JoVE Journal > Environment
Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Résultats
Discussion
Divulgations
Acknowledgements
Materials
References
Traduction automatique
Environnement

Bygning dobbeltdækker fælder for tidlig påvisning af smaragd aske soegeren

Published: October 04, 2017
doi:
10.3791/55252
,
1Department of Entomology and Department of Forestry,Michigan State University, 2Northern Research Station,USDA Forest Service

Summary

Effektive fælder til at tiltrække og fange smaragd aske soegeren (EAB) er et centralt element i afsløring og forvaltning af denne invasive skadedyr. Dobbeltdækker fælder, placeres i fuld sol i nærheden af aske træer, indarbejde visuel og olfaktoriske stikord og var mere tilbøjelige til at indfange EAB end andre fælde designs i markforsøg.

Abstract

Smaragd aske soegeren (EAB) (Agrilus planipennis Fairmaire), den mest destruktive skov insekt til har invaderet Nordamerika, har dræbt hundredvis af millioner af skov og landskab Ask (Fraxinus spp.) træer. Flere kunstige fælde design til at tiltrække og fange EAB biller er udviklet til at registrere, afgrænse og overvåge skadedyrsangreb. Dobbeltdækker (DD) fælder består af to corrugated plastik prismer, en grøn og en lilla, knyttet til en 3 m høj polyvinylchlorid (PVC) rør understøttes af en t-post. Den grønne prisme øverst i PVC-rør er krogene med cis-3-hexenol, et stof, der er produceret af aske løv. Overflader af begge prismer er belagt med klæbrig insekt lim til at fange voksne EAB biller. Dobbeltdækker fælder skal placeres i nærheden af aske træer men i åbne områder, udsat for solen. Dobbeltdækker fælde konstruktion og placering er præsenteret her, samt et resumé af markforsøg demonstrere effekten af DD fælder til at fange EAB biller. I en nylig undersøgelse i websteder med relativt lav EAB tætheder erobrede dobbeltdækker fælder betydeligt mere EAB end grøn eller lilla prisme fælder eller grøn tragt fælder, som alle er designet til at blive suspenderet fra en gren i baldakinen af aske træer. En større procentdel af dobbeltdækker fælder var positive, dvs., erobrede mindst én EAB, end de prisme fælder eller tragt fælder, der blev hængt i aske træ baldakiner.

Introduction

Smaragd aske soegeren (EAB) (Agrilus planipennis Fairmaire) (Coleoptera: Buprestidae) har dræbt hundredvis af millioner af Ask (Fraxinus spp.) træer, da det blev først identificeret i 2002 i større metropolitan Detroit, Michigan-området og i nærliggende Windsor i Ontario, Canada. Utilsigtet spredning af angrebne aske træer, logs og brænde, sammen med naturlige spredning af biller, har resulteret i EAB virksomhed i mindst 27 stater og to canadiske provinser til dato1. De seneste rapporter tyder på, at EAB har også invaderet Moskva, Rusland, hvor det dræber landskab aske træer2,3, generere yderligere bekymring potentiale spredes i Europa. Artskrydsede variation i EAB vært præference og modstand blandt nordamerikanske aske arter har været dokumenteret4,5,6,7,8,9, men næsten alle aske arter i Nordamerika er tilbøjelige til at være egnet værter. Katastrofale niveauer af aske dødelighed er blevet registreret i områder af Michigan og Ohio10,11,12, med tilhørende økologiske og økonomiske virkninger13,14, 15,16.

Effektive metoder til at opdage nye EAB skadedyrsangreb og overvåge lavdensitet befolkninger er vigtige aspekter af forvaltningen af denne invasive skadedyr i byområder, boligområder og skovklædte indstillinger. Tidlig påvisning giver tid til at udvikle en strategi, skaffe finansiering og gennemføre aktiviteter for at mindske virkningerne af EAB. For eksempel, kan kommunale tjenestemænd og boligejere begynde at behandle værdifulde aske i landskaber med systemiske insekticider før skader forårsaget ved at øge larve tætheder grænser effekten af disse produkter17,18. På samme måde, identifikation af et nyt angreb og pålidelige oplysninger om lokale EAB distribution giver skovbrugere og ejere af fast ejendom mulighed for at gennemføre tømmer salg, arter konvertering eller andre aktiviteter til at reducere økonomiske omkostninger eller økologiske virkningerne af aske dødelighed.

