Минимально инвазивная Поперечная Сужение аортального у мышей
Summary
Минимально инвазивная поперечная сужением аорты (MTAC) сохраняет основы регулярной поперечной сужением аорты (TAC), устраняя использование искусственной вентиляции легких с интубации трахеи. Это оказывается весьма желательным способом с высокой пропускной способностью исследований левого желудочка перегрузки, особенно в переводоведение.
Abstract
Минимально инвазивная поперечная сужением аорты (MTAC) является более желательным способом сужения поперечного аорты у мышей по сравнению со стандартной открытой грудной поперечной сужением аорты (TAC). Несмотря на то, поперечная сужением аорты является очень функциональным методом индукции высокого давления в левом желудочке, она является более трудным и длительная процедура в связи с его применением искусственной вентиляции с интубации трахеи. TAC не часто также менее живучие, как более новый метод, MTAC, ни требует резки ребер и межреберных мышц, ни интубации трахеи с установкой вентиляции. В MTAC, в отличие от торакотомии, чтобы получить доступ к грудной полости, дуги аорты достигается через срединный разрез на передней поверхности шеи. Щитовидной железы оттягивают назад, чтобы раскрыть грудины паз. Грудина затем вырубить на второй уровень ребра и дуги аорты достигается просто путем отделения соединительных тканей и тимус. Изтам, шовный материал может быть обернут вокруг арки и связаны с прокладкой, а затем грудины вырезать и кожа может быть закрыта. MTAC гораздо быстрее и менее инвазивным способом, чтобы вызвать левого желудочка гипертензии и позволяет возможность для проведения исследований с высокой пропускной способностью. Успех сужения может быть проверена с использованием высокочастотного трансторакальные эхокардиографию, в частности, цветного допплеровского и импульсно-волновой доплеровский сдвиг, для определения скорости потока дуги аорты и левой и правой сонной артерии, размер кровеносных сосудов, и функция левого желудочка и морфология. Успешный перетяжка будет также вызвать значительные гистопатологические изменения, такие как сердечной мышцы клетки гипертрофии с интерстициальным и периваскулярной фиброза. Здесь процедура MTAC описана, демонстрируя, как в результате изменения потока в сонных артериях могут быть исследованы с эхокардиографии, грубой морфологии и гистологических изменений в сердце.
Introduction
Общая цель этой статьи состоит в том, чтобы продемонстрировать, как поперечная сужением аорты (TAC) у мышей может быть модифицирован для получения более простой и целесообразный хирургии. ТАС была впервые введена в 1991 году 1 и позволили молекулярные биологи для изучения клеточных и молекулярных путей , которые приводят к гипертрофии в левом желудочке и к сердечной недостаточности, особенно у мелких животных с манипулируют геномов 2, 3, 4, 5, 6. Несмотря на его эффективность при производстве перегрузки требуемого давления, метод в конечном счете ограничивается трудностью в выполнении процедуры и ее низкой выживаемости. Хирург проведения TAC должен иметь возможность выполнять интубации трахеи, торакотомии, и использовать искусственную вентиляцию, чтобы предотвратить коллапс легких 1.
Содержание "> Много раз, простой и менее инвазивным методом желательна. Как следствие, минимально инвазивной поперечная сужением аорты (MTAC) был разработан 3. Несмотря на то, исход ( в частности, гипертрофию левого желудочка) является такой же, процедура включает в себя значительно меньше аппаратов и меньше вреда животному. MTAC оказывается желательным методом, который имеет больший коэффициент выживаемости, выше 90%, и имеет время работы только от 15 до 25 мин. нечастых случаев смерти после успешной операции может быть обусловлено слишком -tight сужение дуги аорты, что приводит к огромной перегрузке левого желудочка и фатальным снижением кровоснабжения критических органов, таких как почки.После того, как процедура закончена, эхокардиографии могут быть использованы для оценки успешности полосатости и сердечной морфологии и функции. Система ультразвука высокой частоты может быть использован для измерения диаметра и потока изменений в левый и правыйСонные артерии, чтобы визуализировать дуги аорты перетяжку для измерения пиковой скорости потока, а также для определения левой толщины стенки желудочка и функциональных параметров 7, 8. После эвтаназии, органы также могут быть собраны для гистологических исследований гематоксилином и эозином и Picrosirius коллагена окрашивания, причем последний особенно полезен для наблюдения фиброза.
