Bu makalede, farelerde yüksek göz tansiyonu retinal iskemi-reperfüzyon hasarı uyarılması için bir yöntem tarif eder. yüksek göz içi basıncı ile retinal iskemi-reperfüzyon hasarı, retina nörovasküler biriminin, insan hastalıkları için, potansiyel hücresel mekanizmaları ve tedavi incelemelerine sağlayan retinada tehlikeye oksijen ve besin teslimat karakterize olan insan patolojilerinin model vermektedir.
Retina İskemi-reperfüzyon (I / R), glokom, diyabetik retinopati ve retinal vasküler oklüzyon da dahil olmak üzere çok sayıda oküler hastalık, hücre hasarına katkıda bulunan patofizyolojik süreç. I / R hasarının kemirgen modelleri, özellikle retina nörovasküler ünitesinde nörodejeneratif hasar bakımından, insan İ / R hasarı için mekanizmalar ve tedavi stratejileri hakkında önemli bilgiler sağlıyor. göz içi basıncı (GİB) yüksekliği ile farelerde retina İ / R hasarını uyarılması için bir protokol burada sunulmuştur. Bu protokolde, oküler ön kamara yükseltilmiş bir tuzlu rezervuar damla aktığı bir iğne ile kanüle edilir. sistolik kan basıncının üzerinde GİB'in yükseltmek için bu damla kullanarak, bir uygulayıcı geçici iç retina kan akımını (iskemi) durur. dolaşım kanül uzaklaştırılmasıyla (reperfüzyon) eski haline getirildiğinde, ağır hücresel hasar retina nörodejenerasyonunda sonuçta ortaya çıkan, ortaya çıkar. Son damızlıkler, bu modelin daha fazla unsurları olarak enflamasyon, vasküler geçirgenlik ve kapiler dejenerasyon göstermektedir. Böyle retinal arter ligasyonu, retina I / tarafından R yaralanması gibi alternatif retina İ / R metodolojileri ile karşılaştırıldığında GİB'in nöronal patogenezi ve tedavisi incelemek için değerli bir araç olarak kendini sunan, anatomik özgüllük, deneysel tractability ve teknik erişilebilirlik avantajlar sunmaktadır yükselmiş retina nörovasküler birimi.
Retina İskemi-reperfüzyon (I / R), glokom, diyabetik retinopati ve retinal vasküler oklüzyonlar 1 de dahil olmak üzere pek çok insan retinal hastalıkları, karakterize etmektedir. Dolaşım sonradan iade edildiğinde retina I / R, retina damar sisteminde azalmış kan akımı (iskemi) retina oksijen ve diğer besin karşı aşırı duyarlılığı, şiddetli oksidatif tetikleyici ve inflamatuar hasar durumunu oluşturur (reperfüzyon) 2. nöral retina retina nörodejenerasyon belki / R'a bağlı hasarın en belirgin özelliği olmak üzere, bu değişikliklere karşı özellikle savunmasız görünüyor. Fare retina İ / R hasarını modelleme için bir protokol burada sunulmuştur. Bu teknik retina nörovasküler birimin insan hastalıkları için potansiyel mekanizmaları ve tedavi stratejilerinin incelemek için araştırmacılar sağlar.
Cerrahi anemi 3 nörodejeneratif sonuçlarını anlamak isteyen cerrahlar tarafından 1952 yılında öncülük rodent Retina I / yüksek göz içi basıncının (GİB) tarafından R iskemik hakaret 4 sonra nörodejeneratif uç noktaları standartlaştırılması amacıyla 1991 yılında yeniden kuruldu. sistolik kan basıncının üstünde göz içi basıncını yükseltmek için tuzlu rezervuar damla kullanarak, bu çalışmalar basınçlı göz kanülasyon retina dolaşımını durdurma ve böylece nöronal dejenerasyona başlatmak için yeterli olduğunu göstermiştir. GİB yükselmesi retina I / R kullanarak Daha yeni çalışmalar I / R-kaynaklı retina nörodejenerasyon 5-12 yatan mekanizmaları ayrıntılı başladı. Çoklu gruplar inflamasyon 13,14, damar geçirgenliği 15,16 ve kılcal dejenerasyonu 14,17 dahil olmak üzere ek patolojik değişiklikler bildirilmiştir. Birlikte ele alındığında, bu çalışmalar daha genel olarak retina nörovasküler hastalığı için bir model olarak, yüksek IOP retinal I / R hasarına kurduk.