Tidlig påvisning, afgrænsning og effektiv overvågning af low-density EAB populationer, dog stadig vanskelige. Visuelle undersøgelser at identificere nyligt inficerede aske træer er ikke pålidelige, fordi aske sjældent udviser ydre tegn eller symptomer på EAB angreb, indtil larve tætheder bygge til moderat eller endog højt niveau4,19. Det mest effektive middel til afsløre meget lav tætheder af EAB inddrage ved hjælp af girdled aske påvisning træer19,20,21,22. Aske træer er girdled i foråret eller forsommeren ved at fjerne et band af ydre bark og phloem omkring omkredsen af stammen, som understreger træer, øge deres tiltrækning til voksen EAB biller. Girdled træer kan være debarked i efteråret eller vinteren til at identificere EAB larve tilstedeværelse og tæthed. Selvom girdled aske træer er blevet brugt operationelt for EAB påvisning19,23,24,25, er de problematisk. Afbarkning girdled træer kan være arbejdsintensive og finde egnede træer til girdling kan være svært, især i byområder og beboelsesområder, eller når undersøgelser skal være gennemført for flere år19.

Kunstige fælder krogene med EAB attraktanter fjerne mange bekymringer forbundet med brugen af girdled aske påvisning træer. I modsætning til andre vigtige skov skadedyr såsom sigøjner møl (Lymantria dispar L) og nogle Scolytinae bark biller, der producerer langdistance sex eller sammenlægning feromoner, til dato, ingen effektiv er langdistance feromoner fundet til EAB. En kortrækkende sex pheromone, cis-lacton, kan lette parring26,27, men i feltforsøg, cis-lacton lokker ikke konsekvent øget EAB tiltrækning til kunstige fælder28. Voksne biller stole på flygtige forbindelser udsendes af aske blade, bark og træ til at identificere deres vært træer29,30,31 og støder på potentielle hjælpere. Flere flygtige forbindelser er blevet evalueret til brug i lokker at tiltrække voksen EABs til kunstige fælder27,32. I øjeblikket, fælder, der anvendes operationelt for EAB påvisning undersøgelser i USA er krogene med agn indeholdende cis-3-hexenol, en fælles grønne blad flygtige produceret af aske blade30,33. I de foregående år, har også været madding EAB fælder bruges til amerikanske undersøgelser med Manuka olie, som udvindes fra New Zealand te træ (Leptospermum scoparium Forst og Forst) eller Phoebe olie, et uddrag af brasiliansk valnøddetræ (Phoebe porosa Mez.); begge indeholder flere sesquiterpener, der er også til stede i aske bark29. Problemer med uoverensstemmende forsyninger af disse naturlige olier, har dog begrænset deres anvendelse.

Ud over host-producerede flygtige reagere voksen EAB biller på visuelle stimuli, herunder farve og lys20,32,34,35. Tidlige studier viste EAB voksne, som er relativt adræt løbesedler, var sjældent fanget af sort tragt fælder krogene med forskellige aske flygtige stoffer (DGM og TMP, upublicerede data). Andre fælde designs, såsom cross-vane fælder, blev evalueret, men aversion af EAB biller til mørke rum og skygger begrænset effektiviteten af disse fælder.

Udvikling af en tre-sidet prisme, som kan belægges med rydde insect fældefangst lim35 for at fange biller, var en betydelig forbedring i trap design. Tiltrækning af voksne EABs farve er også evalueret grundigt, i feltforsøg og i laboratorieforsøg med en retinograph34. Resultaterne viser EAB biller er konsekvent tiltrukket af specifikke nuancer af grøn og lilla32,36. Prisme fælder fremstillet af farvet corrugated plastik er nu udbredt i EAB undersøgelse aktiviteter i USA og Canada.

Fordi EAB voksne er stærkt tiltrukket af lys, er biller meget mere tilbøjelige til at kolonisere open-dyrket træs end skyggefulde træer20,21. Retningslinjer for EAB registrerings syn i USA kræves individuel prisme fælder suspenderes fra midten baldakin gren i en asketræ vokser langs en vej eller kanten af et skovområde37. I teorien, dette bør sikre, at mindst ét panel af prisme er udsat for sollys. Operationelt, kan prisme fælder dog delvist skygget af overhead grene eller af tilstødende eller i nærheden af træer. Sticky panel overflader er ofte blæst ind i blade, hvilket resulterer i blade at overholde og sløring i det mindste en del af en eller flere paneler.

