Summary

Un modèle de Rat de la Orthotopic Transplantation hépatique en utilisant une Technique nouvelle anastomose magnétique pour la Reconstruction de veine sus-hépatique

Published: March 19, 2018
doi:

Summary

La reconstruction de la veine sus-hépatique (SHVC) reste une étape difficile dans une transplantation hépatique orthotopique rat. Dans cet article, nous montrons un protocole étape par étape pour la reconstruction de SHVC chez le rat en utilisant une technique nouvelle anastomose magnétique.

Abstract

Le modèle de rat de transplantation hépatique orthotopique (BTA) est essentiel pour la recherche de la transplantation. C’est un modèle animal très sophistiqué et nécessite une courbe d’apprentissage abrupte. L’introduction de la technique de Brassard pour l’abouchement de la veine porte (PV) et infrahepatic vena cava (IHVC) a considérablement simplifié la procédure de transplantation chez les rats. Toutefois, en raison de la courte paroi antérieure de la veine cave sus-hépatique bénéficiaires (SHVC), la technique du brassard est très difficile à utiliser pour la reconstruction de la SHVC. La plupart des chercheurs dans ce domaine toujours utilisent la technique de suture-main pour la reconstruction de SHVC, qui en fait l’étape de goulot d’étranglement en transplantation hépatique orthotopique de rat. La technique d’anastomose magnétique (c.-à-d., magnamosis) est une variante de raccordement de deux navires à l’aide de la force d’attraction entre deux aimants. Notre étude récente a montré que la technique d’anastomose magnétique est supérieure à la technique de suture-main pour la reconstruction de SHVC chez le rat. Dans cet article, nous montrons un protocole étape par étape pour la reconstruction de SHVC chez le rat en utilisant la technique d’anastomose magnétiques roman. Dans ce modèle, la reconstruction de la PV et IHVC a été réalisée par la technique de Brassard standard, tandis que la reconstruction de la voie biliaire principale (BD) a été réalisée par une technique de stent. re-L’arterialization hépatique n’a pas été effectuée. La technique d’anastomose magnétique reconstruction SHVC grandement facilitée et réduit considérablement la phase d’anphepatic. Après une courbe d’apprentissage raisonnable, même les chercheurs sans compétences avancées de microchirurgie peuvent produire des résultats fiables et reproductibles à l’aide de ce modèle de rat d’OLT.

Introduction

Le modèle de rat de transplantation hépatique orthotopique (BTA) est essentiel pour la transplantation recherche1,2. Le premier rat BTA a été décrit par Lee et al. , en 1973,3. Dans ce modèle, tous les navires ont été reconstruites par la technique de la main-suture. La technique de la main-suture nécessite des compétences microchirurgies avancées, qui limite considérablement son utilisation. Depuis lors, diverses modifications au protocole original de rat BTA ont été signalées. Parmi eux, la technique de Brassard pour l’abouchement de la veine porte (PV) et infrahepatic vena cava (IHVC) rapporté par Kamada et coll. en 1979 constitue une amélioration majeure de ce modèle, comme il a considérablement simplifié les procédures de reconstruction4 . Toutefois, en raison de la courte paroi antérieure de la veine cave sus-hépatique bénéficiaires (SHVC), la technique du brassard est très difficile à utiliser pour la reconstruction de la SHVC. La plupart des chercheurs dans ce domaine toujours utilisent la technique de suture-main pour la reconstruction de SHVC, qui en fait l’étape de goulot d’étranglement rat OLT5,6,7.

La technique d’anastomose magnétique (par exemple, magnamosis) est une variante de raccordement de deux navires ou autres structures tubulaires à l’aide de la force d’attraction entre deux aimants8,9,10,11. La force magnétique progressivement compresse et remodèle le tissu dans une anastomose fort, valvule12,13. Cette anastomose de compression s’est avérée pour être efficace pour les humains14,15. Nous avons conçu une paire d’anneaux magnétiques spécifiquement pour l’anastomose de la SHVC chez le rat. Notre étude récente a montré que la technique d’anastomose magnétique est supérieure à la technique de suture-main pour la reconstruction de SHVC au rat BTA16. Le but de cet article est de fournir un protocole détaillé, étape par étape pour la reconstruction de SHVC chez le rat en utilisant la technique d’anastomose magnétiques roman.

Protocol

Le protocole a été réalisé conformément aux directives pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire et a été approuvé par le Comité sur l’éthique des animaux des expériences de Xi’an Jiaotong University, de Xi ‘ an, de la Province du Shaanxi en Chine. Remarque : Aucune procédure de ce protocole ont été réalisé sous un microscope chirurgical. 1. préparation préopératoire La conception et la forme des anneaux magnétiques …

Representative Results

Après environ 10 tentatives, la technique d’anastomose magnétique pour la reconstruction de SHVC a été avec succès maîtrisée par un chercheur qui n’avait aucune formation préalable de microchirurgie. La reconstruction de la SHVC a pris moins de 2 min. La phase anhépatique pour les rats bénéficiaires était environ 10 min. Pas de thrombose, hémorragie ou angiostegnosis a été observée sur le site anastomotique SHVC à 1, 5 et 30 jours après la reperfusion. Le cavography …

Discussion

Beaucoup progresse clinique en transplantation hépatique peut être attribuée aux études chez l’animal. Rat BTA est un modèle largement utilisé et reconnu dans la recherche de préservation d’organe, transplantation immunologie, physiologie et pathologie. Toutefois, il est également une procédure très complexe et requiert des compétences de microchirurgie avancée. Malgré de nombreuses améliorations dans la procédure du rat BTA, l’anastomose SHVC reste une étape difficile. Dans cet article, nous décri…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ce travail a été soutenu par des subventions du ministère de l’éducation l’Innovation équipe développement programme en Chine (no IRT16R57), Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (no 81470896) et une recherche Fonds pour jeunes talents recrutement Plans de Xi’an Jiaotong University (RW).

Materials

Anesthesia Machine Harvard  tabletop Animal anaesthesia
PLX7000B HF Mobile Digital C-arm System Perlong Medical PLX7000B It is mainly used for the angiography and photography of various operations
Syringe Pump Mindray BeneFusion SP5 intravenous infusion
Isoflurane RWD life Science Co. anesthetic:for the induction and maintenanceof anesthesia
iohexol Shanghai General Pharmaceutical Co  intravascular contrast media  
heparin sodium injection SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD   prevent the formation of thrombosis 
cefuroxime  Glaxo Operations UK Limited  an antibiotic
buprenorphine  TIPR Pharmaceutical Responsible Co.,Ltd an analgesic
curved microforceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. W40350 surgical tool
hemostatic forceps(straight) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31010 surgical tool
hemostatic forceps(curved) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31020 surgical tool
Satinsky clamp Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC050 surgical tool
needle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J32010 surgical tool
microneedle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WBA040 surgical tool
notched forceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J42010 surgical tool
tissue forceps(with hook) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J41010 surgical tool
tissue scissor Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00040 surgical tool
surgical scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00030 surgical tool
micro scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. MR-S121T surgical tool
microvessel clips Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC240 surgical tool
straight microforceps(titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC010 surgical tool
curved microforceps  (titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC020 surgical tool

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Citer Cet Article
Yang, L., Lu, J., Wang, Y., Zhang, M., Shi, Y., Wei, S., Liu, P., Wu, Z., Lv, Y., Wu, R. A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction. J. Vis. Exp. (133), e56933, doi:10.3791/56933 (2018).

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