This protocol induces acute lung injury in a mouse that has close fidelity to the pathogenesis of acid pneumonitis observed in humans. We generate a maximal acute nonlethal low pH lung injury and account for differences in rodent-human anatomic respiratory structure using an open tracheostomy coupled with circumferential pressure release.
Кислота пневмонит является основной причиной стерильного острого повреждения легких (ALI) в организме человека. Кислота пневмонит охватывает клинический спектр от бессимптомных до острого респираторного дистресс-синдрома (ОРДС), характеризуется нейтрофильным альвеолит, и причинение вреда как альвеолярного эпителия и эндотелия сосудов. Клинически, РДСВ определяется острым началом гипоксемии, двусторонние неоднородными легочные инфильтраты и не-кардиогенного отека легких. Человеческие исследования предоставили нам ценную информацию о физиологических и воспалительных изменений в легких, вызванных РДСВ, что привело к различным гипотезам о механизмах, лежащих в основе. К сожалению, трудности, определяющие этиологию РДСВ, а также широкий спектр патофизиологии, привели к отсутствию критической информации, которая может оказаться полезной при разработке терапевтических стратегий.
Трансляционные модели на животных являются ценными, когда их патогенеза и патофизиологии точно reproducеа концепция доказана как в пробирке и клинических условиях. Хотя больших животных моделях (например, овцы) доля характеристики анатомии человека трахеи-бронхиального дерева, мышиные модели обеспечивают множество других преимуществ , в том числе: низкая стоимость; короткий кредитование репродуктивный цикл себя более сбора данных; хорошо понимать иммунологическая система; и хорошо охарактеризован геном что привело к появлению разнообразных делеции генов и трансгенных линий. Надежная модель низких рН РДСВ индуцированного требует мышиного ALI, что цели в основном альвеолярный эпителий, во вторую очередь эндотелия сосудов, а также малые дыхательные пути, ведущие к альвеол. Кроме того, воспроизводимые травмы с широкими различиями между различными вредными и безвредных оскорбления важно.
Мышиный аспирация модель желудочной кислоты, представленные здесь с помощью соляной кислоты используют открытую трахеотомию и воссоздает патогенную сценарий, который воспроизводит низкий рН pneumonИТИС травмы у людей. Кроме того, эта модель может быть использована для изучения взаимодействия низкого рН инсульта с другими легочными вредными объектами (например, частицы пищи, патогенные бактерии).
ОРДС характеризуется широко распространенным воспалением легких и клинически рассматривается как острая одышка с гипоксией. Эти симптомы часто происходят менее чем через 24 ч после провоцирующего события, такие как травма, сепсис, реакций, связанных с переливания крови или аспирации. Она характеризуется гистологически по нейтрофильного альвеолита (т.е. широко распространенное воспаление) , локализуется альвеолярного эпителия и сосудистого эндотелия , приводящей к утечке белка и образованию впоследствии гиалиновых мембран. Стремления классифицируется как химический пневмонит или аспирационной пневмонии. 1 Кислотный компонент аспирации желудочного способствует как пневмонит и пристрастием к разработке вторичной бактериальной пневмонии. Аспирационная пневмония является одним из ведущих факторов риска развития ОПЛ и последующего развития ОРДС. 2
Желудочный аспирация острое событие определяется как ингаляции материалов из тон переваривает с или без ротоглотки флоры в дыхательные пути за пределы голосовых связок. Содержание аспирата может содержать низкую жидкость рН желудка, бактерии, кровь, или частицы пищи. Желудочный стремление часто возникает у пациентов в отделении интенсивной терапии (ОИТ), которых обычно находятся в состоянии голодания и, таким образом, помещают на ингибитор протонного насоса, чтобы ограничить стремление подкисленной желудочного содержимого. Заболеваемость ALI в популяции ОРИТ в США составляет 2,5 – 5 раз выше по сравнению с общей популяции пациентов. 3 К сожалению, эти предрасполагающие условия часто приводят к состоянию избыточного бактериального роста в желудке , что может привести к более тяжелым последствиям в легком следующем событии аспирации, как желудочная аспирация является независимым фактором риска для развития вторичной бактериальной пневмонии (СБП) , ALI и ОРДС.