Dobbeltdækker (DD) fælder blev udviklet for at integrere flere visuelle og olfaktoriske stikord for at forbedre tiltrækning af EAB biller. Hver DD fælde består af en grøn og en lilla bølgepap plast prisme knyttet til en 3 m høj tidsplan 40 polyvinylchlorid (PVC) rør (10 cm diameter), der understøttes af glidende PVC-rør over en t-post. Ved hjælp af både grønne og lilla prismer er designet til at tiltrække begge køn EAB biller32,36,38,39. Desuden, i stedet for at blive suspenderet fra en filial i baldakinen med et asketræ, er DD fælder placeret i fuld sol, 5-10 m væk fra ash træer langs kanten af et skovområde eller midt i spredt, open-vokset aske træer.

Protocol

1. forberede grøn og lilla paneler erhverve grøn og lilla corrugated plastik paneler (120 cm x 60 cm) for EAB fældefangst fra en kommerciel distributør af pest management forsyninger. Bruger en kasse kutter eller hobbykniv til at score to fold linjer i hvert panel af delvist skære gennem plast langs de lodrette corrugations, 40 cm fra de to korte kanter af panelet. Dette giver mulighed for panelet for at være foldet ind i en 3-sidet prisme (hvert ansigt bliver 40 x 60 cm). Paneler er normalt scoret af di…

Representative Results

I en stor skala undersøgelse, tre kunstige fælde design såvel som girdled aske træer blev indsat systematisk, 10-20 m fra hinanden, på tværs af en nyligt inficerede 16 ha skovrige område med meget lav befolkningstæthed EAB25. Kunstige fælde design testet inkluderet violette prismer krogene med Manuka olie og suspenderet > 3 m højt fra en gren i baldakinen af aske træer, 3 m høje DD fælder med to grønne paneler, og DD fælder med to lilla paneler u…

Discussion

Både design og placering af DD fælder udnytte tiltrækning af voksen EAB biller til specifikke nuancer af farve og lys. Den grønne prisme på toppen af PVC-rør er mest attraktive for mandlige biller, der tilbringer deres liv span fodring på ash blade samt parring32,36,38,39. Den lavere lilla prisme sikrer fælder er også attraktiv kvinde biller32. Ligesom mænd, kv…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Flere teknikere og studerende ved Michigan State University har bidraget til at udvikle, finpudse og evaluere DD fælde design over årene, herunder Andrea Anulewicz, Robert McDonald og Nathan Siegert. Vi takker James Wieferich og Jeremy Lowell (MSU) for deres bistand udvikle instruktioner for DD installation. James Wieferich og Molly Robinett (MSU) gennemgik en tidligere udkast af dette manuskript, og vi sætter pris på deres forslag. Joseph Francese og Damon Crook (USDA APHIS) delt generøst deres bemærkninger om EAB reaktion på farve og vært flygtige stoffer. Finansiering af DD fælde udvikling og evaluering blev leveret af tilskud fra USDA Forest Service, nordøstlige område, skov sundhedsbeskyttelse.

