Vi præsenterer en orthotopic aorta transplantation model ved hjælp af ærmet teknik i mus. Det er en meget hurtig anastomose metode, som kan være ansat i undersøgelser af vaskulær sygdom.
Orthotopic aorta transplantation ved hjælp af ærmet teknik reducerer skade på aorta med fejlrate på kun 10-20%. Tid til anastomose aorta i mus ved hjælp af metoden ærme var kort og let i gennemsnit 20 min, tillader undersøgelser af iso/allo grafts. Følgende artikel beskriver aorta transplantation procedure anvendes i vores laboratorium. Musene blev bedøvede med en blanding af 1,5% volumen isofluran og 100% ilt gennem en ansigtsmaske. På dette tidspunkt, segmentet af aorta mellem nyrearterier og sin bifurkation var adskilt fra vena cava, frit forberedt og clampedat de proksimale og distale segmenter med en enkelt silke sutur. Før fjernelse af aorta, var en saltopløsning, som indeholder heparin injiceres i den ringere vena cava. Derefter aorta blev skåret mellem klemmerne og en saltvand heparin løsning blev brugt til at skylle lumen. Ærme teknik med monofilamenter suturer blev brugt for at omplante den abdominale aorta i orthotopic position.
Som påpeget i en tidligere undersøgelse, har fået stor opmærksomhed til murine aorta transplantation modeller, som giver mulighed for forskelsbehandling mellem bestemt vaskulære svar forårsaget af graften selv og visse systemiske faktorer forbundet med en arteriogenic miljø 1 , 2 , 3. den vigtigste faktor, der spiller en afgørende rolle her er tilgængeligheden af knockout og Transgene mus. Deres inddragelse i denne model giver mulighed for at identificere og fastlægge nye patofysiologiske veje forbundet med udviklingen af degenerative Vaskulære sygdomme, såsom åreforkalkning og aneurisme dannelse4, 5.
Det er værd at bemærke, at i løbet af podning en iboende iskæmi/reperfusion muligvis skade for de fartøjer, der er beregnet til transplantation. Forekomsten af bestemte problemer med transplantat integritet eller en uventet betændelsesreaktion i den postoperative periode kan derfor udelukkes muligvis udelukke patofysiologiske forandringer i degenerative Vaskulære sygdomme3 ,4,5,6,7. Ærme anastomose er den alternative metode, i slut for arterielle anastomose med fartøjer med en diameter på mindre end en millimeter og har været anvendt med succes i nyre og hjerte transplantation i rotter, som senere blev tilpasset til aorta transplantation i mus af Dambrin et al. 8 , 9 , 10 , 11.
Aorta skade ved hjælp af ærmet transplantation teknik minimeres med en meget lav tekniske fejlrate på grund af det varede kun 20 minutter i gennemsnit. Vores tidligere resultater har vist gode funktionelle og strukturelle egenskaber af en isograft i vivo efter transplantation bruger ærme teknik1. Dambrin et al. beskriver, efter en kort indlæringskurve succesraten var over 78%10. Komplikationer som blodpropper er sjældne, for eksempel Engelbrecht et al. ikke overholdt trombose ved hjælp af ærmet teknik i renal transplantation i rotte8.
Murine aorta transplantation modellen med ærme anastomoser er en hurtig og let værktøj til at studere iso/allograft reaktioner i den transplanterede fartøj. Denne video illustrerer den aorta transplantation procedure udført i vores laboratorium. Denne transplantation model kan være nyttige i at definere de underliggende patologiske mekanismer af degenerative karsygdom og kan bidrage til yderligere vurdering af molekylære og farmakologiske interventioner12.
Forud for denne undersøgelse var forskellige andre transplantation modeller i mus grundigt analyseret3,6,7,10,13,14. Model af aorta transplantation ved hjælp af ærmet teknik med ændringer af Dambrin et al. blev valgt som det matchede vores kriterier og viste en høj pålidelighed af ærmet anastomose i forhold til konventionelle ende til sutur metoder 1 , 10.
Denne teknik er gunstig på mange måder med cross-klemme tid betydeligt reduceret minimere skaderne på aorta under kirurgi. En lav forekomst af blodpropper blev observeret ud over at undgå potentielle uoverensstemmelse i fartøjet kaliber mellem donor og modtager. Ovenstående bemærkninger gør denne teknik særdeles velegnet til at undersøge karsygdom i aorta transplantationer i mus.
I en opfølgende undersøgelse, som var en ultralyd udført 8 uger efter transplantation, blev ikke fundet nogen væsentlige ændringer. Dette bekræftede antagelser at enhver skade på aorta under operation ville være minimal1.
Podning procedure præsenteret i denne artikel sikrer ingen forringelse både i graft integritet og dens funktion. Det kan derfor konkluderes, at denne eksperimentelle transplantation model kan tjene som et værdifuldt redskab for fremtidige molekylære og farmakologiske undersøgelser af degenerative fartøj sygdom i gensplejsede mus.
Vi tror at den video guide kan fungere som undervisningsmateriale illustrerer brugen af denne enkle arterio-arteriel model og at det vil bidrage til yderligere frugtbar debat om mange vigtige spørgsmål i Vaskulære sygdomme. Denne meget hurtige anastomose metode kan bruges til at studere karsygdom i gensplejsede mus. Det kan også bruges som en ændring i aneurisme model kombineret med transplantation.
Der er kritiske punkter under proceduren. Markedsføring af sutur, selv er den mest kritiske trin. Kirurgen har til at sørge for at undgå enhver torsion af aorta ved korrekt justering af donor og recipient. Klemmerne er omhyggeligt fjernet efter inspektion af anastomose. Den distale klemme skal altid frigives først resulterer i lavt tryk holder vægge sammen inden den proksimale højtryks side udsætningen. Konsekvensen af ikke ordentligt efter rækkefølgen af frigivelse ville være blødning.
The authors have nothing to disclose.
Vi vil gerne takke Roma Wieczorek og Peter Kurdybacha for deres fremragende redigering hjælp, og Leon Decker og Uli Heuter for deres fremragende teknisk bistand.
Halsey Needle Holder | Fine Science Tools | 12001-13 | |
Dumont #5-45 Forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | |
Dumont #5 Forceps – | Fine Science Tools | 11254-20 | |
Lexer-Baby Scissors | Fine Science Tools | 14079-10 | |
Castroviejo Micro Needle Holder | Fine Science Tools | 12060-01 | |
Vannas Scissors | Aesculap, Germany | Typ OC498R | |
Castroviejo Suture Forceps | Geuder, Germany | 19015 | |
6-0 silk black (Silk) | Deknatel, Research Triangle Park NC, USA | 18020-60- FST | |
11-0 monofilament (Ethilon) | Ethicon, Norderstedt, Germany | EH7438G | |
3-0 polyglycolic acid suture (Serafit) | Serag-Wiessner, Naila, Germany | 60203214 | |
Isofluorane | Any genericon | ||
Heparin | Any genericon | ||
0.9% saline | Any genericon | ||
Buprenorphine | Any genericon | ||
Bepanthene eye and nose cream | Bayer, Germany | ||
Microscop | Zeiss | Opmi MDO/S5 | |
Vaporiser | Eickemeyer | TEC3 | |
Ultrasound | Vevo, Canada | 770,2100 |