Желудочный стремление имеет два основных компонента: соляной кислоты и желудочного содержимого, которые могут содержать или не содержать бактерииили продукты питания в виде частиц. В модели с грызунами в одиночку желудочного аспирации кислотный компонент производит первоначальную воспалительную реакцию в результате прямого едкого травмы низкого рН на эпителии дыхательных путей. Это сопровождается нейтрофильным инфильтрации и воспалительной реакции на 4 – 6 ч. 4 Эти два фактора , в конечном счете привести к разрушению целостности легочной микрососудистой что приводит к транссудации жидкости и белков в альвеолы и дыхательные пути. Чтобы понять это патофизиологии и для дальнейшего изучения возможных терапевтических вмешательств, важно разработать и охарактеризовать модель животных, которая проясняет основные механизмы, вовлеченные. в одиночку кислая аспирата должна быть объемными или с достаточно низким рН, чтобы обойти буферную емкость дыхательного дерева и достигают альвеол. Если этого не происходит, только переходная верхняя, проведение травмы дыхательных путей происходит что менее вероятно, приведет к тяжелым последствиям РДСВ. 5 </ SUP>
Для того, чтобы точно с травмированной альвеолярного эпителия эмулировать событие аспирации, важно, чтобы обойти естественную защиту животного. Использование модели мыши аспирации, чтобы произвести ALI, который имитирует травму желудочной кислоты, наблюдаемых у людей, необходимо учитывать различия в трахее-бронхиального дерева. Открытая технология трахеостомические, которая использует этот метод обходит различия между мышиными и респираторные деревьев человека и модели травмы в манере, воспроизводящей ALI как физиологически, так и гистологически. Исторически сложилось так, трахею интубации был использован для генерации ALI, однако считается, трудно выполнить в мышах без ларингеальной травмы. Таким образом, этот метод предлагает потенциальную альтернативу, которая дала последовательные результаты по нескольким исследователям и с минимальными процедуры приписываемой смертности.
Цель состояла в том, чтобы разработать модель ALI животных с помощью аспирации кислоты желудочного сока, что близко напоминает патофизиологии, что происходит в организме человека при развитии кислотного пневмонит и последующих РДСВ. При разработке модели мы выбрали виды животных , к…
The authors have nothing to disclose.
Ravi Alluri and Hilliard L. Kutscher are supported by Ruth L. Kirschstein National Research Service Award (NRSA) Institutional Research Training Grant 1T32GM099607.
syringe, 1cc | Becton Dickinson | 309628 | |
syringe, 5cc | Becton Dickinson | 309646 | |
needle, 22 ga x 1 1/2" | Becton Dickinson | 305159 | |
needle, 26 ga x 1 1/2" | Becton Dickinson | 305111 | |
1-O Braided Silk Suture | Harvard Apparatus | 517730 | |
3" Curved tissue serrated forceps | Fine Science Tools | 11065-07 | |
3" Curved tissue "toothed" forceps, 1×2 teeth | Fine Science Tools | 11067-07 | |
4" curved micro dissecting scissors | Fine Science Tools | 14061-10 | |
bone cutting spring scissors | Fine Science Tools | 16144-13 | |
3 1/2" curved locking hemostat | Fine Science Tools | 13021-12 | |
Disposable Skin Stapler | 3M | DS-25 | |
tracheal cannula (20 ga x 1/2" stainless steal tubing adapter) | Becton Dickinson | 408210 | |
60-degree Incline Dissection Board | |||
0.5% Bupivacaine | |||
Isoflurane | |||
Betadine and "Q-tip" cotton applicator |