VACUSIP, une méthode Inex améliorée pour In Situ Mesure des particules et composés dissous transformés par suspensivores actifs

Summary

Nous présentons le VacuSIP, une méthode simple, non intrusive et fiable pour un échantillonnage ponctuel propre et précis de l’eau. Le système a été mis au point et évalué pour la collecte simultanée de l’eau inhalée et expirée par les suspensions benthiques in situ, afin de mesurer proprement l’élimination et l’excrétion des composés particulaires et dissous.

Abstract

Les benthiques en suspension jouent un rôle essentiel dans le fonctionnement des écosystèmes marins. En filtrant de grands volumes d’eau, en éliminant le plancton et les détritus et en excrétant des composés particulaires et dissous, ils constituent des agents importants pour le couplage benthique-pélagique. La mesure précise des composés éliminés et excrétés par les substances en suspension (comme les éponges, les ascidies, les polychètes, les bivalves) est cruciale pour l’étude de leur physiologie, de leur métabolisme et de l’écologie de l’alimentation, et est fondamentale pour déterminer la pertinence écologique des flux de nutriments médiés par ces organismes. Cependant, l’évaluation de la vitesse à laquelle les aliments en suspension traitent les particules et les composés dissous dans la nature est limitée par les limites des méthodologies actuellement disponibles. Notre objectif était de mettre au point une méthode simple, fiable et non intrusive qui permettrait d’échantillonner in situ l’eau propre et contrôlée à partir d’un point précis, comme l’ouverture excurrent des suspensions benthiques. Notre méthode permet l’échantillonnage simultané de l’eau inhalée et expirée de l’organisme étudié à l’aide de minuscules tubes installés sur un manipulateur sur mesure et soigneusement positionnés à l’intérieur de l’orifice exhalant de l’organisme échantillonné. Le fait de percer un septum sur le récipient collecteur à l’aide d’une aiguille de seringue fixée à l’extrémité distale de chaque tube permet à la pression externe de forcer lentement l’eau échantillonnée dans le récipient à travers le tube d’échantillonnage. Le taux d’échantillonnage lent et contrôlé permet d’intégrer l’instabilité inhérente à l’eau tout en assurant un échantillonnage sans contamination. Nous fournissons des recommandations sur les dispositifs de filtration, le récipient de collecte et les procédures de stockage les plus appropriés pour l’analyse des différents composés particulaires et dissous. Le système VacuSIP offre une méthode fiable pour la quantification du métabolisme non perturbé des mangeurs en suspension dans des conditions naturelles, peu coûteuse et facile à apprendre et à appliquer pour évaluer la physiologie et le rôle fonctionnel des filtreurs dans différents écosystèmes.

Introduction

Suspensivores benthiques jouent un rôle essentiel dans le fonctionnement des écosystèmes marins ^1. En filtrant grands volumes d'eau ^2,3, ils enlèvent et excrètent particules (plancton et détritus) et des composés dissous ¹ (et les références qui y sont) et sont un important agent de benthique-pélagique couplage ^4,5 et cycle des éléments nutritifs ^6,7. La mesure précise les particules et les composés dissous enlevés et excrétés par suspensivores benthiques (tels que les éponges, les ascidies, les polychètes et bivalves) est fondamentale pour comprendre leur physiologie, le métabolisme et l'écologie aliment....

Protocol

1. Etapes préparatoires et de nettoyage Procédures

1. Solution de nettoyage
   1. Porter un équipement de protection, une blouse de laboratoire, et des gants en tout temps. Effectuer ces étapes préparatoires dans un espace propre exempt de poussière et de fumée.
   2. Préparer une solution chlorhydrique 5-10% d'acide (HCl) avec des produits frais, de haute qualité, de l'eau distillée deux fois.
   3. Préparer un mélange de 5% de base très soluble de la solution de tensioactif anionique et non-ionique (Voir liste des matières) avec des produits frais, de haute qualité, de l'eau distillée deux fois.
   4. Stockez toutes le....

