Summary

En råtta modell av ortotop levertransplantation med romanen magnetiska anastomos teknik för Suprahepatic Vena Cava återuppbyggnad

Published: March 19, 2018
doi:

Summary

Rekonstruktionen av suprahepatic vena cava (SHVC) är fortfarande ett svårt steg i råtta ortotop lever transplantation. I den här artikeln visar vi ett stegvisa protokoll för SHVC återuppbyggnad i råttor med en roman magnetiska anastomos teknik.

Abstract

En råtta modell av ortotop lever transplantation (OLT) är viktigt för transplantation forskning. Det är en mycket sofistikerad djurmodell och kräver en brant inlärningskurva. Införandet av manschetten tekniken för anastomos portvenen (PV) och infrahepatic vena cava (IHVC) har avsevärt förenklat förfarandet transplantation hos råttor. Men, på grund av den korta främre väggen i mottagarnas suprahepatic vena cava (SHVC), manschetten tekniken är mycket svåra att använda för återuppbyggnaden av SHVC. De flesta forskare inom detta område fortfarande använda hand-sutur teknik för SHVC återuppbyggnad, vilket gör det steget flaskhals i råtta ortotop lever transplantation. Magnetiska anastomos tekniken (dvs., magnamosis) är en metod för att ansluta två fartyg som använder den attraktiv kraften mellan två magneter. Vår senaste studie har visat att magnetiska anastomos teknik är överlägsen den hand-sutur tekniken för SHVC återuppbyggnad i råttor. I den här artikeln visar vi ett stegvisa protokoll för SHVC återuppbyggnad i råttor med romanen magnetiska anastomos tekniken. I denna modell utfördes återuppbyggnaden av PV och IHVC med standard manschetten teknik, medan återuppbyggnaden av gallgången (BD) utfördes av en stent-teknik. Den nedsatt re arterialization utfördes inte. Magnetiska anastomos tekniken gjort SHVC rekonstruktion mycket lättare och betydligt förkortas den anphepatic fasen. Efter en rimlig inlärningskurva, kan rentav som forskare utan avancerad mikrokirurgisk kompetens ge tillförlitliga och reproducerbara resultat med denna råtta modell av OLT.

Introduction

En råtta modell av ortotop lever transplantation (OLT) är viktigt för transplantation forskning1,2. Den första rat OLT beskrevs av Lee et al. 19733. I denna modell rekonstruerades alla fartyg med hand-sutur teknik. Den hand-sutur tekniken kräver avancerad mikrokirurgisk kompetens, som avsevärt begränsar dess utnyttjande. Sedan dess har har olika ändringar av den ursprungliga protokollet av råtta OLT rapporterats. Bland dem anses manschetten tekniken för anastomos portvenen (PV) och infrahepatic vena cava (IHVC) rapporterats av Kamada et al. 1979 en stor förbättring av denna modell, eftersom det avsevärt förenklat återuppbyggnad förfarandena4 . Men, på grund av den korta främre väggen i mottagarnas suprahepatic vena cava (SHVC), manschetten tekniken är mycket svåra att använda för återuppbyggnaden av SHVC. De flesta forskare inom detta område fortfarande använda hand-sutur teknik för SHVC återuppbyggnad, vilket gör det steget flaskhals i råtta OLT5,6,7.

Magnetiska anastomos tekniken (dvs., magnamosis) är en metod för att ansluta två fartyg eller andra rörformiga strukturer som använder den attraktiv kraften mellan två magneter8,9,10,11. Den magnetiska kraften gradvis komprimerar och remodels vävnaden in i en stark, sutureless anastomos12,13. Denna komprimering anastomos har visat sig vara effektiva i människor14,15. Vi har designat ett par magnetiska ringar specifikt för anastomos av SHVC hos råttor. Vår senaste studie har visat att magnetiska anastomos teknik är överlägsen den hand-sutur tekniken för SHVC återuppbyggnad i råtta OLT16. Syftet med denna artikel är att ge en detaljerad, steg för steg-protokollet för SHVC återuppbyggnad i råttor med romanen magnetiska anastomos tekniken.

Protocol

Protokollet har genomförts i enlighet med riktlinjerna för vård och användning av försöksdjur och godkändes av kommittén för den etik av djur experiment av Xi’an Jiaotong University, Xi’an, Shaanxi-provinsen, Kina. Obs: Ingetdera av förfarandena i detta protokoll utfördes under ett kirurgiskt Mikroskop. 1. preoperativ förberedelse Design och form av de magnetiska ringarna (figur 1) Montera magnetiska anasto…

Representative Results

Efter ca 10 försök, var magnetiska anastomos tekniken för SHVC återuppbyggnad framgångsrikt behärskas av en forskare som hade ingen tidigare mikrokirurgisk utbildning. Återuppbyggnaden av SHVC tog mindre än 2 min. Den anhepatic fasen för mottagarens råttorna var cirka 10 min. Ingen trombos, blödning eller angiostegnosis observerades vid SHVC anastomotic platsen 1, 5 och 30 dagar efter reperfusion. Den sämre vena cavography utfördes på 2 veckor efter transplantation. I <stron…