Materials

Light green corrugated plastic panel: 120 cm x 60 cm Great Lakes IPM; www.greatlakesipm.com IPM-EAB GR All three surfaces of each prism need to be covered with clear insect trapping glue, even if the panels are pre-glued. Pre-glued panels are often not sticky enough to consistently capture or retain EAB beetles.  Other clear insect trapping glue products are available but are considerably more difficult to apply.   
Light purple corrugated plastic panel: 120 cm x 60 cm Great Lakes IPM; www.greatlakesipm.com IPM-EAB  LP
Large cable tie (4): 60 cm with a 79 kg capacity Cabletiesandmore.com; http://www.cabletiesandmore.com/cableties.php CT-24-NU-100PK
Medium cable ties (4): 20 cm with a 22.7 kg capacity Cabletiesandmore.com; http://www.cabletiesandmore.com/cableties.php CT261
Small cable tie: 10 cm with a 8.2 kg capacity Cabletiesandmore.com; http://www.cabletiesandmore.com/cableties.php CT204
cis-3-hexanol pouch Synergy Semiochemicals; http://www.semiochemical.com/html/buprestids.html) 3136 Lures used to bait DD traps consist of pouches containing cis-3-hexenol, a non-toxic compound present in ash leaves.  One pouch is attached to the lower edge of the top prism using a small cable tie.  Each pouch of cis-3-hexenol has a release rate of approximately 50 mg/day. Note that cis-3-hexenol is sometimes written as Z-3-hexenol. 
Aphinity Hexenol Sylvar Technologies
Lure GLV4 emerald ash borer Chemtica, Heredia, Costa Rica
cis-3-hexanol pouch WestGreen Global Technologies; http://www.westgreenglobaltechnologies.com/
Clear insect trapping glue  Hummert International; http://www.hummert.com/product-details/8196/pestick 01-3522-1  
Histoclear II histological clearing agent National Diagnostics; www.nationaldiagnostics.com HS-202 Histoclear II will be needed to remove the sticky insect glue from suspect beetles.  Other histological clearing agents are available but may not remove the glue and some products dissolve plastic, an important consideration if plastic containers are used for soaking the beetles. 
Histoclear II histological clearing agent Great Lakes IPM; www.greatlakesipm.com 10011 Histoclear II will be needed to remove the sticky insect glue from suspect beetles.  Other histological clearing agents are available but may not remove the glue and some products dissolve plastic, an important consideration if plastic containers are used for soaking the beetles. 
t-post: 1.5 m multiple sources A t-post (5 feet tall) (1.5 m) is used to support the PVC pipe.  
post pounder multiple sources Use a post pounder to set t-posts into the ground. No additional support is necessary.
HDPE (high density polyethylene) PVC pipe : 3 m x 10 cm diameter multiple sources
Forceps (rigid) multiple sources Forceps (tweezers) will be needed to remove suspect beetles from the traps. Rigid forceps work better than flexible forceps. 
Latex gloves multiple sources Latex gloves are needed for applying the insect trapping glue to the prisms and for checking the traps to collect EAB beetles.   
Baby oil or baby wipes  multiple sources Baby oil or baby wipes are helpful for removing the trapping glue from hands and equipment. 
Re-sealable plastic specimen bags: 5 cm x 8 cm  multiple sources Small re-sealable plastic specimen bags are useful for collecting beetles from traps.  Each bag should be labelled, either with pre-made, adhesive labels or with soft felt pens.   
Guides to help with distinguishing EAB from beetles native to North America are available on the national EAB website at www.emeraldashborer.info.  
DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Baranchikov, Y., Mozolevskaya, E., Yurchenko, G., Kenis, M. Occurrence of the emerald ash borer, Agrilus planipennis in Russia and its potential impact on European forestry. OEPP/EPPO Bulletin. 38, 233-238 (2008).
  2. Orlova-Bienkowskaja, M. J. Ashes in Europe are in danger: the invasive range of Agrilus planipennis in European Russia is expanding. Biol. Invasions. 16, 1345-1349 (2014).
  3. Anulewicz, A. C., McCullough, D. G., Cappaert, D. L. Emerald ash borer (Agrilus planipennis) density and canopy dieback in three North American ash species. Arbor. Urban For. 33, 338-349 (2007).
