피부 마이크로 이식 세대를위한 새로운 세분화 방법 후 조직 특성
Summary
새로운 프로토콜에있어서 인간의 조직들을 분해하고, 콜라겐 스폰지와 함께, 피부 병변의 치료에 사용할 준비 인간 생체 복합체를 야기 미세자가 이식편을 만들 설명. 또한,이 시스템은 기계적 세분화 한 후 다른 시간에 마이크로 이식편의 세포 생존율을 유지.
Abstract
몇 가지의 새로운 방법은 급성 및 만성 피부 병변 한 단계 치료를 제공하기 위해 수술 중자가 세포 현탁액을 수득 생명 공학 분야에서 개발되어왔다. 또한, 외상, 당뇨병, 감염증 및 기타 원인으로 인한 만성하지만 급성 상처 관리 도전 남아있다. 이 연구에서 우리는 하나 환자의 피부 조직과 임상 응용 프로그램에서자가 마이크로 이식을 만들 수있는 새로운 방법을 설명합니다. 또한, 피부, 디 epidermized 진피 (DED) 및 다기관 및 / 또는 다중 조직 공여자로부터 유래 된 진피의 피부 조직의 시험 관내 생물학적 특성화 또한 수행 하였다. 모든 조직은 우리가 가능한 마이크로 이식편을 수득 할 수 있도록, 새로운 프로토콜 세분화 하였다. 특히,이 혁신적인 프로토콜 피부 환부에 도포 될 준비자가 이식 및 마이크로 콜라겐 스폰지로 이루어지는 바이오 복합체를 만들 수 있음을보고 하였다. clini다리 병변자가 생체 복합체 학적 애플리케이션은 재 epitalization 처리 및 병변의 부드러움 모두 향상을 보여주는보고되었다. 또한, 우리의 체외 모델은이 시스템을 기계적 세분화 한 후 세포 생존 능력은 문화의 최대 7 일의 시간 동안 유지되는 것으로 나타났다. 또한 세분화로부터 얻은 세포의 풀이 높은 재생 잠재력, 조직 재생 및 복구 과정에서 중요한 역할을 발휘하는 중간 엽 줄기 세포를 포함한 여러 세포 유형으로 구성되어, 유동 세포 계측법 분석으로 관찰 하였다. 마지막으로, 우리는 한천 요리를 배양 할 때이 절차는 마이크로 이식의 불임을 유지 체외에서 보여 주었다. 요약하면, 우리는 의사가 가능한 멸균 일반적인 생물학적 scaffo으로 단독으로 또는 조합하여 적용 할 수있는 마이크로 – 도관을 사용하여 하나의 준비 단계에서 획득하는 새로운 재생 방식은 유망한 수단이 될 수 있다는 결론LDS.
Introduction
지난 몇 년 동안, 몇몇 새로운 방법은 급성 및 만성 피부 병변 원스텝 치료를 제공하기 위해 수술 중자가 세포 현탁액을 수득 생명 공학 분야에서 개발되어왔다. 또한, 외상, 당뇨병, 감염증 및 기타 원인으로 인한 급성하지만 주로 만성 상처 관리 도전 남아있다. 만성 상처 의료 시스템 전 세계적으로 1 막대한 재정 부담의 원인이 심각한 글로벌 건강 문제가 될 것을 장착 증거가있다.
피부 병변의 치료 성공률을 높이기 위해 (셀룰러 인핸스 포함) 광범위한 조작이없는 무균 상태의 유지는 즉시의 손상된 영역에 도포 될 수있다 세포 현탁액을 생성하기 위해 필수적인 환자함으로써 이러한 세포 공장으로 클린 룸에서 더 이상 처리를 피하는. 성작은 피부 생검, 연삭, 원심 분리 등의 분리 방법 (예를 들어, 효소 또는 기계)로부터 arting 자주 성장 배지에서 배양 될 수있는 세포 현탁액을 얻기 위해 사용된다. 이들 모든 방법은 일반적으로 셀 구조를 강조하고, 세포 생존율의 감소를 초래 실행 시간이 필요하다. 또 다른 중요한 양태는 손상된 부분을 복구하는, 예를 들어, 임상의에 의해 사용될 준비자가 세포 현탁액을 수득한다. 또한, 잘자가 조직 이식은 결국 유도와 전도 2, 3의 원리에 의해받는 사이트에서 살아 남기 위해 전송 절차를 살아남을 것으로 설정됩니다. 이상적인 이식 조직은 쉽게 사용할 수 있으며 낮은 항원과 공여부의 이환율 (4)이 있어야합니다.
