Évaluation de la Coagulation du Plasma sur le tissu hépatique dans un grand modèle Animal In Vivo
Summary
Nous présentons ici un protocole pour évaluer expérimentalement la coagulation plasmatique dans le tissu hépatique in vivo. Dans un modèle porcin, microcirculation est examinée par laser Doppler, profondeur de la coagulation est mesurée sur le plan histologique, température au site de coagulation par thermomètre infrarouge et caméra thermographique et conduit en effet d’étanchéité est documentée par la pression d’éclatement expériences.
Abstract
Coagulation plasmatique en guise de bistouri électrique est utilisée en chirurgie hépatique pendant des décennies pour sceller la grande surface coupée du foie après hépatectomie majeure pour prévenir les hémorragies à un stade ultérieur. Les effets exacts de coagulation du plasma sur le tissu hépatique sont faiblement examinés. Dans notre modèle porcin, les effets de la coagulation peuvent être examinés à proximité de l’application clinique. Un combiné laser Doppler débitmètre et spectrophotomètre documents microcirculation est modifiée au cours de la coagulation à la profondeur de tissu de 8 mm non invasive, fournissant des informations quantifiables sur hémostase au-delà de l’impression clinique subjective. La température au site de coagulation est évaluée avec une coagulation préalable et post de thermomètre infrarouge et une caméra thermographique lors de la coagulation, une mesure de la température de faisceau de gaz n’est pas possible en raison de la valeur de la limite supérieure des appareils. La profondeur de la coagulation est mesurée au microscope par l’hématoxyline/éosine coupes coloré après étalonnage avec un micromètre objet et donne une information exacte sur la coagulation réglage profondeur-relation de pouvoir. L’effet d’étanchéité est examiné sur les voies biliaires car il n’est pas possible de coagulateur plasma sceller les gros vaisseaux sanguins. Expériences de pression éclatement dehors sur des organes explantés pour écarter la pression artérielle des effets liés.
Introduction
La coagulation plasma argon (APC) est un instrument utilisé en chirurgie abdominale pendant plus de trois décennies,1,2. C’est une technique standard pour la réalisation de l’hémostase secondaire après que hépatectomie majeure en scellant le foie coupé surface pour éviter plus tard des hémorragies3. Coagulation plasmatique est une forme spécialisée de radiofréquence électrocautérisation, qui fournit l’énergie électrique à travers un arc de gaz ionisé. Fournissant une hémostase électrothermique monopolaire, cette technique sans contact a l’avantage d’empêcher l’électrode à coller sur le tissu4. Le faisceau de gaz ionisé est automatiquement dirigé vers la zone de la plus faible résistance électrique et est détourné lorsque la résistance augmente en raison de la dessiccation à d’autres domaines non encore desséchés. Il en résulte une profondeur limitée uniforme de coagulation5,6. Facteurs qui influent sur l’effet de coagulation sont l’activation du temps, le réglage de la puissance de l’appareil de coagulation et de la distance entre la sonde et le tissu. L’hélium est un gaz porteur, qui peut être utilisé pour plasma coagulation7. Cliniques récentes études concentré sur les résultats cliniques plutôt que8,3,les résultats histologiques et fonctionnelles9, tandis que des études expérimentales in vitro enquêtes10 a été consacrée ou des expériences sur des organes perfusés isolés11.
Le protocole sous-jacent permet l’étude des effets de coagulation du plasma dans un modèle animal grand proche de l’application clinique à l’aide de matériel humain standard sur les porcs : Microcirculation est évaluée de façon non invasive par un débitmètre Doppler laser et spectrophotomètre, qui est un outil clinique standard pour cette indication12,13. Les changements de température lors de la coagulation sont contrôlés avec un thermomètre infrarouge et une caméra thermographique. La profondeur de la coagulation est mesurée sur l’hématoxyline/éosine histologique coupes coloré après la récolte d’échantillons de tissus. Pour la comparaison avec d’autres moyens pour l’hémostase secondaire, rafale pression expériences réalisées. Contrairement aux techniques précédemment décrites,14, elles sont menées sur les organes explantés d’exclure de la pression artérielle des effets liés. Outre les investigations décrites sur les effets locaux de coagulation plasmatique, standard des tests sanguins peuvent aussi être exercées dans le modèle porcin.
Protocol
Representative Results
Discussion
Modèles de rongeurs pour chirurgie hépatique sont établies pour une longue période16. Néanmoins, les modèles animaux de grande taille présentent des avantages : aucun équipement de microchirurgie n’est nécessaire comme équipement du dispositif standard pour les êtres humains peut être appliqué, techniques chirurgicales sont comparables à l’utilisation clinique et méthodes d’évaluation clinique standard peuvent être transférés aux expériences. Par exemple, des tests sangu…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Les auteurs n’ont aucun remerciements.
Materials
| Xylazine 20 mg/mL | Vetoquinol GmbH | Xylapan | |
| Ketamine 100 mg/mL | Ceva GmbH | Ceva Ketamine Injection | |
| Atropine 100 mg / 10 mL | Dr. Franz Köhler Chemie GmbH | Atropinsulfat Köhler 100mg Amp. | |
| Propofol | Fresenius Kabi GmbH | Propofol 1% MCT Fresenius | |
| Fentanyl | KG Rotexmedica GmbH | Fentanyl 0,5mg Rotexmedica | |
| Isoflurane | Abbot GmbH | Forene 100% (V/V) 250 mL | |
| Ringer's lactate solution | Baxter Deutschland GmbH | sodium 131mmol/l, potassium 5 mmol/l, calcium 2 mmol/l, cloride 111 mmol/l, lactate 29 mmol/l | |
| Surgical disinfactant | Schülke & Mayr GmbH | Kodan Tinktur forte gefärbt 1l 104804 | |
| Motorized microscope | Nikon Instruments Europe | Eclipse TE2000-E | |
| Microscope camera | Nikon Instruments Europe | Digitalsight DS-Qi1Mc | |
| Imaging software | Nikon Instruments Europe | NIS elements Vers. 4.40 | |
| Plasma coagulator | Söring GmbH | CPC-1000 | |
| Argon gas | Linde AG | Argon 4.8 | |
| Helium gas | Linde AG | Helium 4.8 | |
| O2C | LEA Medizintechnik GmbH | O2C Version 1212 | with LF-2 or LF-3 probe |
| Infrared thermometer | Voltcraft | VOLTCRAFT IR 260-8S | |
| Thermographic camera | InfraTec GmbH | VarioCAM HD head 820 | |
| Thermographic analysis sofrtware | InfraTec GmbH | IRBIS 3 | |
| Mayer's Hematoxylin solution | Merck 1.09249 | ||
| Eosin solution | VWR International GmbH | Merck 1.09844 | |
| Rollerpump Masterflex L/S easy Load | Cole-Parmer Instrument Company | model 7518-10 | |
| Perfusorpump | B. Braun Melsungen AG | Perfusor secura FT | |
| Digital pressure meter | Greisinger electronic | GMH 3161 | |
| Perfusorsyringe, 50 mL | B. Braun Melsungen AG | REF 8728810 F | |
| Perfusor line, Type IV Standard, PVC Luer lock | B. Braun Melsungen AG | REF 8722960 | |
| 3-Way stopcock, Dicofix C35C | B. Braun Melsungen AG | REF 16494 C | |
| Silk 2-0. 3 metric | Resorba | REF H5F | |
| Vicryl 4-0 Sutupak | Ethicon | V1224H | |
| NaCl 0.9 % | B. Braun Melsungen AG |
References
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