  4. Chen, Y., Poland, T. M. Nutritional and defensive chemistry of three North American ash species: possible roles in host performance and preference by emerald ash borer adults. Grt. Lakes Entomol. 43, 20-33 (2010).
  5. Pureswaran, D. S., Poland, T. M. Host selection and feeding preference of Agrilus planipennis (Coleoptera: Buprestidae) on ash (Fraxinus spp). Environ. Entomol. 38, 757-765 (2009).
  6. Rebek, E. J., Herms, D. A., Smitley, D. R. Interspecific variation in resistance to emerald ash borer (Coleoptera: Buprestidae) among North American and Asian ash (Fraxinus spp). Environ. Entomol. 37, 242-246 (2008).
  7. Tanis, S. R., McCullough, D. G. Differential persistence of blue ash and white ash following emerald ash borer invasion. Can. J. For. Res. 42, 1542-1550 (2012).
  8. Tanis, S. R., McCullough, D. G., G, D. Host resistance of five Fraxinus species to Agrilus planipennis (Coleoptera: Buprestidae) and effects of paclobutrazol and fertilization. Environ. Entomol. 44, 287-299 (2015).
  9. Burr, S. J., McCullough, D. G. Condition of green ash (Fraxinus pennsylvanica) overstory and regeneration at three stages of the emerald ash borer invasion wave. Can. J. For. Res. 44, 768-776 (2014).
  10. Knight, K. S., Brown, J. P., Long, R. P. Factors affecting the survival of ash (Fraxinus spp.) trees infested by emerald ash borer (Agrilus planipennis). Biol. Invasions. 15, 371-383 (2013).
  11. Klooster, W. S. Ash (Fraxinus spp.) mortality, regeneration, and seed bank dynamics in mixed hardwood forests following invasion by emerald ash borer (Agrilus planipennis). Biol. Invasions. 16, 859-873 (2014).
  12. Flower, C. E. Native bark-foraging birds preferentially forage in infected ash (Fraxinus spp.) and prove effective predators of the invasive emerald ash borer (Agrilus planipennis Fairmaire). For. Ecol. Manage. 313, 300-306 (2014).
  13. Gandhi, K. J. K., Herms, D. A. North American arthropods at risk due to widespread Fraxinus mortality caused by the alien emerald ash borer. Biol. Invasions. 12, 1839-1846 (2010).
  14. Kovacs, K. F. Cost of potential emerald ash borer damage in U.S. communities, 2009-2019. Ecol. Econ. 69, 569-578 (2010).
  15. Kovacs, K. The influence of satellite populations of emerald ash borer on projected economic damage in U.S. communities, 2010-2020. Environ. Manage. 92, 2170-2181 (2011).
  16. Herms, D. A., McCullough, D. G. Emerald ash borer invasion of North America: history, biology, ecology, impact and management. Ann. Rev. Entomol. 59, 13-30 (2014).
  17. Herms, D. A., McCullough, D. G., Smitley, D. R., Sadof, C. S., Cranshaw, W. . Insecticide options for protecting ash trees from emerald ash borer. , 16 (2014).
  18. Mercader, R. J., McCullough, D. G., Bedford, J. M. A comparison of girdled ash detection trees and baited artificial traps for Agrilus planipennis (Coleoptera: Buprestidae) detection. Environ. Entomol. 42, 1027-1039 (2013).
  19. McCullough, D. G., Poland, T. M., Anulewicz, A. C., Emerald Cappaert, D. Emerald ash borer (Agrilus planipennis Fairmaire) (Coleoptera: Buprestidae) attraction to stressed or baited ash (Fraxinus spp.) trees. Environ. Entomol. 38, 1668-1679 (2009).
  20. McCullough, D. G., Poland, T. M., Cappaert, D., Anulewicz, A. C. Emerald ash borer (Agrilus planipennis) attraction to ash trees stressed by girdling, herbicide and wounding. Can. J. For. Res. 39, 1331-1345 (2009).
  21. McCullough, D. G., Siegert, N. W., Poland, T. M., Pierce, S. J., Ahn, S. Z. Effects of trap type, placement and ash distribution on emerald ash borer captures in a low density site. Environ. Entomol. 40, 1239-1252 (2011).
  22. Hunt, L., Mastro, V., Lance, D., Reardon, R., Parra, G. Emerald ash borer state update: Ohio. , (2007).
  23. Mercader, R. J. Estimating local spread of recently established emerald ash borer, Agrilus planipennis, infestations and the potential to influence it with a systemic insecticide and girdled ash trees. For. Ecol. Manage. , (2016).
  24. Rauscher, K., Mastro, V., Reardon, R., Parra, G. The 2005 Michigan emerald ash borer response: an update. , (2005).