I / R yaralanma mekanizmasını karakterize va çalışma için gerekli olanscular hastalığı. Yükseltilmiş GİB'ndan Retina I / R hasarına, I / R akciğer 18 yaralanma, kalp 19, beyin 20, karaciğer 21, böbrek 22 ve bağırsakta 23 de dahil olmak üzere pek çok hipoksi kaynaklı yaralanma modellerinde, biridir. Bu modeller vasküler hastalık anlayışımızı ve klinik çareler geliştirilmesinde olağanüstü olmuştur. oküler dokularda, retina I / GİB yükselmesi ile R sakatlığı I / R süreçlerinin soruşturma uzatarak bu ilgili koşulların daha kapsamlı bir resmini yardımcı olur.
retinada klinik nörodejeneratif koşullar, retina I / GİB yükselmesi ile R yaralanması ile yakından gelen iskemik patogenezi keşfetmek ilgilenen araştırmacılar için değerli bir araç sunuyor. Burada tarif edilen protokol, uysal, ve erişilebilir hedeflenmektedir. Böyle retina nöronlarının ölçümü, retina kalınlığı ölçümü ve elektrofizyolojik r olarak nöronal dejenerasyonu uç noktalar ile de tamamlanmaktadırretinal sinir işlevinin ayıt. Bu model nörovasküler soruşturma ilerleyen yararını kanıtlamış ve görsel tıp araştırmalarında temel bir kuralı olarak statüsünü kazanma olacağını göstermektedir.
Retina I / GİB yükselmesi ile R yaralanması kemirgen retina nörovasküler ünitesinde hücresel hasarı ve disfonksiyonu, özellikle nörodejenerasyonu, modelleme kendi programını kanıtlamıştır. Bu prosedür sağlam bir kontrol doku sağlar ve teknik gelişmişliği açısından kolayca erişilebilir. Bu ve basınç ve iskemi süresini artırarak yaralanma şiddetini 24 artırabilir diğer I / R yaralanmasına modellerinde görülmüştür. Bu nedenle, bazı uygulayıcılar burada 4,6-10,12</su…
The authors have nothing to disclose.
(; EJD EY022383 ve EY022683) ve Core hibe (P30EY001765), Görüntüleme ve Mikroskopi Çekirdek Modülü Bu çalışma Ulusal Sağlık Enstitüleri araştırma hibeleri tarafından desteklenmiştir.
Heparin Sodium Injection, USP | Abraxis Pharmaceutical Products | 1000 USP/mL | |
BSS Sterile Irrigating Solution | Alcon Laboratories, Inc. | 9007754-0212 | 500 mL |
SC-2kg Digital Pocket Scale | American Weigh Scales, Inc. | SC-2kg | |
Tropicamide Ophthalmic Solution USP 1% | Bausch + Lomb | 1% (10 mg/mL) | |
Proparacaine Hydrochloride Ophthalmic Solution USP, 0.5% | Bausch + Lomb | 0.5% (5 mg/mL) | |
INTRAMEDIC Polyethylene Tubing | Becton Dickinson and Company | 427400 | Inner diameter: 427400 |
30G1/2 PrecisionGlide Needles | Benton Dickinson and Company | 305106 | |
BC 1mL TB Syringe, Slim Tip with Intradermal Bevel Needle, 26G x 3/8 | Benton Dickinson and Company | 309625 | |
BD 60mL Syringe Luer-Lok Tip | Benton Dickinson and Company | 309653 | |
Zeiss OPMI Visu 200/S8 Microscope | Carl Zeiss AG | 000000-1179-101 | |
Sterile Syringe Filter | Corning Inc. | CLS431224 | 0.20 µm |
Durasorb Underpads | Covidien | 1038 | 23 x 24 inches |
Alcohol Prep | Covidien | 6818 | 2 Ply, Medium |
Student Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools | 91150-20 | |
Hartman Hemostats | Fine Science Tools | 13002-10 | |
Primary Set, Macrobore, Prepierced Y-Site, 80 Inch | Hospira | 12672-28 | |
Phosphate Buffered Saline pH 7.4 (1X) | Invitrogen | 10010-049 | 500 mL |
Distilled water | Invitrogen | 15230-204 | 500 mL |
C57BL/6J Mice | The Jackson Laboratory | 664 | |
AnaSed Injection: Xylazine Sterile Solution | LLOYD, Inc. | 20 mg/mL | |
Lubricating Jelly, Water Soluble Bacteriostatic | MediChoice | 3-Gram Packet | |
NAMIC Angiographic Pressure Monitoring Manifold | Navilyst Medical, Inc. | 70039355 | 5-Valve Manifold with Seven Female Ports |
Goniosoft, Hypromellose 2.5% Ophthalmic Demulcent Solution: Hydroxypropyl Methylcellulose | OCuSOFT, Inc. | 2.5% (25 mg/mL) | |
Ketaset CIII: Ketamine Hydrochloride | Pfizer, Inc. | 100 mg/mL | |
Trans-Pal I.V. Stand | Pryor Products | 372 | Furnished with a home-constructed 60-cm stainless steel extension |
Acepromazine: Acepromazine Maleate Injection, USP | Vet One | 10 mg/mL | |
V-Top Surgery Table/Adjustable Hydraulic | VSSI | 100-4041-21 | |
Tube Fitting Luer Male to Luer Male | Warner Instruments | 64-1579 |