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Article de méthode

Orthotopique Hind Limb transplantation chez la souris

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DOI :

10.3791/53483

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12 février 2016

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* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Ce modèle de roman pour arrière orthotopique branche transplantation chez la souris, l'application d'une technique de brassard non-suture pour anastomose super-microvasculaire, fournit un outil puissant pour la recherche immunologique mécanique in vivo concernant une allotransplantation composite vascularisée (VCA).

Résumé

Les systèmes de modèles animaux in vivo, et en particulier les modèles murins, sont devenus des outils scientifiques puissants et polyvalents indispensables à la recherche fondamentale et translationnelle dans le domaine de la médecine de transplantation. Une vaste gamme de réactifs est disponible exclusivement dans ce contexte, y compris des anticorps monoclonaux et polyclonaux pour des applications diagnostiques et interventionnelles. De plus, un grand nombre de souches génotypées, consanguines, transgéniques et knock-out permettent une étude détaillée des contributions individuelles des composants humoraux et cellulaires à l’interaction complexe d’une réponse immunitaire et font de la souris l’étalon-or de la recherche immunologique.

L’allotransplantation composite vascularisée (VCA) délimite un nouveau domaine de transplantation utilisant des allogreffes pour remplacer les « semblables » chez les patients souffrant de perte de tissu traumatique ou congénitale. Ce protocole méthodologique chirurgical montre l’utilisation d’une technique de brassard sans suture pour l’anastomose super-microvasculaire dans un modèle de transplantation orthotopique de membre postérieur de souris. Le modèle permet spécifiquement de comparer les paradigmes établis dans le domaine de la transplantation d’organes solides avec une nouvelle forme de transplantation composée de divers composants tissulaires différents. De manière unique, ce modèle permet la transplantation d’un compartiment et d’une niche de moelle osseuse vascularisés viables qui ont le potentiel d’exercer un effet bénéfique sur l’équilibre entre l’acceptation et le rejet immunitaires. Cette technique fournit un outil pour étudier la reconnaissance des alloantigènes et le rejet et l’acceptation des allogreffes, et permet la poursuite d’études sur la régénération nerveuse fonctionnelle pour faire progresser ce nouveau domaine de la transplantation.

Introduction

La fin des années quatre-vingt-dix a marqué le début de la transplantation reconstructive avec la première greffe de main réussie réalisée en France en 1998. Depuis lors, l’utilisation des VCA pour la reconstruction d’anomalies tissulaires dévastatrices a été utilisée avec succès chez un large éventail de patients. À ce jour, le monde compte 76 destinataires de 112 membres supérieurs ainsi que 31 visages 1-3. De plus, plusieurs autres types d’ACV tels que la paroi abdominale 4, le larynx 5, la trachée 6, les articulations vascularisées 7 et même le pénis 8 ont été réalisés. De plus, la naissance vivante....

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Protocole

Toutes les expériences ont été menées en conformité avec le Guide pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire de l'Institut national de la santé (NIH) et ont été approuvés par le Comité de l'Université Johns Hopkins animal soin et l'utilisation (JHUACUC). Les procédures spécifiques ont été réalisées dans le cadre du protocole de MO13M108 de ACUC approuvé.

Opération 1. des donateurs

  1. Administrer une analgésie au point de temps approprié pour chaque formulation pharmacologique avant la chirurgie. Conformément à la protection des animaux et l'utilisation approuvée protocole utilisé 0,1 mg / kg de poids corporel de la bu....

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Résultats

Effectuer allotransplantation composite vascularisée dans un modèle de souris à l'aide d'une technique non-suture manchon permet d'obtenir une excellente et de longue greffon à long terme et des animaux survie comme le montre la Figure 1. De plus, il représente une méthode fiable pour l'obtention de résultats reproductibles de rejet d'allogreffe progressive de composite vascularisée allotransplantation tel que documenté par les images de la fi.......

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Discussion

Vascularisée composite allotransplantation, comme extrémité supérieure et le visage transplantation pour la reconstruction de défauts tissulaires dévastatrices, a évolué comme une option de traitement valable pour les patients non modifiables de procédures de reconstruction classiques. Les progrès techniques dans le domaine de la microchirurgie reconstructive ainsi que d'une vaste expérience avec immunosuppresseur puissant et thérapies modulatrices immunitaires dans la transplantation d'organes solides, permet d.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêt financier concurrent.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par l'armée, la marine, NIH, Armée de l'Air, VA et des affaires de santé pour soutenir l'effort AFIRM II, sous Award No. W81XWH-13-2-0053. L'armée américaine Research Acquisition activité médicale, 820 Chandler Street, Fort Detrick MD 21.702 à 5014 est le bureau d'acquisition attribution et l'administration. Les opinions, les interprétations, conclusions et recommandations sont celles de l'auteur et ne sont pas nécessairement ceux proposés par le ministère de la Défense.

Les auteurs tiennent à remercier Jessica Izzi, DVM, Caroline Garrett, DVM et Julie Watson, DVM pour leur excellent so....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Suture, suture 6-0 nylonMWI31849
, suture 6-0 PolysorbMWI72667
, 10-0 NylonAero SurgicalTK-107038
Tubulure en polyimide, taille 25Vention Medical141-0023
Tubulure en polyimide, taille 27Vention Medical141-0015
Pinces microvasculaires (simples)Synovis00396
Pinces microvasculaires (doubles)Synovis00414
Micro-ciseauxSynovisSAS-18
Micro-pincesSynovisFRS-15 RM-8
Micro-dilatateursSynovisFRS-15 RM-8D.1
Micro-Aiguille-EntraînementSynovisC-14
Applicateur Micro-ClampSynovisCAF-4
Micro-Flushing NeedleHamilton10MM, 30° ;, 33G
Lactate Ringers SolutionFisher ScientificNC9968051
BuprénorphineNuméro DEA requis ; Obtenu de la pharmacie hospitalière.
Enrofloxacine ; Baytril BayerHealth Care186599
Héparine Obtenue d’unepharmacie hospitalière

Références

  1. Khalifian, S., et al. Facial transplantation: the first 9 years. Lancet. , (2014).
  2. Petruzzo, P., Dubernard, J. M. The International Registry on Hand and Composite Tissue allotransplantation. Clin. Transpl. , 247-253 (2011).
  3. Shores, J. T., Brandacher, G., Lee, W. A.

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Réimpressions et autorisations

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