シンプルでコンピュータ支援嗅覚テストマウス用
Summary
We present a simple and unbiased olfactory test in mice. With this protocol olfactory discrimination, preference, avoidance and sensitivity to a novel odor as compared to water can be assessed in single behavioral sessions. This method is indicated for a single experimenter and analysis is based on computer-assisted video processing.
Abstract
嗅覚は、種間で高度に保存されており、再生と生存のために必要とされます。
ヒトでは、嗅覚はまた、加齢に伴って影響を受けている感覚の一つであり、神経変性疾患の強力な予測因子です。したがって、嗅覚試験を早期に神経障害を検出するための非侵襲的診断法として使用されています。嗅覚ネットワーク感受性の根底にあるメカニズムを理解するためには、げっ歯類における嗅覚の研究は、過去10年間で勢いを得ています。
ここでは、事前の食料や水の制限を必要とせずに、マウスにおける先天性匂い知覚と感度の非常にシンプルな、時間効率的かつ再現性の嗅覚検査方法を提示します。試験をマウスに慣れた環境で実行され、香りや匂い物質の曝露の2分のセッションのみを必要とします。解析は、ImageJのにコンピュータ支援コマンドを使用して、 事後に実行されるためであることができます一研究者が最初から最後まで行きました。
このプロトコルは、特別なハードウェアや設定を必要とせず、嗅覚と感度のテストに興味の任意の実験室のために示されています。
Introduction
嗅覚は、哺乳動物において最も発達し、重要な感覚機能の一つです。嗅覚活性の減損は、最悪のシナリオでも、生存中で、食物摂取、社会的行動に影響を与えてもよいです。ヒトでは、嗅覚の劣化は、年齢依存1であり、神経疾患2の強力な予測因子であると考えられる– 6。ペンシルバニア大学によって開発された嗅覚同定試験は、現在、早期神経学的欠損7を評価し、高い確率で認知症8,9の進行を予測することができるほとんどの、使用される非侵襲的、定量化、診断テストの1つを表します。
嗅覚系のアクセシビリティとげっ歯類における嗅覚の隆起は、嗅覚機能10のメカニズムに対処する研究の強いラインを巻き起こしました。我々は以前のシグナリングRECEPTの機能の喪失を示しましたまたはNotch1のは、嗅覚回避11に影響を与えます。このプロトコルでは、嗅覚の性能を研究するために、ニューロンやグリアにおけるシグナリングリガンド、Jagged1を欠損したマウスを使用します。
先天性嗅覚は知覚、匂いと嗅覚感度4の間の識別の3つのパラメータによって定義されています。げっ歯類における嗅覚検査は、様々な方法で行うことができ、いくつかの行動研究は、特定の蒸気濃度で、かつ正確な時間枠12に動物の匂いを提供olfactometersの使用にする– 14。それにもかかわらず、この機器は高価であり、唯一の専門の施設で利用可能です。我々の研究では、揮発性の香りを使用して実施される、簡単、迅速かつ再現性の嗅覚試験プロトコルを提供します。テストは、誘引や忌避臭にメジャー知覚を説明し、香りと水11,15,16との区別を評価します。 wは、同じ設定を使用しますeはまた、異なる濃度16,17で臭いに対する感度を測定することができます。ページや同僚18の仕事に触発され、事後コンピュータ支援ビデオ処理は、実験的な盲検化の必要性と実験全体を実行する一人のために可能にすることなく、公平な結果を提供します。
このプロトコルは、マウスにおいて嗅覚挙動を研究するための出発点を提供することを目的とします。
Protocol
Representative Results
Discussion
匂いの知覚、匂いに対する水と感度対匂いの判別：このプロトコルで提案されたテストは、マウスにおける先天性嗅覚行動のさまざまな側面を評価することを可能にします。このプロトコルは、以前に15を示す嗜好と回避スケールに従って任意の臭いにも適用することができます。プロトコルは探索活動に基づいているので、それはマウスが彼らの動きに影響を与え、嗅覚探査を妨害…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work is funded by the Swiss National Foundation (31_138429) and Synapsis Foundation for the support of research on Alzheimer’s disease.
Materials
| Mouse cage | Italplast (Italy) | 1144B | 36 cm length x 20.5 cm width x 13.5 cm height |
| Chipped wood bedding | Abedd (Austria) | LTE E-001 | 3 cm high |
| Peanut butter | Migros (Swizterland) | NA | 1:10 |
| 2-Methylbutyric | Sigma Aldrich (Switzerland) | W269514 | Pure |
| Female Urine from fertile females of same mouse strain | NA | NA | Dilution series |
| Camera | Olympus (US) | Camedia C-8080 | MOV files |
| Quicktime for Java (Windows) | Apple (USA) | NA | video plugin for visualizing MOV files |
| Image J for Windows | NIH (USA) | NA | Video Processing/Analysis |
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