Summary

Histological विश्लेषण के लिए सुअर सीएनएस के एक्सपोजर: सिरच्छेदन, खोपड़ी उद्घाटन अ मैनुअल, और मस्तिष्क को हटाने

Published: April 13, 2017
doi:

Summary

इस पत्र और अनुदेशात्मक वीडियो के लक्ष्य को बेनकाब और एक अक्षुण्ण राज्य, बाद में स्थूल और ऊतकीय विश्लेषण के लिए उपयुक्त में पोस्टमार्टम सुअर मस्तिष्क और पिट्यूटरी ग्रंथि को निकालने का तरीका वर्णन करने के लिए है।

Abstract

सूअर गैर मानव प्राइमेट के लिए एक आर्थिक रूप से और नैतिकता की दृष्टि से व्यवहार्य विकल्प के रूप में बड़े पशु अनुवादकीय तंत्रिका विज्ञान अनुसंधान के क्षेत्र में तेजी से लोकप्रिय हो गए हैं। सुअर की बड़ी मस्तिष्क के आकार पारंपरिक नैदानिक ​​मस्तिष्क imagers और प्रत्यक्ष उपयोग और मानव क्लिनिक से तंत्रिकाशल्यक प्रक्रियाओं और उपकरणों के परीक्षण के उपयोग की अनुमति देता है। इसके अलावा स्थूल और ऊतकीय विश्लेषण, तथापि, सुअर केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (सीएनएस) और बाद में मस्तिष्क को हटाने का पोस्टमार्टम जोखिम की आवश्यकता है। यह एक आसान काम, सुअर के रूप में सीएनएस एक मोटी, बोनी खोपड़ी और मेरूदंड से समझाया गया है नहीं है। इस पत्र और अनुदेशात्मक वीडियो के लक्ष्य को बेनकाब और पोस्टमार्टम सुअर मस्तिष्क और एक अक्षुण्ण राज्य में पिट्यूटरी ग्रंथि, बाद में स्थूल और ऊतकीय विश्लेषण के लिए उपयुक्त निकालने का तरीका वर्णन करने के लिए है।

Introduction

सूअरों में अनुवादकीय तंत्रिका विज्ञान के अध्ययन के पिछले दो दशकों के दौरान तेजी से लोकप्रिय हो गए हैं। सुअर मस्तिष्क के बड़े आकार के पारंपरिक नैदानिक मस्तिष्क imagers और प्रत्यक्ष उपयोग और तंत्रिकाशल्यक प्रक्रियाओं और मानव क्लिनिक 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 से उपकरणों की परीक्षण के उपयोग सक्षम बनाता है। पिछले 20 वर्षों में, सूअर, विशेष रूप से minipigs (जैसे, गौटिंगेन minipig), इस तरह के स्टेम सेल प्रत्यारोपण के रूप में neuromodulatory उपचार रूपरेखा, जांच करने के लिए इस्तेमाल किया गया है; वायरल वेक्टर अभिकर्मक; और गहरी मस्तिष्क उत्तेजना पार्किंसंस रोग मोटापा, अवसाद, और अल्जाइमर रोग 2, 6 की ओर निर्देशित,= "xref"> 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17। यह stereotaxic और शल्य चिकित्सा के दृष्टिकोण के विकास के द्वारा minipig सीएनएस 3, 18, 19, 20, 21 में हेरफेर करने के पालन किया गया है। की शुरूआत की सीएनएस परिवर्तन ब्रेन इमेजिंग का उपयोग कर (पीईटी 10, 13, 22, 24 और एमआर 23), cystometry 11, 12, 25 जीवित पशुओं में मूल्यांकन किया गया है, चाल विश्लेषण17, मस्तिष्क संबंधी मूल्यांकन 9, 17, और ऊतक विज्ञान और stereological विश्लेषण 14, 15, 17, 26, 27, 31 के आधार पर शवपरीक्षा परीक्षा। हालांकि, पोस्टमार्टम विश्लेषण जोखिम और सुअर मस्तिष्क है, जो एक आसान काम नहीं है को हटाने, एक मोटी, बोनी खोपड़ी और एक रेशेदार सुअर मस्तिष्क के चारों ओर कवर Dural के रूप में की आवश्यकता है।

