Ce manuscrit décrit un protocole détaillé pour la collecte de données de pression-volume de la souris.
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Article de méthode
Mesure de boucles de volume de pression chez la souris
Dans cet article
Résumé
Résumé
Comprendre les causes et la progression de la maladie cardiaque présente un défi important pour la communauté biomédicale. La flexibilité génétique de la souris offre un grand potentiel pour explorer la fonction cardiaque au niveau moléculaire. La petite taille de la souris présente des défis en ce qui concerne l'exécution phénotypage cardiaque détaillée. Miniaturisation et d'autres progrès technologiques ont fait de nombreuses méthodes d'évaluation cardiaque possible chez la souris. Parmi ceux-ci, la collecte simultanée des données de pression et de volume fournit une image détaillée de la fonction cardiaque qui ne sont pas disponibles par le biais de toute autre modalité. Voici une procédure détaillée pour la collecte de données en boucle pression-volume est décrit. Inclus est une discussion sur les principes qui sous-tendent les mesures et les sources potentielles d'erreur. la gestion Anesthetic et approches chirurgicales sont discutées en détail car ils sont à la fois critique pour obtenir la mesure hémodynamique de haute qualités. Les principes du développement du protocole hémodynamique et les aspects pertinents de l'analyse des données sont également abordées.
Introduction
Les maladies cardiovasculaires continue d'être une cause importante de mortalité et de morbidité dans le monde entier 1. Les maladies du cœur présentent des défis particulièrement difficiles dans le développement de nouvelles thérapies. Les progrès en génétique prévoient la possibilité d'identifier une multitude de contributeurs potentiels génétiques au développement de maladies cardiaques. Le caractère intégrateur du système cardio-vasculaire exige que ces cibles génétiques validés dans des modèles animaux intacts. La flexibilité et le faible coût du logement génétiques de la souris ont apporté à l'avant-garde pour l'évaluation du rôle phy....
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Protocole
Avant d'effectuer les procédures décrites dans ce protocole, obtenir l'approbation par le comité local de protection des animaux et l'utilisation institutionnelle.
1. Configuration du Rig expérimental
Remarque: Cette procédure est réalisée sur des animaux anesthésiés et la qualité des données est proportionnelle à la qualité de l'appui offert à l' anesthésie de l'animal. Ce premier détail section volonté de l'équipement et les procédures nécessaires pour fournir une anesthésie à la souris tout en effectuant ce protocole.
- Sélectionnez un protocole anesthés....
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Résultats
Par convention, le volume est tracée sur l'axe X et la pression sur l'axe des Y comme dans la figure 1. Les boucles pression-volume résultant d' une pression de traçage en fonction du volume doit ressembler à un rectangle dont les arêtes verticales représentant la variation isovolumiques de la pression ( à savoir, lorsque les deux valves mitrale et aortique sont fermés). L 'horizontale inférieure représente le remplissage du ventricule à travers .......
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Discussion
Il y a trois étapes critiques dans cette procédure: 1) la mise en place du tube d'intubation et une ventilation appropriée, 2) mise en place du cathéter IV jugulaire, et 3) la mise en place correcte du cathéter de PV dans le ventricule gauche. Détermination de la fréquence respiratoire appropriée est une partie importante de fournir une assistance ventilatoire. souris conscientes maintiennent généralement la ventilation alvéolaire avec peu profondes respirations rapides. En général, les souris ventilées auront beauc.......
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Déclarations de divulgation
L’auteur n’a rien à divulguer.
Remerciements
L'auteur aimerait remercier le financement du NHLBI (K08 HL102066 et R01 HL114832).
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Dumont 5/45 (2) | Fine Science Tools | 11251-33 | |
| Pince à dilatation de récipient | Outils de science fine | 18153-11 | |
| Castroviejo Micro Dissection Ciseaux à ressort | Roboz Instruments | RS-5668 | |
| Pince Octogon - Dentelée/Courbée | Outils de science fine | 11041-08 | |
| Pince Octogon - Dentelée/droite | fine Outils scientifiques | 11040-08 | |
| Ciseaux de dissection - Lame lourde | Outils de sciences fines | 14082-09 | |
| Ruban chirurgical Transpore | 3M | 1527-1 | |
| 3-0 Suture en soie | Outils scientifiques fins | 18020-30 | |
| Ventilateur TOPO | Kent Scientific | TOPO | |
| Martin ME 102 Unité électrochirurgicale | Appareil | HarvardPY2 72-2484 | |
| Pompe à seringue | Lucca Technologies | GenieTouch | |
| Stéréomicroscope avec support de perche | Nikon | SMZ-800N | |
| Thermomètre à thermocouple | Cole Parmer | EW-91100-40 | |
| T/Pump Recirculateur d’eau chaude | Kent Scientific | TP-700 | |
| ADVantage Système Pression-Volume | Transonic | ADV500 | |
| Acquisition et analyse de données | DSI | Ponemah ACQ-16 |
Références
- Mozaffarian, D., et al. Heart disease and stroke statistics--2015 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 131 (4), e29-e322 (2015).
- Katz, A. M. Influence of altered inotropy and lusitropy on ventricula....
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Réimpressions et autorisations
