यहाँ, हम एक वैक्यूम निष्कर्षण ट्यूब प्रणाली का उपयोग गैर-anesthetized चूहों में एक साधारण पूंछ नस रक्त नमूना विधि का वर्णन. इस विधि से रक्त के लिए प्रत्यक्ष जोखिम के जोखिम को कम कर देता है और एक एकल venipuncture से कई नमूने लेने सरल ।
रक्त नमूने स्थानों की एक संख्या में चूहों से एकत्र किया जा सकता है । मसलन, पूंछ नस रक्त के नमूने के लिए एक बेहतर स्थान है । हालांकि, टेल नस इतनी पतली होती है कि इसे पंचर करने में कभी-कभार ही मेहनत होती है । इसके अलावा, पूंछ नस कम रक्त प्रवाह है और एक लंबे समय नमूने के लिए पर्याप्त रक्त प्राप्त करने की आवश्यकता है । वर्तमान रिपोर्ट एक साधारण रक्त नमूना विधि का वर्णन करता है, वैक्यूम रक्त संग्रह विधि, जो आमतौर पर रोगियों से रक्त के नमूने प्राप्त करने के लिए प्रयोग किया जाता है, यहाँ गैर anesthetized चूहों के लिए इस्तेमाल किया. 22 जी तितली सुई टिप पार्श्व पूंछ की एक कोण पर लगभग 20 डिग्री की नोक से लगभग 2-3 सेमी नसों में से एक में डाला गया था, और रक्त va में तितली सुई के रबर अंत डालने के द्वारा निर्वात संग्रह ट्यूब में एकत्र किया गया था cuum रक्त संग्रह ट्यूब । वर्तमान प्रयोगात्मक परिणाम बताते है कि सफलता की दर प्रयोगात्मक समूह में ९५% और शुरुआत समूह में ९०% थी । सफलता दर और पंचर बार दो समूहों के बीच समान थे । नमूना अवधि महत्वपूर्ण शुरुआत समूह की तुलना में प्रयोगात्मक समूह में कम था । अंत में, इस वैक्यूम रक्त गैर anesthetized चूहों की पूंछ नस से नमूने अनुक्रमिक रक्त संग्रह के लिए विधि संभव है और आसान करने के लिए जानने के लिए, जो अंय पारंपरिक इस्तेमाल किया रक्त नमूना तकनीक के लिए एक विश्वसनीय विकल्प के रूप में सेवा कर सकता है चूहों.
चूहों से रक्त का नमूना प्रयोगात्मक अध्ययन की एक विस्तृत विविधता के लिए आवश्यक है । चूहे से रक्त संग्रह के लिए तकनीक दिल के पंचर, रेट्रो कक्षीय जाल, jugular नस, saphenous नस, पूंछ रक्त वाहिकाओं, मन्या धमनी, उदर महाधमनी, और वेना कावा शामिल हैं । सबसे तकनीकों (saphenous नस और पूंछ रक्त वाहिका पंचर को छोड़कर) संज्ञाहरण1,2की आवश्यकता है । चूहे की पूंछ की नसें नियमित रूप से रक्त के नमूने और संवहनी इंजेक्शन के लिए पंचर हो जाती हैं । गर्म पानी के साथ पूंछ के इलाज के बाद, रक्त वाहिकाओं अच्छी तरह से फैली हुई है और हेरफेर के लिए उपयुक्त हैं, यहां तक कि जब चूहों anesthetized रहे हैं3.
नई और बेहतर तकनीक के विकास के बावजूद छोटे प्रयोगशाला जानवरों में रक्त के नमूने प्राप्त करने के लिए2, यह हमेशा आसान नहीं है जब छोटे जानवरों से नमूना लेने के लिए पर्याप्त रक्त प्राप्त करने के लिए । चूहों की पूंछ नस रक्त का नमूना4के लिए एक बेहतर स्थान है । हालांकि, पूंछ नस पतली है, इस प्रकार यह कई बार पंचर करने के लिए कठिन है और पर्याप्त अपने कम रक्त प्रवाह के कारण रक्त प्राप्त करने के लिए एक लंबे समय ले जाएगा । एक वैक्यूम निष्कर्षण ट्यूब प्रणाली के माध्यम से रक्त संग्रह दैनिक नैदानिक अभ्यास में एक ठेठ विधि है । रक्त एकत्रित करने के लिए यह बंद प्रणाली रक्त के लिए प्रत्यक्ष जोखिम के जोखिम को कम कर देता है और एक एकल venipuncture से कई नमूने लेने के लिए आसान बना दिया है5. वर्तमान रिपोर्ट गैर में एक साधारण पूंछ नस रक्त नमूना विधि का वर्णन anesthetized वैक्यूम निष्कर्षण ट्यूब प्रणाली का उपयोग चूहों । इस विधि मास्टर करने के लिए आसान है और चूहों में खून की एक बड़ी मात्रा को प्राप्त करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है ।
वर्तमान रिपोर्ट का वर्णन एक आसान चूहों में रक्त संग्रह पद्धति जानने के लिए । हमारे परिणामों से पता चला है कि इस पद्धति के लिए समय बार चूहों से रक्त की एक बड़ी मात्रा इकट्ठा करने के लिए संभव है । इसके अलावा, इस विधि आसानी से एक अल्पकालिक सीखने की अवस्था के साथ महारत हासिल किया जा सकता है । यह प्रक्रिया गैर anesthetized चूहों में प्रदर्शन किया जा सकता है और केवल जानवरों के लिए न्यूनतम तनाव का कारण बनता है ।
