Summary

जीर्ण कसना चोट के साथ चूहों में स्वचालित चाल विश्लेषण

Published: October 17, 2017
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Summary

एक neuropathic पशु मॉडल में दर्द की प्रतिक्रिया का सटीक आकलन दर्द रोगों के pathophysiology की जांच और नए एनाल्जेसिक विकसित करने के लिए महत्वपूर्ण है । हम एक स्वचालित चाल विश्लेषण प्रणाली द्वारा कुतर हिंद पंजा के संवेदी समारोह निर्धारित करने के लिए एक संवेदनशील और उद्देश्य विधि प्रस्तुत करते हैं ।

Abstract

वॉन Frey परीक्षण व्यापक रूप से neuropathic दर्द जानवरों के संवेदी समारोह की जांच करने के लिए इस्तेमाल किया गया है कि एक शास्त्रीय विधि है । हालांकि, यह व्यक्तिपरक डेटा और एक कुशल, अनुभवी प्रयोगकर्ता की आवश्यकता के रूप में कुछ नुकसान है । तारीख करने के लिए, संशोधनों की एक किस्म वॉन Frey विधि में सुधार हुआ है, लेकिन यह अभी भी कुछ सीमाएं हैं । हाल की रिपोर्टों का सुझाव दिया है कि चाल विश्लेषण neuropathic पशुओं से अधिक सटीक और उद्देश्य डेटा पैदा करता है । यह प्रोटोकॉल प्रदर्शित करता है कि कैसे स्वचालित चाल विश्लेषण करने के लिए चूहों में neuropathic दर्द की डिग्री निर्धारित करने के लिए । acclimation के कई दिनों के बाद, चूहों के निशान रोशन करने के लिए कांच के फर्श पर स्वतंत्र रूप से चलने के लिए अनुमति दी गई थी । फिर, पैरों के निशान और चाल के ठहराव विभिंन चलने के मापदंडों के स्वत: विश्लेषण के साथ वीडियो क्लिप के माध्यम से प्रदर्शन किया गया, जैसे पंजा प्रिंट के क्षेत्र, स्विंग समय, पंजा के कोण, आदि ।

इस अध्ययन का मुख्य उद्देश्य के लिए स्वचालित चाल विश्लेषण की कार्यप्रणाली का वर्णन और संक्षेप में यह शास्त्रीय संवेदी परीक्षण से डेटा के साथ तुलना वॉन Frey रेशा का उपयोग कर रहा है ।

Introduction

तंत्रिका आघात से प्रेरित प्रणाली के रोग परिवर्तन, चयापचय रोग, सूजन, संक्रमण, ischemia, या स्व-प्रतिरक्षित रोग neuropathic दर्द है, जो एक घाव या रोग का प्रत्यक्ष परिणाम के रूप में उत्पन्न दर्द के रूप में परिभाषित किया गया है में परिणाम कभी-कभार somatosensory सिस्टम1को प्रभावित कर रहा है । Neuropathic दर्द आमतौर पर असहनीय है और दुर्भाग्य से, पारंपरिक एनाल्जेसिक आम तौर पर पर्याप्त दर्द राहत का उत्पादन नहीं है2। neuropathic दर्द की एक प्रमुख विशेषता सहज और उत्तेजना पैदा होता है (यानी, allodynia और hyperalgesia) दर्द । Allodynia एक nociceptive प्रतिक्रिया है कि सामांय रूप से गैर दर्दनाक उत्तेजनाओं, जैसे प्रकाश स्पर्श या गर्म उत्तेजना के लिए होता है । Hyperalgesia हानिकारक यांत्रिक और/या थर्मल उत्तेजनाओं3के लिए एक बढ़ाया दर्द प्रतिक्रिया इंगित करता है । हालांकि इन दो लक्षणों दोनों गंभीर जीवन के रोगी की गुणवत्ता ख़राब, यांत्रिक allodynia कोमल स्पर्श उत्तेजना द्वारा पैदा की सबसे उत्तेजक लक्षण है क्योंकि नरम संपर्क रोजमर्रा की जिंदगी में से बचने के लिए मुश्किल है ।

neuropathic दर्द के उपचार के लिए अंतर्निहित तंत्र और नए एनाल्जेसिक की जांच करने के लिए, दर्द की प्रतिक्रिया की सटीक माप आवश्यक है । कई neuropathic दर्द पशु मॉडल के कारण अपने उच्च पहुंच क्षमता4,5,6,7में हिंद पंजा क्षेत्र पर nociceptive प्रतिक्रियाओं का विकास किया है । इस प्रकार, ज्यादातर दर्द प्रतिक्रिया आकलन यांत्रिक उत्तेजनाओं लागू करने के द्वारा तल या पृष्ठीय सतह पर किया गया है विशेष उपकरणों, जैसे वॉन Frey रेशा के रूप में । सबसे अधिक उपयोग की जाने वाली विधि में से एक डिक्सन8 और बाद में संशोधित संस्करण9,10द्वारा वर्णित अप और डाउन पद्धति है । हालांकि, बहुत कुशल, अनुभवी प्रयोगकर्ता वॉन Frey परीक्षण करने के लिए आवश्यक हैं और परिणाम व्यक्तिपरक हो सकता है ।

