Dextrane augmente l’efficacité de la Transduction des gènes des cellules NK primaires murines et humaines

Arash Nanbakhsh; Brad Best; Matthew Riese; Sridhar Rao; Li Wang; Jeffrey Medin; Monica S. Thakar; Subramaniam Malarkannan

doi:10.3791/55063

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Article de méthode

Dextrane augmente l’efficacité de la Transduction des gènes des cellules NK primaires murines et humaines

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DOI :

10.3791/55063

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15 janvier 2018

Arash Nanbakhsh¹ , Brad Best² , Matthew Riese³ , Sridhar Rao⁴ , Li Wang⁵ , Jeffrey Medin⁶ , Monica S. Thakar⁶ , Subramaniam Malarkannan¹^,⁵^,⁶^,⁷

¹Laboratory of Molecular Immunology and Immunotherapy, Blood Research Institute, The Blood Center of Wisconsin, ²Vector Core Lab, Blood Research Institute, The Blood Center of Wisconsin, ³Laboratory of Lymphocyte Biology, Blood Research Institute, The Blood Center of Wisconsin, ⁴Laboratory of Stem Cell Transcriptional Regulation, Blood Research Institute, The Blood Center of Wisconsin, ⁵Department of Microbiology and Immunology, The Medical College of Wisconsin, ⁶Department of Pediatrics, The Medical College of Wisconsin, ⁷Department of Medicine, The Medical College of Wisconsin

Dans cet article

Résumé

L’objectif de cette étude était de formuler des technologies permettant la transduction réussie de gène dans les cellules primaires de le natural killer (NK). L’induite par le dextran de transduction des gènes de l’homme ou les résultats de cellules NK primaires de souris à une efficacité accrue les expression de gène. Cette méthode de transduction gène améliorera la manipulation génétique de cellules NK.

Résumé

La transduction efficace de gènes spécifiques dans les cellules tueuses naturelles de (NK) a été un défi majeur. Transductions réussies sont essentielles pour définir le rôle du gène d’intérêt dans le développement, la différenciation et la fonction des cellules NK. Avances récentes relies aux récepteurs d’antigènes chimérique (RAC) en immunothérapie contre le cancer accentuent la nécessité d’une méthode efficace livrer des gènes exogènes aux lymphocytes effecteurs. Les efficacités de transductions génique par l’intermédiaire des gènes humains primaires ou cellules NK souris restent très faibles, qui est un facteur limitatif important. Les avancées récentes à l’aide de polymères cationiques, comme polybrene, montrent une efficacité de transduction amélioration génétique dans les cellules T. Toutefois, ces produits n’a pas à améliorer l’efficacité de la transduction des cellules NK. Ce travail montre que dextran, un polysaccharide de glucane ramifié, améliore considérablement l’efficacité de la transduction de l’homme et les cellules NK primaires de souris. Cette méthodologie de transduction hautement reproductible fournit un outil compétent pour transduction primaire NK les cellules humaines, qui peuvent améliorer considérablement les demandes de livraison de génétique clinique et donc d’immunothérapie des cancers basés sur les cellules NK.

Introduction

Natural killer (NK) cellules sont la population lymphocytaire majeure du système immunitaire inné¹. Les cellules NK fonctionnent comme les défenseurs de la première ligne de la réponse immunitaire hôte contre infections et tumeurs²^,³^,⁴. Les cellules NK jouent également un rôle central dans le développement de la tolérance par le biais de la sécrétion de cytokines puissant et chimiokines⁵. En raison de leur puissante capacité à cibler et éliminer les cellules tumorales, plusieurs essais cliniques sont en cours pour évaluer le dér....