पूर्व नैदानिक Orthotopic Murine मानव प्रोस्टेट कैंसर के मॉडल
Summary
Prostate cancer is the second most common cause of cancer-related deaths in the United States. An orthotopic cancer model provides a useful approach to understand the biology of prostate cancer and to evaluate the efficacy of therapeutic regimens. This protocol describes detailed steps necessary to establish an orthotopic prostate cancer mouse model.
Abstract
To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information about this disease. The human orthotopic prostate cancer xenograft mouse model provides a useful alternative approach for understanding the specific interactions between genetically and molecularly altered tumor cells, their organ microenvironment, and for evaluation of efficacy of therapeutic regimens. This is a well characterized model designed to study the molecular events of primary tumor development and it recapitulates the early events in the metastatic cascade prior to embolism and entry of tumor cells into the circulation. Thus it allows elucidation of molecular mechanisms underlying the initial phase of metastatic disease. In addition, this model can annotate drug targets of clinical relevance and is a valuable tool to study prostate cancer progression. In this manuscript we describe a detailed procedure to establish a human orthotopic prostate cancer xenograft mouse model.
Introduction
प्रोस्टेट कैंसर संयुक्त राज्य अमेरिका में पुरुषों के बीच कैंसर मौतों (9%) के दूसरे सबसे प्रचलित कारण, अगले फेफड़े और श्वसनी (28%) 1 के कैंसर के लिए है। हाल के आंकड़ों के अनुसार, यह अनुमान है कि 220, 800 नव निदान प्रोस्टेट कैंसर के मामलों और 27, 540 लोगों की मृत्यु 2015 1 में घटित होगा। पंचवर्षीय प्रारंभिक चरण में प्रोस्टेट कैंसर के रिश्तेदार जीवित रहने की दर> 99% है, जबकि उन्नत metastatic रोग की है कि केवल 28% 1। उन्नत metastatic रोग के उपचार के लिए एक बड़ी चुनौती इस रोग की प्रवृत्ति अंतर्निहित, अन्य अंगों को metastasize करने के लिए विशेष रूप से हड्डी है, जो प्रोस्टेट कैंसर के लिए एक लगातार साइट है आणविक तंत्र की समझ की कमी है। इसलिए, वहाँ आदेश उन्नत metastatic रोग 2,3 के लिए प्रगति के खिलाफ प्रभावी उपचार परहेजों का विकास करने के लिए इन प्रोस्टेट ट्यूमर की आणविक मेकअप अध्ययन करने के लिए एक स्पष्ट की जरूरत है।
प्रोस्टेट ट्यूमर प्रदर्शनी higप्रगति के लिए एक अच्छी तरह से परिभाषित मार्ग के बिना ज जैविक विविधता। मेटास्टेसिस अक्सर ट्यूमर invasiveness 4 का कोई पूर्व संकेत के साथ होते हैं। यह नैदानिक विविधता प्रोस्टेट कैंसर की आणविक विविधता के लिए जिम्मेदार ठहराया है। इन घातक ट्यूमर के आणविक मेकअप को समझना इस रोग के लिए बेहतर नैदानिक और चिकित्सीय रणनीतियों डिजाइन करने के लिए महत्वपूर्ण है। नतीजतन, प्रोस्टेट कैंसर अनुसंधान वर्तमान समझ और मेटास्टेसिस को रोकने पर ध्यान केंद्रित किया है।
पूर्व नैदानिक इन विवो माउस मॉडल विकल्प उन्नत मेटास्टेटिक रोग से प्रोस्टेट कैंसर की प्रगति के आणविक तंत्र को समझने के लिए की एक किस्म की पेशकश करते हैं। इसके अलावा, इन मॉडलों को इस बीमारी के खिलाफ नए चिकित्सकीय रणनीति के preclinical मूल्यांकन के लिए महत्वपूर्ण हैं। सबसे अधिक इस्तेमाल पशु मॉडल ट्रांसजेनिक माउस मॉडल, पूंछ-नस में इंजेक्शन, इंट्रा-हृदय आरोपण और मानव ओर्थोटोपिक माउस मॉडल शामिल हैं। ट्रांसजेनिक पढ़ाई के समय consumi हैंएनजी और मनुष्यों के साथ कि चूहों में प्रोस्टेट कैंसर के विकास के संबंध परिवर्तनशीलता 11 से पता चला है। सहज मेटास्टेटिक माउस मॉडल में, कोशिकाओं के संचलन में सीधे इंजेक्ट कर रहे हैं और हालांकि, वे तेजी से बदलाव का समय है, वे प्राथमिक ट्यूमर या metastatic झरना 5 में प्रारंभिक कदम का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल नहीं किया जा सकता। Orthotopic जेनोग्राफ्ट मॉडल हड्डी मेटास्टेटिक घावों, प्रोस्टेट कैंसर मेटास्टेसिस के आम साइट के विकास की सीमा है। बहरहाल, मानव ओर्थोटोपिक प्रोस्टेट कैंसर xenograft माउस मॉडल अच्छी तरह से विशेषता है और व्यापक रूप से प्राथमिक ट्यूमर के विकास, ट्यूमर और अंग microenvironment, मेटास्टेटिक रोग और चिकित्सकीय हस्तक्षेप 6 के लिए प्रयोगात्मक दवाओं के उपयोग के प्रारंभिक चरण के बीच परस्पर बात की आणविक घटनाओं का अध्ययन करने के लिए प्रयोग किया जाता है , 7,8-11।
Protocol
Representative Results
Discussion
यह पांडुलिपि एक मानव ओर्थोटोपिक प्रोस्टेट कैंसर xenograft माउस मॉडल की स्थापना के लिए एक विस्तृत प्रक्रिया का वर्णन करता है। यह मॉडल immunocompromised चूहों के पृष्ठीय प्रोस्टेटिक खण्डों में मानव प्रोस्टेट कैंसर को?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
We thank Dr. Roger Erickson for his support and assistance with the preparation of the manuscript. This work was supported by the National Cancer Institute at the National Institutes of Health through grant numbers RO1CA160079, RO1CA138642, UO1CA184966 and VA funded program project number 1P1 BX001604.
Materials
| PC3 prostate cancer cell line | ATCC | CRL-1435 | |
| Minimum Essential Medium (MEM) | GIBCO,Life Technology | 11095-080 | |
| PBS | GIBCO,Life Technology | 10010-023 | |
| FBS | GIBCO,Life Technology | 10437-028 | |
| Zeocin | Invitrogen,Life Technology | R250-01 | |
| Trypsin | GIBCO,Life Technology | 25300-54 | |
| IVIS | Xenogen-Caliper | ||
| Insulin Syringes (300ul, 28.5g) | Becton Dickinson | 309300 | |
| Mice | Charles River Laboratories, Inc | ||
| Alcohol Swabs | MEDEquip Depot | 326895 BD | |
| PVP Iodine Prep Pad | MEDEquip Depot | C12400PDI | |
| Surgical CatGut Chromic Suture | Demetech | CC224017F0P | |
| Matrigel | Corning | 354248 |
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