप से TBI के एक होने की संभावना परिणाम अक्षम हो के लिए मक्खियों। इस प्रकार, हम हाथ से मार कार्रवाई से त्वरण और मंदी बलों पुनरावृत्ति करने के लिए उच्च प्रभाव आघात (प्रभावित) डिवाइस का निर्माण किया। एक उच्च गति फिल्म से पता चलता है कि उस से एक भी हड़तालडिवाइस का कारण बनता प्रभावित उनके सिर और शरीर के साथ 8 शीशी दीवार कई बार संपर्क करने के लिए मक्खियों। कुछ हद तक, सभी संपर्कों रिकोषेट और गिर जाता है और कार दुर्घटनाओं 9 में मनुष्य के लिए होता है क्या करने के लिए इसी तरह के सिर कैप्सूल, के खिलाफ ख़राब करने के लिए मक्खी मस्तिष्क के कारण होने की संभावना है। तदनुसार, मस्तिष्क 10 में गतिभंग द्वारा पीछा अस्थायी असामर्थ्य, गतिशीलता का क्रमिक वसूली, सिर में जीन की अभिव्यक्ति में परिवर्तन, और प्रगतिशील neurodegeneration सहित मस्तिष्क की चोट के अनुरूप प्रभावित डिवाइस प्रदर्शन phenotypes के साथ इलाज मक्खियों। इस प्रकार, प्रभावित डिवाइस यह संभव प्रायोगिक उपकरण और मक्खियों के लिए विकसित तकनीक की भारी हथियारों का उपयोग करते TBI के अध्ययन करने के लिए बनाता है।

Protocol

प्रभावित डिवाइस 1. निर्माण दो clamps और चार शिकंजा (चित्रा 1 ए) का उपयोग करते हुए बोर्ड के लिए वसंत संलग्न। बोर्ड की चौड़ाई के रिश्तेदार clamps के केंद्र और बोर्ड की बढ़त के साथ बाहरी दबाना फ्लश के साथ ए?…

Representative Results

हम मक्खियों प्राथमिक चोट के बाद शीघ्र ही मर क्यों समझने में रुचि रखते हैं। मौत यों, हम प्राथमिक चोट के 24 घंटा के भीतर मृत्यु हो गई कि मक्खियों का प्रतिशत है जो 24 घंटे में मृत्यु दर सूचकांक (एमआई 24), निर्…

Discussion

प्रभावित डिवाइस विधि यह TBI के 11 मर्मज्ञ बजाय बंद सिर का कारण बनता है कि इस तथ्य से मक्खियों में घाव चोट दण्ड कि अन्य तरीकों से भिन्न है। इसके अलावा, प्रभावित डिवाइस विधि कई मक्खियों में TBI के दण्ड के लि?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

इस काम के स्वास्थ्य अनुदान, R01 AG033620 (बीजी) के राष्ट्रीय संस्थान द्वारा और रॉबर्ट ड्रेपर प्रौद्योगिकी अभिनव अनुदान (काला कौवा) द्वारा समर्थित किया गया।

Materials

Zinc plated compression spring The Hillman  Group 540189 9 7/8 in (length), 15/16 in (outer diameter), 0.12 in (wire size)
Wooden board 9 in (length), 6.5 in (width), 0.75 in (height)
Clamps Sigma Electrical Manufacturing Corporation 49822 3.10 in (length), 0.68 in (width), 1.11 in (height), EMT Two Hole Straps, click on type for 1 inch steel EMT conduit
Loop half of self-adhesive velcro 3 in (length), (3/4 in width)
Polyurethane ice bucket cover Fisher Scientific 02-591-45 9 1/8 in (length), 9 1/8 in (width), 1 1/4 in (height)
Plastic fly vials Applied Scientific AS-510 3 11/16 in (height), 1 1/16 in (inner diameter), 1 1/8 in (outer diameter)
Large cotton balls Fisher Scientific 22-456-883
Paper protractor 10 in (diameter)

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Citer Cet Article
Katzenberger, R. J., Loewen, C. A., Bockstruck, R. T., Woods, M. A., Ganetzky, B., Wassarman, D. A. A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila. J. Vis. Exp. (100), e52905, doi:10.3791/52905 (2015).

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