Um modelo do rato de obstrução Intestinal parcial
Summary
Obstruções intestinais são um bloqueio parcial ou total do intestino que pode causar dor abdominal, náuseas, vômitos e impedindo a passagem das fezes. Este procedimento para criar obsructions parcial intestinal em camundongos é confiável em estudar os mecanismos subjacentes do crescimento celular patológica e morte no intestino.
Abstract
Obstruções intestinais, que impedem ou bloqueiam o movimento peristáltico, podem ser causadas por aderências abdominais e mais gastrointestinais (GI) doenças incluindo tumorosa crescimentos. No entanto, o celular que remodela os mecanismos envolvidos na e obstrução intestinal causada por, é mal compreendidas. Foram desenvolvidos vários modelos animais de obstruções intestinais, mas o modelo do mouse é o custo/tempo mais eficaz. Usa o modelo de rato da implantação cirúrgica de uma obstrução intestinal parcial (PO) que tem uma alta taxa de mortalidade, se não é realizada corretamente. Além disso, ratos recebendo cirurgia PO não conseguem desenvolver hipertrofia se um bloqueio adequado não é usado ou não está devidamente colocado. Aqui, descrevemos um protocolo detalhado para cirurgia de PO que produz confiáveis e reprodutíveis obstruções intestinais, com uma taxa de mortalidade muito baixa. Este protocolo utiliza um anel de silicone colocado cirurgicamente que rodeia o íleo que bloqueia parcialmente o movimento digestivo no intestino delgado. O bloqueio parcial faz o intestino se tornam dilatadas devido a parada do movimento digestivo. A dilatação do intestino induz a hipertrofia do músculo liso no lado oral do anel que desenvolve progressivamente mais de 2 semanas até que causa morte. O modelo de mouse PO cirúrgico oferece um modelo in vivo de tecido intestinal hipertrófica útil para estudar as alterações patológicas das células intestinais, incluindo células musculares lisas (SMC), células intersticiais de Cajal (ICC), PDGFRα+e neuronal células durante o desenvolvimento de obstrução intestinal.
Introduction
Obstruções intestinais são um bloqueio parcial ou total no intestino pequeno ou grande que impede o alimento digerido, fluidos e gases movendo-se através do intestino1. Devido a obstrução, a obstrução induz as paredes intestinais para tornar-se espessada, estreitamento do lúmen2. Obstrução intestinal pode ocorrer como resultado de cirurgias abdominais ou pélvicas que causam a formação de tecido de aderência abdominal ou de distúrbios GI, tais como doenças inflamatórias intestinais (doença de Crohn), diverticulite, hérnias, Volvo, estenose, intussuscepção, constipação, fecaloma, pseudo-obstrução, cancros e tumores de4,3,5. Obstruções intestinais, nestes casos, muitas vezes, levam para a hipertrofia da túnica muscular do intestino6.
PO do lúmen induz a distensão intestinal e aumenta a espessura da camada de músculo liso ao redor da obstrução em resposta à necessidade de continuar o peristaltismo funcional7,8,9,10, 11,12,13. Modelos animais de PO intestinal foram desenvolvidos para estudar a hipertrofia do músculo liso em ratos7ratos10, cobaias11, cães12e gatos13 que consistentemente desenvolver hipertrofia similar dentro o camadas de músculo intestinal.