이 증거에 기초하여, 본 연구의 목적은 제 적합자가 생체 복합체를 만드는 것이었다조직 복구에 임상 응용 프로그램입니다. 이를 위해,이 프로토콜에 의해 세분화 된 피부 조직으로부터 개시자가 미세 이식을 구하는 새로운 방법을 설명한다. 사례 발표도 여기에 콜라겐 스폰지와 함께이 프로토콜에 의해 얻은자가 미세 이식의 임상 응용 프로그램으로 설명한다. 이 방법은 이미 사람 조직 (5)의 기계적인 세분화 효율적인 것으로보고되고있어 이식 및 피부 조직 6,7의 재생뿐만 아니라 구강 악안면 외과 8-10에 결합 조직의 재생 치료를 위해 임상 적으로 사용되어왔다 .
또한,이 연구의 목적은 초이 프로토콜에 의하여 자신의 세분화 후에 피부 조직의 생물학적 특성이었다. 이 목적을 위해 피부 조직의 다른 동종 샘플은 다른 여러 기관의 트렁크 지역에서 유래및 / 또는 다중 조직 기증자는 에밀리아 로마 냐 지역 스킨 은행에서 이식을위한 조직 (CNT 2013) 수확, 처리에 국립 규칙을 다음과 분산 처리 하였다.
CASE 프리젠 테이션 :
자동차 사고로 인한 복합 외상을 보여주는 35 세 여자 환자는 앙 코나 병원의 중환자 실에 입원했다. 환자 인해 열린 상처와 외부 고정 안정화 복합 골절로 다리에 감염을 보였다. 두 급진적 인 변연 절제술을 수행하고 상처 음압 치료 (VAC 치료) 후 깨끗한되었고, 골막 건강 나타 났을 때, 우리는 회복 두 달 후에 프로토콜을 적용 하였다. 이 시스템을 세분화 한 후, 얻어진 마이크로 이식이어서 환부 복구에 미치는 효과를 조사하기 위해 주입 된 콜라겐 스폰지 바이오 복합체를 만들기 위해 사용되었다.
Protocol
Representative Results
Discussion
이 예비 연구. 이미 마이크로 이식 임플란트 (9)의 효과 (10)를 최적화하는 다른 임상 적 적용에보고 된이 프로토콜에 의해 얻어진 마이크로 이식은 콜라겐 스폰지와 결합 될 수 있다는 것을 보여 주었다 특히, 본 연구는 생체의 용량을보고 -complexes, 임상 응용 프로그램에서 30 일 후에 다리 병변의 상처 치유를 보조하기 위해, 마이크로 이식 및 콜라겐 스폰지로 구성. 또한, 체외</…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 유동 세포 계측법 분석을 수행하는 연구에 기여에 대한 감사 박사 페데리카 Zanzottera를 바랍니다.
Materials
| Rigenera Machine | Human Brain Wave | 79210R | |
| Rigeneracons | Human Brain Wave | 79450S | |
| MTT | Roche Diagnostic GmbH | 11465007001 | |
| RPMI medium | PBI International | 733-2292 | |
| DMEM medium | PBI International | F 0415 | |
| Antibiotics | Biological Industries PBI | 03-038-1 | |
| Antibodies for FACS Analysis | eBiosciences | code 12-1469 for CD146-P; code 17-0349 for CD34-APC | |
| Columbia agar | BioMerieux Company | 43041 | |
| Condress® | Abiogen Pharma | collagen sponge used for bio-complexes | |
| DMSO | Bioniche Pharma USA LLC, Lake Forest, IL | ||
| NaCl solution | Fresenius Kabi, Bad Homburg, Germany | ||
| Xylene | Carlo Erba |
References
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