Results

Optimisation des méthodes de collecte d'eau de mer

Sélection des flacons de collection et de la procédure de nettoyage

récipients collecteurs VACUSIP compatibles doivent avoir une cloison qui permet un échantillonnage à être engagée par perçage par une aiguille de seringue. Ils doivent résister à l.......

Discussion

Les étapes préparatoires

Flacons de collection pour DOM et à l' analyse des éléments nutritifs

Comme les navires collecteurs peuvent interagir avec des micro-constituants dissous et les parois de l' échantillonneur peut être un substrat pour la croissance des bactéries ^30-34, différents flacons pour DOM et la collecte des éléments nutritifs ont été te.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
GorillaPod, Original	Joby	GP000001	trépied portable flexible.
Virole sans bride	IDEX Health & Science  ;	P-200X	1/16" en Bleu/pqt
Écrou Mâle	IDEX Santé & Sciences	P-205X  ;	1/16" en vert/10  ; pk
Femme à Femme Luer	IDEX Santé & Science  ;	P-658
Femme-Homme Luer	IDEX Santé & Science  ;	P-655
Tube Peek (254  ; et micro ; m ID)	IDEX Santé & Science  ;	1531	1/16" OD x 0,01  ; en ID x 5  ; longueur en pieds. Un autre identifiant peut être utilisé.
Résine époxy bi-composant	IVEGOR	9257	Bien mélanger la résine bi-composant avant utilisation
(TOC) Fioles EPA Cole-Parmer		03756-20	Flacons en verre de 40 ml. Fabriqué également par Thomas Scientific (n° de réf. 9711F09).
Flacons en PEHD	Wheaton	986701 (E78620)	20 ml flacons en polyéthylène haute densité
Vacuette Z sans additif	Greiner bio-one	455001	pré-vide par le fabricant  ;
Septum Échantillons	Flacons Thomas Scientific	1755C01	250 ml flacons en verre  ;
Septum Cap 1	Wheaton	W240844SP (E7865R)	22-400 pour flacons en PEHD.
Septum Cap 2	Wheaton	W240846 (1078-5553)	24-400 pour flacons et bouteilles en verre. Également fabriqué par Thermo Scientific National (réf. 03-377-42).
Porte-filtres Swinney en ligne en acier inoxydable	Pall	516-9067	13 mm de diamètre
Rondelle d’étanchéité en PTFE	Pall  ;	516-8064	anneau pour porte-filtres en acier inoxydable
TCLP Filtres en verre	Pall  ;	516-9126	Filtres en fibre de verre sans liant, 13 mm de diamètre, taille des pores 0,7  ; et micro ; m
Porte-filtres en polycarbonate	Cole -Parmer	17295	13 mm de diamètre
Filtres à membrane isopore	Millipore	GTTP01300	13  ; mm de diamètre, taille des pores 0,2  ; et micro ; m
Contrad 70 Solution  ;	Decon Labs	1002	mélange basique hautement soluble de solution tensioactive anionique et non ionique.
Filtres pour seringues stériles	VWR International Eurolab S.L.	514-0061P	25  ; mm de diamètre, taille des pores 0,2  ; et micro ; m
Fluorescéine	Sigma-Aldrich	(ancienne réf.28802) 46955-100G	100  ; g
Holdex, jetable, stérile	Greiner bio-one	450263	porte-tube stérile à usage unique avec luer décentré pour
aiguilles stériles	IcoGammaPlus	5160	0.7  ; mm x 30  ; mm
Cryoflacons Nalgene	Nalgene	V5007(Cat. N°5000-0020)	2  ; ml
Cryobox carton  ;	Rubilabor	M-600	145x145x55  ; mm p/microtube 1,5  ; ml
Acide orthophosphorique	Sigma	79617 ou Acide chlorhydrique ultra-pur, concertation finale 0,1 %
Paraformaldéhyde	Sigma	P6148	500  ; g
Glutaraldéhyde	Merck	8,206,031,000	25 %, 1 L
Pompe à vide à main  ;	Bü ; rkle  ;	5620-2181 ou utilisez également une pompe