Um modelo do rato do PO intestinal é a maneira mais custo-eficaz de gerar e estudar obstruções intestinais na vivo. Obstruções de intestino delgado são realizadas em camundongos, usando um anel de silicone cirurgicamente colocado em torno do íleo. Os ratos PO mostraram um aumento inicial do número de células (hiperplasia) e um aumento na espessura da camada muscular (hipertrofia) após PO cirurgia8,15. SMC são o principais plástico as células que estão crescendo dentro de camadas de músculo liso em resposta a condições hipertrófica14, mas outras células tais como ICC e PDGFRα+ células que estão intimamente associados com o SMC, são também repovoada. Informamos anteriormente que os ratos PO desenvolveram hipertrofia no intestino delgado, no qual SMC são condrossarcoma em células PDGFRα+ que são altamente proliferativas7,15,16. Por outro lado, ICC são degenerou e perdeu dentro das camadas hipertrofiado músculo liso durante o desenvolvimento do obsruction intestinal7. Outro grande benefício do modelo PO é sua capacidade de induzir alterações no sistema nervoso entérico e propagando padrões motor neurogênicos. A grande propagação padrão motor neurogênica no intestino do rato é o migração motor complexo (MMC), que é neurogênica e não requer ICC ou ondas lentas elétrica17. O modelo de PO pode fornecer insights claras sobre como MMCs e nervos entéricos são remodelados pela obstrução parcial.
Aqui, propomos um protocolo murino para intestinal cirurgia de PO, usando um anel de silicone. Ratos recebendo cirurgia PO confiantemente produzem hipertrofia na túnica muscular do intestino delgado. Dentro hipertrófica muscular, SMC, ICC, PDGFRα+e células neuronais são drasticamente remodeladas.
Protocol
Representative Results
Discussion
Temos demonstrado que ratos recebendo a cirurgia intestinal do PO consistentemente e reproducibly desenvolveram hipertrofia intestinal de músculo liso, que imita a obstrução intestinal humana. Cirurgias de obstrução intestinal foram desenvolvidas para animais diferentes, incluindo ratos7ratos10, cobaias,11,13, de12 e gatos cachorro. O modelo do rato de obstrução intestinal tem tempo, custo, taman…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Os autores gostaria de agradecer Benjamin J Weigler, DVM, pH.d. e Walt Mandeville, D.V.M. (recursos animais & Campus frequentando veterinário, Universidade de Nevada, Reno) para seus serviços excelentes animais fornecidos para os ratos, bem como seus conselhos sobre procedimentos cirúrgicos.
Materials
| Surgical drape | Medical and veterinary supplies | SMS40 | 40”X100 yards |
| Underpad, econ, pro plus | Medical and veterinary supplies | MSC281224 | 17×24” |
| Iris scissors | Braintree scientific, Inc | SC-i-130 | |
| Iris scissors | Vantage | V95-304 | |
| Dumont electronic & jeweler tweezers | Dumont | 98-180-3 | |
| Braided absorbable suture | Covidien polysorb | SL-5687G | 5-0, polyglactin |
| Nylon non-absorbable mono filament | AD surgical | S-N618R13 | 6-0, nylon |
| Surgical blade | Dynarex | No.15 | |
| Needle holder | Jacobson microvascular | 36-1342TC | 8.5 inch |
| Scalpel handle | Flinn scientific | AB1049 | |
| Microsurgical scissor | WPI | 503305 | |
| Petrolatum ophthalmic ointment | Puralube VET | 3.5 g | |
| Fluriso (isoflurane) | Vetone | V1 502017 | 250 ml |
| Steri-strip reinforced skin closure | 3M | R1547 | |
| Surgical gloves | Medline | MSG2270 | |
| Ear loop face mask | The safety zone | RS700 | |
| Avant gauze non-woven sponges | Caring | PRM25444 | |
| Surgical cup | Admiral craft OYC-2 | 725-A42 | 2.5 oz |
| Swabstick | ChloraPrep | 260103 | 2% w/v Chlorhexidine Gluconate (CHG) and 70% v/v Isopropyl Alcohol (IPA) |
| Cotton tipped applicator | Puritan | 806-WC | |
| Buprenorphine | Zoo pharm | BZ8069317 | 1 mg/ml |
| Gentamycin sulfate | Vetone | G-6336-04 | 100 mg/ml |
| Fast acting gel cream remover | Veet | 8111002 | |
| Syringe | AHS | AH01T2516 | 1 ml with needle |
| Silicon ring | VWR | 60985-720 | 6 mm in length, 4 mm exterior diameter, 3.5 mm interior diameter |
| C57BL/6 mice | The Jackson Laboratory | 4-6 weeks old |
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