  25. Ryall, K. Detection and sampling of emerald ash borer (Coleoptera: Buprestidae) infestations. Can. Entomol. 147, 290-299 (2015).
  26. Silk, P. J., Ryall, K. Semiochemistry and chemical ecology of the emerald ash borer Agrilus planipennis (Coleoptera: Buprestidae). Can. Entomol. 147, 277-289 (2015).
  27. Poland, T. M. Recent development and advances in survey and detection tools for emerald ash borer. , (2016).
  28. Crook, D. A. Development of a host-based semiochemical lure for trapping emerald ash borer, Agrilus planipennis (Coleoptera: Buprestidae). Environ. Entomol. 37, 356-365 (2008).
  29. de Groot, P. Electrophysiological response and attraction of emerald ash borer to green leaf volatiles (GLVs) emitted by host foliage. J. Chem. Ecol. 34, 1170-1179 (2008).
  30. Poland, T. M., McCullough, D. G. Comparison of trap types and colors for capturing emerald ash borer adults at different population densities. Environ. Entomol. 43, 157-170 (2014).
  31. Crook, D. J., Mastro, V. C. Chemical ecology of the emerald ash borer Agrilus planipennis. J. Chem. Ecol. 36, 101-112 (2010).
  32. Rodriguez-Saona, C. Behavioral and electrophysiological responses of the emerald ash borer, Agrilus planipennis, to induced volatiles of Manchurian ash, Fraxinus mandshurica. Chemoecology. 16, 75-86 (2006).
  33. Crook, D. J. Laboratory and field response of the emerald ash borer (Coleoptera: Buprestidae) to selected regions of the electromagnetic spectrum. J. Econ. Entomol. 102, 2160-2169 (2009).
  34. Francese, J. A. Optimization of trap color for the emerald ash borer, Agrilus planipennis (Coleoptera: Buprestidae). J. Econ. Entomol. 103, 1235-1241 (2010).
  35. Crook, D. J., Khrimian, A., Cossé, A., Fraser, I., Mastro, V. C. Influence of trap color and host volatiles on capture of the emerald ash borer (Coleoptera: Buprestidae). J. Econ. Entomol. 105, 429-437 (2012).
  36. . Emerald Ash Borer Survey Guidelines Available from: https://www.aphis.usda.gov/plant_health/plant_pest_info/emerald_ash_b/downloads/survey_guidelines.pdf (2013)
  37. Grant, G. G., Poland, T. M., Ciaramitaro, T., Lyons, D. B., Jones, G. C. Comparison of male and female emerald ash borer (Coleoptera: Buprestidae) responses to phoebe oil and (Z)-3-hexenol lures in light green prism traps. J. Econ. Entomol. 104, 173-179 (2011).
  38. Cappaert, D., McCullough, D. G., Poland, T. M., Siegert, N. W. Emerald ash borer in North America: a research and regulatory challenge. Am. Entomol. 51, 152-165 (2005).
  39. Taylor, R. A. J., Bauer, L. S., Poland, T. M., Windell, K. Flight performance of Agrilus planipennis (Coleoptera: Buprestidae) on a flight mill and in free flight. J. Insect Behav. 23, 128-148 (2010).
  40. Mercader, R. J. Evaluation of the potential use of a systemic insecticide and girdled trees in area wide management of the emerald ash borer. For. Ecol. Manage. 350, 70-80 (2015).
  41. Mercader, R. J., Siegert, N. W., Liebhold, A. M., McCullough, D. G. Simulating the effectiveness of three potential management options to slow the spread of emerald ash borer, (Agrilus planipennis) populations in localized outlier sites. Can. J. For. Res. 41, 254-264 (2011).
  42. Mercader, R. J., Siegert, N. W., Liebhold, A. M., McCullough, D. G. Influence of foraging behavior and host spatial distribution on the localized spread of the emerald ash borer, Agrilus planipennis. Pop. Ecol. 53, 271-285 (2011).
  43. Poland, T. M., McCullough, D. G., Anulewicz, A. C. Evaluation of an artificial trap for Agrilus planipennis (Coleoptera: Buprestidae) incorporating olfactory and visual cues. J. Econ. Entomol. 104, 517-531 (2011).

Tags

Double-decker TrapsEmerald Ash BorerLow Density PopulationsPVC PipePlastic PanelsCable TiesT PostInsect Trapping Glue

Play Video
PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
Citer Cet Article
McCullough, D. G., Poland, T. M. Building Double-decker Traps for Early Detection of Emerald Ash Borer. J. Vis. Exp. (128), e55252, doi:10.3791/55252 (2017).
Télécharger la Citation
Réimpressions et Autorisations

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image