स्वचालित चाल विश्लेषण प्रणाली स्वतंत्र रूप से चलती कुतर में चलने के विभिन्न मापदंडों को मापने के द्वारा स्नायविक और neuromuscular विकारों की जांच कर सकते हैं । तंत्रिका चोट पशु मॉडल की एक किस्म में, nociception की डिग्री और कई उपचार के antinociceptive प्रभाव एक दर्द उत्तेजना11,12,13को जोड़ने के बिना मूल्यांकन किया जा सकता है, 14. यह विश्लेषण प्रणाली स्थिर और गतिशील चाल मापदंडों का पता लगा सकती है, जैसे: पंजा प्रिंट क्षेत्र (पूरा पंजा प्रिंट के क्षेत्र कि मंजिल के साथ संपर्क), पंजा तीव्रता (संपर्क पंजा क्षेत्र की औसत तीव्रता), डग लंबाई ( एक ही पंजा के उत्तराधिकारी प्लेसमेंट के बीच दूरी), रुख चरण (एक भी हिंद पंजा के लिए जमीन संपर्क की अवधि), चरण अनुक्रम (क्रम में चार पंजे फर्श पर रखा जाता है), स्विंग (स्विंग चरण की अवधि), और स्विंग गति (गणना डग लंबाई और स्विंग अवधि से और प्रति सेकंड पिक्सल के रूप में व्यक्त) । इस कागज का उपयोग एक विश्लेषण प्रणाली को दर्शाता है और वॉन Frey क्रोनिक कसना चोट (सीसीआई) neuropathic चूहों का उपयोग परीक्षण के साथ डेटा की एक संक्षिप्त तुलना प्रदान करता है ।

Protocol

सभी प्रयोगों को दर्द के अध्ययन के लिए इंटरनेशनल एसोसिएशन के नैतिक दिशा निर्देशों के अनुसार आयोजित किया गया था और संस्थागत पशु देखभाल और Chungnam राष्ट्रीय विश्वविद्यालय में उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित …

Representative Results

सीसीआई सर्जरी के बाद 10 दिनों तक सीसीआई चूहों में हम वॉन Frey परीक्षण और स्वचालित चाल विश्लेषण प्रदर्शन किया है । सांख्यिकीय विश्लेषण के लिए, दो तरह के विचरण का दोहराया उपाय (ANOVA) समग्र प्रभाव नि?…

Discussion

वर्तमान में, वॉन Frey रेशा का उपयोग करके यांत्रिक allodynia का मापन दर्द पशु मॉडल में सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किया विधि स्पर्श अतिसंवेदनशीलता प्रदर्शित करने के लिए है । neuropathic दर्द के लिए पशु मॉडल के रूप में व?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

इस शोध Chungnam राष्ट्रीय विश्वविद्यालय, कोरिया ओरिएंटल मेडिसिन (KIOM) और कोरिया स्वास्थ्य प्रौद्योगिकी R & #38;D परियोजना के माध्यम से कोरिया स्वास्थ्य उद्योग विकास संस्थान (खिडी), स्वास्थ्य मंत्रालय द्वारा वित्त पोषित के माध्यम से अनुदान का समर्थन किया था & #38; कल्याण, कोरिया गणराज्य (अनुदान संख्या: HI15C0007).

Materials

0.9% Saline JW Pharmaceutical N/A Vehicle for drugs
1ml syringe BD Plastipak 300013 Injecting device
2, 2, 2-tribromoethanol (97% purity) Sigma T48402 Anesthetic
2-methyl-2-buthanol (99% purity) Sigma 152463 Solvent for 2, 2, 2-tribromoethanol
Catwalk Automated gait analysis system Noldus N/A Automatic analysis software of aniaml gait
Chromic catgut (4-0 thickness) AILEE C442 Ligature to make chronic constriction injury on the sciatic nerve
Gabapentin Sigma Y0001280 Analgeisc, Used as a positive control drug in this study
Graefe Forceps F.S.T 11051-10 Surgical instrument
Heating Pad DAESHIN ELECTRONICS M-303AT Regulation of body temperature
ICR Mouse Samtaco N/A Experimental animal
Mersilk (3-0 thickness) ETHICON W598H Suture material for surgical closure of skin
Micro-Mosquito F.S.T 13010-12 Surgical instrument
Micro-scissors F.S.T 14090-09 Surgical instrument
Needle holder F.S.T 12002-12 Surgical instrument
Povidone Iodine Firson N/A Disinfectant to prevent infection after surgery
Scalpel blade F.S.T 10010-00 (#10) Surgical instrument to make an incision
Scalpel handle F.S.T 10003-12 (#3) Surgical instrument to make an incision
Von-Frey filaments North Coast NC12775-99 Measurement device to test sensory function for mechanical stimulation

References

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Citer Cet Article
Kang, D., Choi, J., Moon, J., Kang, S., Ryu, Y., Park, J. B., Kim, H. Automated Gait Analysis in Mice with Chronic Constriction Injury. J. Vis. Exp. (128), e56402, doi:10.3791/56402 (2017).

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