इस पत्र और अनुदेशात्मक वीडियो के लक्ष्य को कैसे पोस्टमार्टम सुअर मस्तिष्क और पिट्यूटरी गैर मोटर चालित शल्य उपकरण का उपयोग कर 15-20 मिनट में उजागर किया है और हटाया जा सकता है एक अक्षुण्ण राज्य में वर्णन करने के लिए है। minipig पिट्यूटरी ग्रंथि पर एक संरचनात्मक अध्ययन के लिए इस्तेमाल अनुदेशात्मक वीडियो और फोटो चित्र पुरुष minipigs (:: 6 महीने, वजन 20-25 किलो उम्र) दिखा।

Protocol

पशु संज्ञाहरण और euthanesia (एनआईएच प्रकाशन सं 86-23, 1985 संशोधित) और पशु अनुसंधान नीतिशास्त्र के लिए डेनिश परिषद द्वारा अनुमोदित "प्रयोगशाला पशु देखभाल के सिद्धांत" के अनुसार किया गया था। 1. उपकरण <ol…

Representative Results

बाहर सूखने से ऊतक सामग्री रोकने के लिए, यह बंधक या isotonic खारा तुरंत बाद स्थूल विश्लेषण निष्पादित किया गया है के साथ भरा एक जार में हटाया मस्तिष्क और पिट्यूटरी स्टोर करने के लिए सिफारिश की है। ?…

Discussion

अधिकांश प्रयोगात्मक तंत्रिका विज्ञान के अध्ययन में इस तरह के चूहों और चूहों, जहां सीएनएस के लिए उपयोग एक पतली skull- और Dural-मोटाई द्वारा सुविधा है के रूप में छोटे जानवरों की प्रजातियों, में प्रदर्शन कर रहे ह…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

लेखकों आभार के साथ श्रीमती ट्राइन W मिककेल्सेन के कुशल सहायता, श्रीमती लिसे एम फिटिंग, और Påskehøjgaard में कर्मचारियों को स्वीकार करते हैं। डेनिश चिकित्सा अनुसंधान परिषद, लंडबेक फाउंडेशन, और नोवो नॉर्डिस्क फाउंडेशन आर्थिक रूप से अध्ययन का समर्थन किया।

Materials

Heavy Scalpel Handle #4 FST (Fine Science Tools) 10008-13 Good for skin incision and soft tissue removal
Non-Sterile Scalpel Blades #23 FST  10023-00
Scalpel Handle #7 FST  10007-12 Optimal for dural incision and precision work
Non-Sterile Scalpel Blades #11 FST  10011-00
Surgical Forceps FST  11024-18 The tip of the surgical forceps ensure a firm grip 
Kerrison Bone Punch Aesculap Neurosurgery FF713R Must be robust, bite size 3-5 mm
Bone Rongeur Aesculap Neurosurgery MD615 Must be robust, bite size 15 x 5 mm
Bone Rongeur Aesculap Neurosurgery FO551R Must be robust, bite size 25 x 15 mm 
Bone Chisel Lawton 67-0335 The size of the chisel head should not exceed 20 mm
Mallet (Hammer) Millarco 5624108 Weigth 300 g, length 30 cm, head hit area size 2 x 2 cm
Micro-Scissor FST  14002-14  
Dissector Aesculap Neurosurgery OL165R
 Göttingen minipigs  Ellegaard Göttingen Minipigs A/S, Denmark
Euthanimal pentobarbital
Ketamine Pfizer
Midazolam  Hameln Pharmaceuticals

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Citer Cet Article
Bjarkam, C. R., Orlowski, D., Tvilling, L., Bech, J., Glud, A. N., Sørensen, J. H. Exposure of the Pig CNS for Histological Analysis: A Manual for Decapitation, Skull Opening, and Brain Removal. J. Vis. Exp. (122), e55511, doi:10.3791/55511 (2017).

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