Modèle apicale résection souris pour étude au début de régénération de coeur de mammifère

Résumé

Un protocole vidéo étape par étape de résection apicale est démontré dans cette étude. La résection apicale est une approche chirurgicale récemment mise en évidence dans la recherche sur la régénération cardiaque chez les mammifères. Cette étude pourrait promouvoir l’application de la résection apicale comme méthodologie standard dans la recherche sur le mécanisme sous-jacent à la régénération cardiaque.

Résumé

Les maladies cardiovasculaires empoisonne le monde entier en raison de changements de style de vie intensifs. La régénération cardiaque est très prometteuse pour la réparation et la restauration de cardiomyocytes perdus en raison de blessures et de maladies. Contrairement à la régénération cardiaque robuste de certains vertébrés inférieurs, coeurs de mammifères adultes présentent généralement une capacité minimale pour la régénération et la réparation cardiaque. Cependant, des études récentes ont suscité un intérêt scientifique considérable à la conclusion que, entre le jour postnatal 1 à 7 (P1 à P7), le cœur de souris néonatale conserve potentiel régénératif significative après résection apicale (ie, l'amputation chirurgicale et l'exposition de gauche apex ventriculaire). Une importante controverse sur cette constatation pourrait être due à des procédures liées à la chirurgie-divers utilisés dans les efforts visant à reproduire ou à développer sur cette importante découverte. Ces instructions présentent dynamiquement les matériaux et les méthodes pour la résection apicale dans un modèle de souris. Les étapes marquantes de ce rongeur Survival chirurgie implique l'hypothermie anesthésie, thoracotomie, l'amputation chirurgicale du coeur apex ventriculaire, et la suture et la récupération de la souris. L'approche décrite pourrait étendre l'application du modèle de la souris apicale de résection pour la recherche cardiovasculaire.

Introduction

La durée de vie humaine prolongée entraîne diverses maladies liées au vieillissement et au mode de vie, y compris l’insuffisance cardiaque, l’une des principales causes de mortalité. Cependant, sans le remplacement des cellules musculaires cardiaques perdues ou dysfonctionnelles, les traitements actuels ne peuvent améliorer que transitoirement la fonction cardiaque^{1, 2}. Ainsi, il est nécessaire de découvrir et de développer des stratégies innovantes de régénération et de réparation cardiaques. Le cœur des mammifères adultes a un potentiel de régénération limité. Des études portant sur des vertébrés inférieurs, tels que les amphibiens urodèles et les poisso....

Protocole

Toutes les expériences de souris ont été approuvés par la protection des animaux et l'utilisation de programme au National Institutes of Health (NIH) avec le numéro de protocole H0083R3. Le NHLBI IACUC approuvé le protocole sans analgésiques.

1. hypothermie anesthésie chez des souris néonatale

1. Stériliser les éponges et de matériel chirurgical dans un autoclave avant la chirurgie. Préparer tous les matériaux chirurgicaux et passer sur un stérilisateur à billes chaude 15-20 minutes à l'avance pour atteindre 240 ° C à 270 ° C.
2. Transférez tous C57BL / 6 chiots (âge P1) de leur mère qui allaite à une cage de la sou....

Résultats

Chiots de souris ont été euthanasiées 1, 2, et 21 jours après la résection apicale, et leurs coeurs ont été recueillies pour H & E et Trichrome de Masson. Couleur bleue dans Trichrome de Masson indique le dépôt de la matrice extracellulaire épicardique ^5. Avec succès résection apicale, un caillot de sang est formée pour sceller efficacement la LV une résection jour post-apical, comme représenté sur la figure 1A. Une résorption progressive du caillot de sang et la fibrose .......

Discussion

La régénération cardiaque présente un potentiel pour le traitement et la prévention de l’insuffisance cardiaque^{1, 2}. Les modèles animaux sont indispensables et jouent un rôle essentiel dans la compréhension de la façon dont la régénération cardiaque se produit^3-6. De nombreux amphibiens et poissons régénèrent les tissus cardiaques en réponse à une blessure, ce qui donne un aperçu de notre compréhension des maladies cardiovasculaires humaines^{13, 14}. En termes d’évolution, cependant, la phy.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Olsen-Hegar Porte-aiguilles avec ciseaux, 1,5 mm	Outils de sciences fines	12002-12
Ciseaux à ressort Vannas - 2 mm Cutting Edge	Fine Science Tools	15000-03	Ciseaux d’iridectomie
Stérilisateur à billes chaudes	Outils de sciences fines	18000-45
Pince à iris, droite, dentelée	Outils de sciences fines	11064-07
Pince à iris, Courbé, dentelé	Fine Science Tools	11065-07
Ciseaux de karité - Courbé/émoussé-émoussé/12cm	Fine Science Tools	14105-12
Pince à sertir à poignée ronde, Straight	Fine Science Tools	18025-12
Ciseaux à ressort Vannas à manche rond	Fine Science Tools	15400-12
Fine Hemostat	Fine Science Tools	13007-12
Lampe Loupe	Luxolamp Corp	IM120  ;
Lampe chauffante	Brandt Equipment llc	51152/3
6-0 Sutures Prolene	Ethicon	8889H
Colle pour la peau-Vetbond Tissue Adhesive  ;	3M  ;	1469
Applicateurs stériles à pointe de coton	Dynarex	4305
WEBCOL Tampon de préparation à l’alcool	Covidien	6818	Moyen 2 plis, 200/BOÎTE, saturé de 70 % d’alcool isopropylique
Curity Éponges tout usage	Covidien	9024	Non tissé 4 PLIS, 4"x4 » (10.2cm× ; 10,2 cm)
Feuille de protection de paillasse	KIMTECH SCIENCE	7546	18 « x 19,5 » (45,72 cm x 49,53 cm) x 50
0,9 % de chlorure de sodium, 250 ml	Hospira Inc.	NDC 0409-6138-22
Bâtonnets de solution de bétadine	Purdue Products L.P.	NDC 67618-153-03
Autoclave	TOMY Digital Biology	SX-700	STÉRILISATEUR À VAPEUR HAUTE PRESSION
Scanner de lames	HAMAMATSU	NanoZoomer 2.0-RS