Se describe un método fiable para la inmunolocalización de la epidermis modificada, tanto para los cortes congelados y la parafina que se utiliza muy habitualmente en nuestro laboratorio.
Abstract
En la epidermis, la inmunohistoquímica es un medio eficaz para la localización de proteínas específicas de su compartimiento de expresión relativa, es decir, las capas basales córneo, suprabasal, y el estrato. La localización exacta dentro de la epidermis de una proteína en particular da pistas a su papel funcional dentro de la epidermis. En este capítulo, se describe un método fiable para la inmunolocalización de la epidermis modificada, tanto para los cortes congelados y la parafina que se utiliza muy habitualmente en nuestro laboratorio. Secciones de parafina en general, proporcionar la morfología mucho mejor, por lo tanto, resultados superiores y fotografías, sin embargo, no todos los anticuerpos que el trabajo duro con la fijación y el tratamiento que participan en su elaboración. Por lo tanto, el protocolo para el seccionado congelado también se incluye. En el corte de parafina, dos protocolos de fijación se describen (Bouin y paraformaldehído), la elección del fijador se relaciona directamente con las especificaciones de anticuerpos y puede requerir otro método de fijación.
Protocol
El protocolo de texto completo de este enfoque experimental está disponible en los Protocolos Springer .
Troy, T., Arabzadeh, A., Enikanolaiye, A., Lariviere, N., Turksen, K. Immunohistochemistry on Paraffin Sections of Mouse Epidermis Using Fluorescent Antibodies. J. Vis. Exp. (11), e552, doi:10.3791/552 (2008).