Discussion

Många kliniska fortskrider i levertransplantation kan tillskrivas djurstudier. Rat OLT är en allmänt använd och väl accepterad modell i forskningen av orgel bevarande, transplantation, fysiologi och patologi. Men det är också en mycket komplicerad procedur och kräver avancerad mikrokirurgisk skicklighet. Trots många förbättringar i förfarandet av råtta OLT förblev SHVC anastomos ett utmanande steg. I den här artikeln beskriver vi en roman magnetiska anastomos teknik för SHVC återuppbyggnad i råtta OLT. …

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Detta arbete stöds av bidrag från ministeriet för utbildning Innovation Team utveckling Program i Kina (nr. IRT16R57), National Natural Science Foundation Kina (nr. 81470896) och en forskning fond för ung talang rekrytera planer av Xi’an Jiaotong University (RW).

Materials

Anesthesia Machine Harvard  tabletop Animal anaesthesia
PLX7000B HF Mobile Digital C-arm System Perlong Medical PLX7000B It is mainly used for the angiography and photography of various operations
Syringe Pump Mindray BeneFusion SP5 intravenous infusion
Isoflurane RWD life Science Co. anesthetic:for the induction and maintenanceof anesthesia
iohexol Shanghai General Pharmaceutical Co  intravascular contrast media  
heparin sodium injection SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD   prevent the formation of thrombosis 
cefuroxime  Glaxo Operations UK Limited  an antibiotic
buprenorphine  TIPR Pharmaceutical Responsible Co.,Ltd an analgesic
curved microforceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. W40350 surgical tool
hemostatic forceps(straight) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31010 surgical tool
hemostatic forceps(curved) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31020 surgical tool
Satinsky clamp Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC050 surgical tool
needle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J32010 surgical tool
microneedle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WBA040 surgical tool
notched forceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J42010 surgical tool
tissue forceps(with hook) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J41010 surgical tool
tissue scissor Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00040 surgical tool
surgical scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00030 surgical tool
micro scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. MR-S121T surgical tool
microvessel clips Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC240 surgical tool
straight microforceps(titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC010 surgical tool
curved microforceps  (titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC020 surgical tool

References

  1. Aller, M. A., et al. A half century (1961-2011) of applying microsurgery to experimental liver research. World journal of hepatology. 4, 199-208 (2012).
  2. Aller, M. A., et al. The value of microsurgery in liver research. Liver international : official journal of the International Association for the Study of the Liver. 29, 1132-1140 (2009).
  3. Lee, S., Charters, A. C., Chandler, J. G., Orloff, M. J. A technique for orthotopic liver transplantation in the rat. Transplantation. 16, 664-669 (1973).
  4. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  5. Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2012).
  6. Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. Journal of visualized experiments : JoVE. , e4376 (2013).
  7. Liu, X., He, C., Huang, T., Gu, J. Development of a New Technique for Reconstruction of Hepatic Artery during Liver Transplantation in Sprague-Dawley Rat. PloS one. 10, e0145662 (2015).
  8. Jamshidi, R., Stephenson, J. T., Clay, J. G., Pichakron, K. O., Harrison, M. R. Magnamosis: magnetic compression anastomosis with comparison to suture and staple techniques. Journal of pediatric surgery. 44, 222-228 (2009).
  9. Pichakron, K. O., et al. Magnamosis II: Magnetic compression anastomosis for minimally invasive gastrojejunostomy and jejunojejunostomy. Journal of the American College of Surgeons. 212, 42-49 (2011).
  10. Gonzales, K. D., et al. Magnamosis III: delivery of a magnetic compression anastomosis device using minimally invasive endoscopic techniques. Journal of pediatric surgery. 47, 1291-1295 (2012).
  11. Wall, J., et al. MAGNAMOSIS IV: magnetic compression anastomosis for minimally invasive colorectal surgery. Endoscopy. 45, 643-648 (2013).
  12. Xue, F., et al. Choledochojejunostomy with an innovative magnetic compressive anastomosis: How to determine optimal pressure?. World journal of gastroenterology. 22, 2326-2335 (2016).
  13. Yan, X., et al. Portacaval shunt established in six dogs using magnetic compression technique. PloS one. 8, e76873 (2013).
  14. Dorman, R. M., Vali, K., Harmon, C. M., Zaritzky, M., Bass, K. D. Repair of esophageal atresia with proximal fistula using endoscopic magnetic compression anastomosis (magnamosis) after staged lengthening. Pediatric surgery international. 32, 525-528 (2016).
  15. Russell, K. W., Rollins, M. D., Feola, G. P., Scaife, E. R. Magnamosis: a novel technique for the management of rectal atresia. BMJ case reports. , (2014).
  16. Shi, Y., et al. Magnetic ring anastomosis of suprahepatic vena cava: novel technique for liver transplantation in rat. Transplant international : official journal of the European Society for Organ Transplantation. 28, 89-94 (2015).
check_url/fr/56933?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Yang, L., Lu, J., Wang, Y., Zhang, M., Shi, Y., Wei, S., Liu, P., Wu, Z., Lv, Y., Wu, R. A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction. J. Vis. Exp. (133), e56933, doi:10.3791/56933 (2018).

View Video