Protocol
Representative Results
Discussion
Rockman и его коллеги разработали первый метод кольцевания аорты как метод изучения перегрузки давления в сердце. Это позволило начать исследование , чтобы выявить клеточные и молекулярные последствия гипертонии и сердечной недостаточности 1. Усовершенствованный метод, мин?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Мы хотели бы отметить университет Научно-исследовательский центр в области наук о жизни (ULS) Гонконгского политехнического университета для предоставления Vevo 2100 ультразвуковой системы. Особая благодарность д-ру Chunyi Вэнь из Междисциплинарного отдела биомедицинской инженерии, Гонконгский политехнический университет, для подготовки и упрощения процедур. Эта работа была поддержана правительством HK RGC Grant GRF 17127215, 764812 и HKU6 / CRF / 11G Билли KC-чау.
Materials
| 1 inch 30 Gauge Needles | BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. | 305128 | Curved as in the procedure and Figure 1 |
| 27 Gauge Needle | BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. | 301629 | Make blunt and smooth for spacer |
| 6/0 Dafilon | B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. | C0933066 | |
| 6/0 Silkam | B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. | C0762067 | |
| Sterile gloves | A.R. Medicom, Inc (Asia), Hong Kong. | ||
| Cotton Applicator | Mannings, Quarry Bay, Hong Kong. | Local Shopping Center | |
| Delapitory Cream | Veet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong Kong | Local Shopping Center | |
| Lexer-Baby Scissor | FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. | 14078-10 | |
| Curved Iris Forcep | FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. | 11065-07 | |
| Micro Olsen-Hegar Needle Holder | WPI, Sarasota, FL 34240, USA. | 501989 | |
| Stereo Micrioscope | WPI, Sarasota, FL 34240, USA. | PZMIII-BS | |
| GenTeal Gel | Novartis, East Hanover, NJ 07936, USA. | Local Pharmacy | |
| Heating Pad | Kent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, USA. | DCT-20 | |
| Surgical tape | Laboratory Animal Unit | ||
| Ketamine and Xylazine | Laboratory Animal Unit | ||
| Betadine | Laboratory Animal Unit | ||
| Buprenorphine | Laboratory Animal Unit |
References
- Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).
- de Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse aortic constriction in mice. J Vis Exp. (38), (2010).
- Hu, P., et al. Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 285 (3), H1261-H1269 (2003).
- Shimizu, I., et al. Excessive cardiac insulin signaling exacerbates systolic dysfunction induced by pressure overload in rodents. J Clin Invest. 120 (5), 1506-1514 (2010).
- Tarnavski, O. Mouse surgical models in cardiovascular research. Methods Mol Biol. 573, 115-137 (2009).
- Zhang, X., et al. A modified murine model for the study of reverse cardiac remodelling. Exp Clin Cardiol. 18 (2), e115-e117 (2013).
- Hartley, C. J., et al. Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy. Ultrasound Med Biol. 34 (6), 892-901 (2008).
- Scherrer-Crosbie, M., Thibault, H. B. Echocardiography in translational research: of mice and men. J Am Soc Echocardiogr. 21 (10), 1083-1092 (2008).
- Faerber, G., et al. Induction of heart failure by minimally invasive aortic constriction in mice: reduced peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator levels and mitochondrial dysfunction. J Thorac Cardiovasc Surg. 141 (2), 492-500 (2011).
- Li, L., et al. Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging. J Vis Exp. (112), (2016).
