La procédure de plan d’expériences présentée ici permet d’évaluer différents floculants en fonction de leur capacité à agréger des particules dispersées dans des extraits de plantes, réduisant ainsi la turbidité et les coûts de traitement en aval.
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Article de méthode
La procédure de plan d’expériences présentée ici permet d’évaluer différents floculants en fonction de leur capacité à agréger des particules dispersées dans des extraits de plantes, réduisant ainsi la turbidité et les coûts de traitement en aval.
Les plantes sont importantes pour l’homme non seulement parce qu’elles fournissent des produits de base tels que des denrées alimentaires, des aliments pour animaux et des matières premières, mais aussi parce qu’elles peuvent être utilisées comme plateformes de fabrication de produits à valeur ajoutée tels que les produits biopharmaceutiques. Dans les deux cas, il peut être nécessaire de clarifier les extraits liquides de plantes pour éliminer les particules. Une clarification optimale réduit les coûts de filtration et de centrifugation en augmentant la capacité et la longévité. Cela peut être réalisé en introduisant des polymères chargés connus sous le nom de floculants, qui réticulent les particules dispersées pour faciliter la séparation solide-liquide. Il n’existe pas de modèles de floculation mécaniste pour des mélanges complexes tels que les extraits de plantes, c’est pourquoi des modèles empiriques sont utilisés à la place. Ici, une procédure de plan d’expériences est décrite qui permet le criblage rapide de différents floculants, optimisant la clarification des extraits de plantes et réduisant considérablement la turbidité. Les modèles prédictifs qui en résultent permettent d’identifier des conditions de processus robustes et des ensembles de polymères aux propriétés complémentaires, par exemple la floculation efficace dans les extraits à conductivités spécifiques. Les résultats présentés pour les extraits de feuilles de tabac peuvent facilement être adaptés à d’autres espèces ou tissus végétaux et faciliteront ainsi le développement de procédés en aval plus rentables pour les produits de base et les produits pharmaceutiques d’origine végétale.
Les plantes sont largement utilisées pour produire des produits alimentaires tels que les jus de fruits, mais ils peuvent aussi être développés comme des plates - formes pour la fabrication de plus forte valeur ajoutée des produits biopharmaceutiques 1-3. Dans les deux cas, le traitement en aval (DSP) commence souvent par l'extraction de liquides à partir de tissus tels que les feuilles ou les fruits, suivie par la clarification des extraits chargés de particules de 4,5. Pour la fabrication de produits biopharmaceutiques, les coûts de DSP peuvent représenter jusqu'à 80% des coûts de production globaux 6,7 et cela reflète en pa....
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1. Élaborer une stratégie expérimentale adéquate
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Floculation de l'extrait de tabac avec différents polymères
Le procédé décrit ci - dessus a été utilisée avec succès pour développer un procédé pour la floculation des extraits de tabac lors de la fabrication d'un anticorps monoclonal (l'anticorps anti - VIH neutralisant 2G12) et une protéine fluorescente (DsRed) (figure 1) 16, et a depuis été transféré à d'autres protéines, y compri.......
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L'aspect le plus important à considérer lors de la mise en place d' un DoE pour caractériser la floculation des particules est que la conception doit en principe être en mesure de détecter et de décrire les effets prévus ou possibles 36,38, par exemple l'influence du pH, le type de polymère et la concentration de polymère 16. Par conséquent, il est important d'évaluer la fraction de l'espace de conception (FDS) avant de commencer les expériences réelles. Fds est la frac.......
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L'auteur n'a aucun conflit d'intérêt à divulguer.
Je tiens à remercier le Dr Thomas Rademacher pour avoir fourni les graines de tabac transgéniques et Ibrahim Al Amedi pour la culture des plants de tabac. Je tiens à remercier le Dr Richard M Twyman pour son aide éditoriale et le professeur Rainer Fischer pour les discussions fructueuses. Ce travail a été financé en partie par la subvention avancée du Conseil européen de la recherche ''Future-Pharma'', numéro de proposition 269110, la Fraunhofer-Zukunftsstiftung (Fondation Fraunhofer Future) et les programmes internes Fraunhofer-Gesellschaft sous la subvention n°. Attirer 125-600164.
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| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| 2100P Turbidimètre portable | Hach | 4650000 | Turbidimètre |
| 2G12 Anticorps | Polymun | AB002 | Anticorps de référence |
| Biacore T200 | GE Healthcare | 28-9750-01 | Dispositif SPR |
| BP-410 | Furh | 2632410001 | Filtre à manches |
| Catiofast VSH | BASF | 79002360 | Agent |
| floculantCentrifugeuse 5415D | Eppendorf | 5424 000.410 | Centrifugeuse |
| Tube à centrifuger 15 ml | Labomedic | 2017106 | Tube à |
| réaction Tube à centrifuger 50 ml Autonome | Labomedic | 1110504 | Tube à réaction |
| Chitosan | Carl Roth GmbH | 5375.1 | Agent floculant |
| Design-Expert(R) 8 | Stat-Ease, Inc. | n.a.DoE | software |
| Phosphate disodique | Carl Roth GmbH | ; 4984.3 ; | Composant multimédia |
| Ferty 2 Mega | Kammlott | 5.220072 | Engrais |
| Forma -86C Congélateur | ULT ThermoFisher | 88400 | Congélateur |
| Serre | n.a.n.a.Pour | la culture des plantes | |
| Grodan Cubes de laine de roche 10 x 10 cm | Grodan | 102446 | Bloc de laine de roche |
| HEPES | Carl Roth GmbH | 9105.3 | Composant de média |
| K700P 60D | Pall | 5302305 | Couche filtrante en profondeur |
| KS50P 60D | Pall | B12486 | Couche filtrante en profondeur |
| Miracloth | Labomedic | 475855-1R | Toile filtrante |
| MultiLine Multi 3410 IDS | WTW | WTW_2020 | pH-mètre / conductimètre |
| Osram cool white 36 W | Osram | 4930440 | Source lumineuse |
| Phytotron | Ilka Zell | n.a.Pour | la culture des plantes |
| Polymin P | BASF | 79002360 | Floculant |
| POLYTRON PT 6100 D | Kinematica | 11010110 | Dispositif d’homogénéisation avec outil à lame personnalisé |
| Protein A | Life technologies | 10-1006 | Protéine de liaison aux anticorps |
| Chlorure de sodium | Carl Roth GmbH | P029.2 | Composant du milieu |
| Synergy HT | BioTek | SIAFRT | Lecteur de plaques de fluorescence |
| TRIS | Carl Roth GmbH | 4855.3 | Composant multimédia |
| Tween-20 | Carl Roth GmbH | 9127.3 | Composant multimédia |
| VelaPad 60 | Pall | VP60G03KNH4 | Boîtier de filtre |
| Zetasizer Nano ZS | Malvern | ZEN3600 | DLS mesure de la distribution granulométrique |
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