3 डी पूरे दिल मायोकार्डियल ऊतक विश्लेषण
Summary
यह प्रोटोकॉल एमआरआई के साथ पूरे दिल दौरे ऊतक के 3 डी तुलना के लिए एक उपन्यास विधि का वर्णन है। यह रोधगलन की एक पुरानी सुअर मॉडल की रोधगलितांश सीमा क्षेत्र में intramyocardial इंजेक्शन के सटीक आकलन के लिए बनाया गया है।
Abstract
कार्डिएक पुनर्योजी चिकित्सा के रक्षा के लिए और इस्कीमिक हृदय रोग के साथ रोगियों में घायल दिल की मरम्मत के लिए करना है। स्टेम सेल या अन्य जैव कि रोधगलितांश सीमा क्षेत्र (IBZ) में angio- या vasculogenesis बढ़ाने इंजेक्शन लगाने के द्वारा, ऊतक छिड़काव सुधार हुआ है, और मायोकार्डियम आगे नुकसान से बचाया जा सकता है। अधिकतम उपचारात्मक प्रभाव के लिए, यह धारणा है कि पुनर्योजी पदार्थ सबसे अच्छा IBZ के लिए दिया जाता है। यह सही इंजेक्शन की आवश्यकता है और नया इंजेक्शन तकनीक के विकास के लिए प्रेरित किया। इन नई तकनीकों को मान्य करने के लिए, हम दौरे ऊतक विश्लेषण के आधार पर एक सत्यापन प्रोटोकॉल तैयार की है। यह प्रोटोकॉल पूरे दिल दौरे ऊतक प्रसंस्करण कि विस्तृत दो आयामी (2 डी) और तीन आयामी (3 डी) हृदय शरीर रचना विज्ञान और intramyocardial इंजेक्शन के विश्लेषण में सक्षम बनाता है शामिल हैं। एक सुअर में, रोधगलन बाईं पूर्वकाल कोरोनरी धमनी अवरोही की एक 90 मिनट रोड़ा द्वारा बनाया गया था। चार सप्ताह के बाद, एक mixtsuperparamagnetic लोहे के आक्साइड कणों (SPIOs) और फ्लोरोसेंट मोतियों के साथ एक हाइड्रोजेल की ure एक न्यूनतम इनवेसिव endocardial दृष्टिकोण का उपयोग कर IBZ में इंजेक्ट किया गया था। 1 घंटे इंजेक्शन प्रक्रिया के बाद, सुअर euthanized किया गया था, और दिल अलग किया गया और agarose में एम्बेडेड (अगर)। अगर के solidification के बाद, चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई), दिल की टुकड़ा करने की क्रिया, और प्रतिदीप्ति इमेजिंग प्रदर्शन किया गया। छवि पोस्ट प्रसंस्करण के बाद, 3 डी विश्लेषण IBZ को लक्षित सटीकता का आकलन करने के लिए किया गया था। यह प्रोटोकॉल IBZ में intramyocardial इंजेक्शन के लक्षित कर सटीकता के आकलन के लिए एक संरचित और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य तरीका प्रदान करता है। प्रोटोकॉल आसानी से इस्तेमाल किया जा सकता है जब निशान ऊतक और / या पूरे दिल के इंजेक्शन सटीकता के सत्यापन के प्रसंस्करण वांछित है।
Introduction
इस्कीमिक हृदय रोग पिछले दशकों 1 के लिए दुनिया की मौत का प्रमुख कारण रहा है। रोधगलन के बाद तीव्र उपचार percutaneous कोरोनरी हस्तक्षेप या कोरोनरी धमनी बाईपास ग्राफ्टिंग के माध्यम से मायोकार्डियम में रक्त के प्रवाह को बहाल करना है। गंभीर रोधगलन में, मायोकार्डियम के एक बड़े क्षेत्र आहत है, और इन मामलों अक्सर इस्कीमिक हृदय विफलता (HF) 2 में परिणाम। रोकथाम पर एचएफ फोकस और HF रोगियों के लिए हृदय समारोह के संरक्षण के लिए वर्तमान उपचार के विकल्प, लेकिन उत्थान पर नहीं।
