Summary

Déficit motor reprodutível após oclusão aórtica em um modelo de rato da isquemia da medula espinhal

Published: July 22, 2017
doi:

Summary

Este estudo demonstra a técnica para fazer um modelo minimamente invasivo e facilmente reprodutível de isquemia da medula espinhal em ratos. Vários graus de déficit motor do membro traseiro podem ser produzidos controlando o tempo de oclusão aórtica.

Abstract

A isquemia da medula espinal é uma complicação fatal após a cirurgia de aneurisma aórtico toracoabdominal. Os pesquisadores podem investigar as estratégias para prevenir e tratar esta complicação usando modelos experimentais de isquemia da medula espinhal. O modelo aqui descrito demonstra vários graus de paraplegia que se relacionam com o comprimento da oclusão após a oclusão da aorta torácica em um modelo de isquemia da medula espinhal do rato.

A 2-Fr. O cateter com ponta de balão avançou através da artéria femoral para a aorta torácica descendente até a ponta do cateter foi colocada na artéria subclávia esquerda em ratos Sprague-Dawley machos anestesiados. A isquemia da medula espinal foi induzida por inflar o balão do cateter. Após um período definido de oclusão (9, 10 ou 11 min), o balão foi desinflado. A avaliação neurológica foi realizada utilizando o índice de déficit motor às 24 h após a cirurgia e a medula espinhal foi colhida para exame histopatológico.

Jove_content "> Os ratos que sofreram 9 min de oclusão aórtica apresentaram comprometimento motor leve e reversível no membro posterior. Os ratos submetidos a 10 min de oclusão aórtica apresentaram comprometimento motor moderado mas reversível. Os ratos submetidos a 11 min de oclusão aórtica exibida completa e persistente Paralisia. Os neurônios motores nas seções da medula espinhal foram mais preservados em ratos sujeitos a menor duração da oclusão aórtica.

Os pesquisadores podem alcançar um déficit motor reprodutor traseiro após a oclusão da aorta torácica usando este modelo de isquemia da medula espinhal.

Introduction

A paraplégia é uma complicação fatal da cirurgia de aneurisma aórtico toracoabdominal. Isso resulta da lesão da isquemia-reperfusão da medula espinhal que ocorre durante o aperto cruzado e o desbloqueio da aorta. 1 Várias estratégias, incluindo hipotermia sistêmica e drenagem cefalorraquidiana, foram introduzidas para proteger a medula espinhal, 2 , 3 , 4 , mas muitos pacientes permanecem afetados pela lesão.

Vários modelos de isquemia da medula espinhal animal foram introduzidos para investigar sua patogênese e desenvolver estratégias de proteção contra a lesão. No presente estudo, descrevemos um modelo de rato da isquemia da medula espinhal com base no método de Taira e Marsala. 5 O sistema de circulação espinhal em ratos é muito semelhante ao sistema vascular e colateral da medula espinhal em seres humanos, embora existam algumas diferenças no tamanho elocalização. 6 , 7 Assim, um rato é um animal anatomicamente adequado para utilizar para um modelo experimental que investiga a patogênese, complicações e tratamento da isquemia da medula espinhal. Além disso, este modelo de isquemia da medula espinhal produz oclusão aórtica confiável com intervenção mínima utilizando uma oclusão intravascular do balão da aorta torácica.

Neste estudo, demonstramos que este modelo de rato da isquemia da medula espinhal induz déficits motor reproduzíveis nos membros traseiros que variam em gravidade dependendo do tempo de oclusão aórtica.

Protocol

Este protocolo foi aprovado pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade Nacional de Seul, Hospital Bundang. Os cuidados com os animais e os experimentos foram conduzidos de acordo com o Guia Nacional de Institutos de Saúde dos Estados Unidos para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório. 1. Preparação cirúrgica Antes da cirurgia, elimine os cateteres com solução salina estéril para garantir a permeabilidade. Coloque um cobertor de aqu…

Representative Results

Durante um período de isquemia da medula espinal, a oclusão aórtica foi realizada durante 9 minutos (n = 3), 10 min (n = 3) ou 11 min (n = 3). O índice de déficit motor em ratos é apresentado na Tabela 2. Os ratos submetidos a 9 min de oclusão aórtica mostraram comprometimento motor leve e reversível no membro traseiro. Ratos submetidos a 10 min de oclusão aórtica apresentaram déficit motor moderado, mas não paralisia completa. Os ratos que sofreram 11 minutos de tempo de oclusão apresentaram paralisia com…

Discussion

No presente estudo, demonstramos um modelo de rato da isquemia da medula espinhal com base no método 5 de Taira e Marsala que induz graus variáveis ​​de déficit motor no membro posterior dependendo do tempo de oclusão aórtica.

O comprimento da oclusão aórtica pode afetar o grau de déficit motor. Se o tempo de oclusão aórtica for maior, o déficit do motor fica mais severo. Assim, os pesquisadores podem atingir um certo grau de déficit motor ao controlar…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Os autores não têm reconhecimento.

Materials

Fogarty Arterial Embolectomy catheter Edward Life Sciences 120602F a balloon-tipped catheter inserted into the femoral artery
BD Insyte-N Autoguard Shielded IV catheter  BD  381411 24-gauge intravenous catheter
50mL syringe KOREA VACCINE  KOVAX-SYRINGE 50mL Facial mask
1mL syringe KOREA VACCINE KOVAX-SYRINGE 1ml
Recal probe HARVARD APPARATUS 50-7221F Rectal probe for temperature monitoring
Micro dissecting spring scissor Jeung do bio & Plant co.LTD. JD-S-10 Micro-scissor
SCISSOR (SHARP-SHARP) Jeung do bio & Plant co.LTD. S-51-12-S Scissors
Retractor Jeung do bio & Plant co.LTD. JD-S-74A Retractor
Micro forcep  Jeung do bio & Plant co.LTD. JD-S-29 Micro-forceps
MOSQUITO FORCEP (Curved) Jeung do bio & Plant co.LTD. S-44-CPK Curved forceps
DRESSING FORCEP  Jeung do bio & Plant co.LTD. S-37-16S Blunted forceps
4/0 black silk  Woori Medical S431 4.0 black silk suture
3-WAY STOCK Seonwon Medcal D-98-01 3-way stopcock
Patient monitor PHILIPS MP20 The arterial pressure monitoring device. 
Heating blanket Self production Heating blanket
Microtube and external reservoir Self production Microtube and external reservoir
Heparin JW Pharmaceutical Heparin
0.9% NS 1000ml JW Pharmaceutical Normal saline
Isoflurane Hana Med Isoflurane

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Citer Cet Article
Hwang, J., Sohn, H., Kim, J., Park, S., Park, J., Lim, M., Han, S. Reproducible Motor Deficit Following Aortic Occlusion in a Rat Model Of Spinal Cord Ischemia. J. Vis. Exp. (125), e55814, doi:10.3791/55814 (2017).

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