Registrazione di pressione intracavernosa per valutare la funzione erettile in roditori
Summary
Registrazione di pressione intracavernosa (ICP) è un metodo importante per valutare la funzione erettile di animali da esperimento. Qui, un protocollo dettagliato è dimostrato per la procedura di registrazione di ICP cateterismo pene crura e quindi elettricamente stimolando i nervi cavernosi in ratti.
Abstract
La disfunzione erettile (de) è definita come l’incapacità di raggiungere o mantenere un’erezione del pene, e questo è diventato un disturbo sessuale maschile prevalente. Roditori sono impiegati da molti studi per ricercare la fisiologia/patologia della funzione erettile. La funzione erettile in roditori può essere valutata misurando la pressione intracavernosa (ICP). In pratica, può essere monitorato ICP dopo stimolazione elettrica dei nervi cavernosi (CNs). La pressione arteriosa dell’arteria carotica (la pressione arteriosa media) è utilizzata come riferimento per ICP. Utilizzando protocolli di registrazione ICP, molti parametri chiave della funzione erettile possono essere misurati dalla curva di risposta di ICP. La misurazione di ICP fornisce ulteriori informazioni rispetto al test di indotto da apomorfina l’erezione del pene ed è più conveniente di monitoraggio telemetrico del corpo spugnoso del pene, rendendo questo metodo quello più popolare per valutare la funzione erettile. Tuttavia, rispetto alla prova effettuata facilmente la funzione erettile indotta da APO, registrazioni di ICP successo richiedono attenzione al dettaglio, la pratica e l’aderenza al metodo dell’operazione. In questo lavoro, un’introduzione alla registrazione di ICP in ratti è fornita per integrare la procedura in modo efficiente.
Introduction
ED è definito come l’incapacità di raggiungere o mantenere un’erezione ed è diventato un comune disturbo sessuale maschile1. Animali da esperimento sono utilizzati e forniscono modelli riproducibili per studiare la funzione erettile2. Per lungo tempo, diversi modelli di animali più grandi sono state impiegate per indagare la funzione erettile3,4,5. Anche se i roditori sono relativamente piccoli rispetto agli altri animali, sono utilizzati anche per lo studio della disfunzione erettile maschile a causa di esporre diversi vantaggi6. In primo luogo, le caratteristiche morfologiche e funzionali sessuali degli esseri umani sono ricapitolate in roditori. In secondo luogo, rispetto agli animali più grandi utilizzati negli studi di ED, roditori sono più economiche da acquistare, casa e mantenere. Modelli di roditori geneticamente modificati, terzi forniscono vantaggi negli studi comportamentali, nonché neurofisiologici riproducibili e successivi. Di conseguenza, roditori sono rapidamente diventate primarie animali utilizzati per lo studio della disfunzione erettile maschile.
Beneficiando di una priorità bassa genetica pura e coerente della cultura, modelli del roditore hanno fornito dati costantemente riproducibile5,6,7,8. Tra i numerosi studi disponibili relazionati a molti aspetti delle funzioni erettili, l’apomorfina (APO)-risposta erettile indotta e il test di risposta ICP indotto da stimolazione elettrica sono i metodi più diffusi che riflettano fedelmente erettile funzione9,10,11,12. Il test di funzione erettile indotta da APO, sviluppato da Heaton et al. 13, è un saggio biologico che utilizza il fenomeno che l’amministrazione di apomorfina ai ratti suscita erezioni e sbadigli. Come un semplice, non invadente e stabile bio-test per valutare la funzione erettile, il test di funzione erettile indotta da APO è ampiamente usato in molti studi. Tuttavia, questo test non riflette adeguatamente la qualità delle erezioni o i cambiamenti dinamici nel flusso sanguigno connesso con una risposta erettile14. Misurazioni di ICP sono stati inizialmente sviluppati da Quinlan et al. 15. in questo metodo, un catetere viene inserito nell’arteria carotica per misurare la pressione arteriosa sistemica, e un altro catetere viene inserito nel cru cavernosi per registrare l’ICP. Prima o durante l’ICP di registrazione, un agente vasoattivo e/o il campo elettrico stimolazione del ganglio pelvico principale (MPG) o CN erano spesso dato ai ratti14. Questo test è stato uno strumento affidabile per valutare le terapie e farmaci per la disfunzione erettile e sarà probabilmente utilizzato come un metodo di valutazione vitale in futuro6.
Rispetto alla prova effettuata facilmente la funzione erettile indotta da APO, registrazioni di ICP successo richiedono attenzione al dettaglio, la pratica e l’aderenza al metodo dell’operazione. Pertanto, qui, forniamo una descrizione dettagliata di come eseguire la registrazione ICP.
Protocol
Representative Results
Discussion
Come una misura diretta della funzione erettile, ICP è un metodo affidabile di14. Permette l’acquisizione di dati su basale ICP, ICP, picco del plateau ICP, tempo per tempo di erezione e detumescenza, durata della risposta, ecc. Oltre a questi diretti parametri misurati, ci sono alcuni altri parametri di indice: (1) “T80”, il tempo per raggiungere l’80% del picco ICP; (2) “D20”, il tempo per ridurre al 20% del picco ICP; (3) “ΔT80”, il tasso di aumento della pressione (al secondo) a T80…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo lavoro è stato sostenuto dai fondi di ricerca fondamentali per l’Università centrale (020814380018, 020814380077), The China Scholarship Council (CSC, no. 201606195024), Natural Science Foundation della provincia di Jiangsu (BK20160138) e Key Project supportati dalla scienza e dalla tecnologia Development Foundation, Università medica di Nanchino (2014NJMUZD053).
Materials
| Animal | |||
| Rats | Strain: Sprague-Dawley Age: 2-3 month |
||
| Rats | Strain: Sprague-Dawley Age: 15-18 month |
||
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Reagents | formula | ||
| Saline | Sigma-Aldrich, S7653 | dissolve 8.5 gram sodium chloride in distilled water | |
| Pentobarbital sodium solution | Sigma-Aldrich, P3761 | dissolve 1 gram in 100 ml saline | |
| Povidone-iodine | BTP Pharmaceutical Co. Limited | 10% (V/V) | |
| Ethanol | China National Pharmaceutical Group Corporation (SINOPHARM) | 70% (V/V) | |
| Heparin | Sigma-Aldrich, H3149 | dissolve 20000U heparin in 100 ml saline | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Materials | |||
| Hypodermic needle | Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd. | 23G | |
| Syringe | Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd | 10 ml | |
| Three-way stopcock | Chengdu Instrument factory | TSK 01 | |
| Electrode | Chengdu Instrument factory | JST-1 | |
| Catheter tube | Chengdu Instrument factory | PE-10, PE-50 | |
| Operating scissors | Shanghai operation equipment factory | J22010, J22020 | |
| Ophthalmic operating scissors | Shanghai operation equipment factory | Y00010, Y00020 | |
| Ophthalmic forceps | Shanghai operation equipment factory | JD1010, JD1020 | |
| MicroScissors | World Precision Instruments | WAA260 | |
| silk suture | Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd. | 5-0 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Equipment | |||
| Stimulator | Nanjing medease science and technology co. ltd (model 4C501H) | 15 Hz, 5 ms pulse, 5 V, 60 s duration and 5 minutes interval | |
| Multichannel signal collection processing system | Nanjing medease science and technology co. ltd (model 4C501H) | Blood pressure model | |
| Pressure transducer | Beijing Xin Hang Xing Ye Technology Trading Company Limited (model YP100) | 40KPa | |
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