विभिन्न स्थानों पर चूहों से रक्त एकत्रित किया जा सकता है । पूंछ नस रक्त का नमूना4के लिए एक बेहतर स्थान है । हालांकि, यह हमेशा चूहों की पतली और कम रक्त प्रवाह पूंछ नस से पर्याप्त रक्त की मात्रा प्राप्त करने के लिए आसान नहीं है । वैक्यूम रक्त संग्रह प्रणाली आमतौर पर दैनिक नैदानिक अभ्यास में रोगियों से रक्त के नमूनों को इकट्ठा करने के लिए प्रयोग किया जाता है । इस वैक्यूम रक्त संग्रह प्रणाली के रोगियों और अनुसंधान जानवरों में एक लंबे समय के लिए इस्तेमाल किया गया है8,9,10। इस प्रणाली सिलिकॉन लेपित भीतरी ट्यूब दीवार और तितली सुई के साथ एक वैक्यूम रक्त संग्रह ट्यूब के होते हैं । यह वैक्यूम नकारात्मक दबाव सिद्धांत पर आधारित था और रक्त एकत्रित करने के जोखिम के बिना रक्त की सतत ड्राइंग की अनुमति देता है, जो भी संदूषण और hemolysis11की संभावना को कम करता है । कैथेटर में रक्त के नमूने की मात्रा के बारे में ०.३ मिलीलीटर है । पूंछ नस से सुई वापस लेने के बाद, कैथेटर में अवरुद्ध रक्त वैक्यूम के कारण एकत्रित वैक्यूम ट्यूब में प्रवाह होगा । यह तरीका भी एक छोटे पंचर सुई के उपयोग के साथ १०० ग्राम से कम वजनी चूहों से रक्त एकत्रित करने के लिए लागू है ।
इस रक्त संग्रह विधि के कई फायदे हैं । इस प्रक्रिया को केवल चूहों और रक्त संग्रह के लिए ंयूनतम चोट का कारण बनता है निश्चेतक के उपयोग के बिना किया जा सकता है, इस प्रकार तनाव प्रतिक्रिया और रक्त के नमूने पर निश्चेतक के प्रभाव से बचा जा सकता है । हमारी टिप्पणियों से पता चला कि चूहों प्रक्रिया के दौरान प्लास्टिक निरोधक धारक में शांत थे और इन प्रयोगों के दौरान कोई मृत्यु हो गई । दूसरे, दोहराया रक्त संग्रह हर एक या दो दिन संभव है, जो विभिंन अनुसंधान प्रयोजनों के लिए एक पर्याप्त मात्रा के साथ रक्त की लगातार नमूना सक्षम बनाता है । अंत में, इस विधि को जानने के लिए आसान है और आसानी से एक छोटी (2 एच) सीखने की अवधि के बाद शुरुआती द्वारा महारत हासिल थी, जैसा कि इसी तरह की सफलता दर और इस रिपोर्ट में प्रयोगात्मक और शुरुआत समूहों के बीच पंचर बार द्वारा संकेत दिया । पिछली रिपोर्ट में ली एट अल. ने4चूहे की पार्श्व पूंछ नस से रक्त नमूना लेने की एक ऐसी ही विधि का प्रदर्शन किया । हमारे विधि से सरल है कि ली एट अल द्वारा रिपोर्ट । 4 में है कि हम सीधे पूंछ नस में पंचर सुई डालने और ट्यूब के दूसरे छोर सीधे रक्त का संग्रह करने के लिए वैक्यूम ट्यूब से जुड़ा हुआ है, रक्त की एक अतिरिक्त सिरिंज और मैनुअल आकांक्षा के उपयोग के बिना और ‘ की आवश्यकता के बिना दूध ‘ आईएनजी नस रक्त प्रवाह को सुविधाजनक बनाने के लिए । इस बंद व्यवस्था के साथ रक्त एकत्रित करने से रक्त संदूषण की संभावना कम हो जाती है । प्लास्टिक निरोधक धारक के प्रयोग से भी चूहे को तनाव कम होता है और पूंछ के निर्धारण की सुविधा मिलती है.
इस विधि के सफल अनुप्रयोग के लिए निंन दो चरण महत्वपूर्ण हैं । 1) पूंछ का विस्तार और पूंछ के आंदोलन से बचने के; 2) नस के माध्यम से पंचर से बचने के लिए 20 ° के एक कोण पर नस को धीरे से पंचर करें और पंचर सुई को नस में रखें ।
अंत में, चूहों में अपनाया वैक्यूम रक्त संग्रह विधि सुरक्षित, संभव है, और अभ्यास करने के लिए आसान है । इस विधि में एक पर्याप्त रक्त गैर anesthetized चूहों से प्राप्त मात्रा के साथ रक्त की लगातार नमूना सक्षम बनाता है ।
The authors have nothing to disclose.
लेखकों को बनाने के लिए कोई पावती नहीं है.
a double-pointed needle | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 22G | (0.7×25mm) |
vacuum tubes | Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China | 2 ml | |
rat restraining holder | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 250g rat hoder model | |
normal salt diet for rats | Rats received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study | ||
SPSS software for statistical analysis | SPSS Inc, Chicago; USA | Version 17.0. |