पिछले दशक में, हृदय पुनर्योजी चिकित्सा के एचएफ 3 के लिए एक इलाज के विकल्प के रूप में जांच की गई। यह चिकित्सा revascularization, cardiomyocyte संरक्षण, भेदभाव प्रेरित करने के लिए सीधे रूप से घायल हो मायोकार्डियम के लिए, इस तरह के स्टेम सेल या वृद्धि कारकों के रूप में जैव, वितरित करने के लिए करना है, और विकास 4। इष्टतम के लिएउपचारात्मक प्रभाव, यह धारणा है कि जैविक जैविक के अस्तित्व के लिए और लक्ष्य क्षेत्र 5, 6 के लिए इष्टतम प्रभाव के लिए अच्छा ऊतक छिड़काव की सुविधा के लिए रोधगलितांश सीमा क्षेत्र (IBZ) में इंजेक्ट किया जाना चाहिए। कई तकनीकों intramyocardial इंजेक्शन 7, 8, 9, 10, 11 मार्गदर्शन करने के पहचान और IBZ के दृश्य प्रदर्शन करने के लिए विकसित किया गया है। पहचान और IBZ के दृश्य इसके अलावा, वितरण भी biomaterials और इंजेक्शन कैथेटर का इस्तेमाल किया पर निर्भर करता है। वितरण तकनीकों का इंजेक्शन सटीकता को सत्यापित करने के लिए, एक सटीक और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य मात्रा विधि की आवश्यकता है।
हम पूरे दिल दौरे ऊतक प्रसंस्करण कि दो आयामी (2 डी) प्रदान करता है और तीन dimensio के लिए एक प्रोटोकॉल विकसित किया हैएनएएल (3 डी) इमेजिंग, जो गुणात्मक और मात्रात्मक अध्ययन के लिए इस्तेमाल किया जा सकता करना है। प्रोटोकॉल एम्बेडिंग प्रक्रिया और डिजिटल छवि विश्लेषण शामिल हैं। इस पत्र में, हम पुरानी रोधगलन की एक बड़ी सुअर मॉडल में IBZ में intramyocardial इंजेक्शन के लक्षित कर सटीकता के आकलन के लिए एक प्रोटोकॉल का प्रदर्शन।
Protocol
Representative Results
Discussion
पूरे दिल 3 डी दौरे ऊतक प्रसंस्करण इस प्रोटोकॉल के अनुसार एक संरचित विधि है कि रोधगलितांश, IBZ, और हृदय शरीर रचना विज्ञान के संबंध में प्रदर्शन किया इंजेक्शन के 3 डी विश्लेषण में सक्षम बनाता है प्रदान करता ?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखकों पशु प्रयोगों के साथ उनकी सहायता के लिए मर्लिजन जैनसन, जोयेस विसेर, और मार्टिन वैन Nieuwburg धन्यवाद देना चाहते हैं। हम बहुत एमआरआई इमेजिंग के साथ उनकी सहायता के लिए मार्टिन Froeling और एंके वासिंक स्वीकार करते हैं।
Materials
| 0.9% Saline | Braun | ||
| Agarose | Roche Diagnostics | Scientific grade multipurpose agar | |
| Biomolecular fluorescence scanner Typhoon 9410 | GE Healthcare | ||
| Embedding container | Plastic, dimensions 17 x 14,5 x 14 cm | ||
| FluoSpheres Polystyrene Microspheres | Invitrogen | F8834 | red, 10 µm |
| Gadolinium | Gadovist | 1,0 mmol/mL | |
| dS 32 channel head coil | Philips | Or similar | |
| Matlab | Mathworks | To insure compatability 2015a or newer | |
| Meat slicer | Berkel | ||
| Myostar injection catheter | Biosense Webster | ||
| Super paramagnetic iron oxide particles | Sinerem | ||
| Triphenyl-tetrazolium chloride | Merck | ||
| UPy-PEG10k | |||
| Vicryl 2-0 | Ethicon |
References
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