لابيرينثيكتومي الجراحية من الفئران لدراسة نظام الدهليزية
Summary
ويصف هذا البروتوكول labyrinthectomy الجراحية من الفئران، ووسيلة مفيدة لدراسة المنظومة الدهليزية.
Abstract
دراسة المنظومة الدهليزية أو بعملية التعويض الدهليزية، وضعت عددا من الأساليب لتسبب ضررا الدهليزية، بما في ذلك لابيرينثيكتومي الجراحي أو الكيميائي والدهليزيه نيوريكتومي. لابيرينثيكتومي الجراحية طريقة بسيطة وموثوق بها وسريعة نسبيا. وهنا يصف لنا تقنية جراحية للفئران لابيرينثيكتومي. شق بوستاوريكولار تتم تحت التخدير العام إلى فضح القناة السمعية الخارجية وغشاء الطبل، بعد ذلك يتم إزالة غشاء الطبل والعظيمات دون stapes. الشريان stapes، الذي يقع بين stapes والإطار البيضاوي، هو بنية ضعيفة ويجب الحفاظ عليها للحصول على حقل جراحية واضحة. حفرة فينيستراتي الدهليز يرصد مع بر حفر 2.1-مم متفوقة stapes. ثم الإيثانول 100% هو حقن من خلال هذا الثقب ويستنشق عدة مرات. تشريح دقيق تحت المجهر والمراقبة الدقيقة النزيف ضرورية للحصول على نتائج يمكن الاعتماد عليها. وتعتبر أعراض فقدان الدهليزية، مثل رأرأة وآماله الرأس، واقتراح متداول، فورا بعد الجراحة. يمكن استخدام روتارود أو تناوب الرئاسة الاختبار موضوعيا وكمياً تقييم الوظيفة الدهليزية.
Introduction
ومن الضروري الجهة الدهليزية للتحكم بالتوازن والعين. وظيفة دهليزية عادي يعتمد على إشارات الزبائ متناظرة من أجهزة الدهليزية في الأذنين الداخلية اثنين. Hypofunction الدهليزية أو فقدان يستحث الدوخة، رأرأة، واختلال الوضعي. بعد الضرر الحاد، يسترد الوظيفة الدهليزية تلقائياً في غضون عدة أيام، عملية تعرف بتعويض الدهليزية1،2. الدهليزية تعويض العجز ثابت عملية الاسترداد تتعلق بخلل نشاط يستريح عفوية بين الأنوية الدهليزية عن وكونترالاتيرال. تعويض العجز في دينامية الدهليزية ويتحقق أساسا عن طريق استبدال الحسية والسلوكية (باستخدام مدخلات بصرية أو سوماتوسينسوري)3. هذه العمليات جذابة اللدونة العصبية الدراسات4،5.
وقد وضعت عددا من الطرق لدراسة المنظومة الدهليزية والآليات التي تعزز اللدونة العصبية أثناء التعويض الدهليزية، مثل لابيرينثيكتومي الكيميائية والجراحية والدهليزيه نيوريكتومي5،6 ،،من78. نيوريكتومي الدهليزية بطريقة معينة للحث على خسارة الدهليزية كاملة، لكن هو إجراء أكثر صعوبة والغازية وقد تؤدي إلى تلف الدماغ8،9. هذا الأسلوب يتطلب مهارة جراحية أكبر ووقتاً أكثر مما لابيرينثيكتومي. لابيرينثيكتومي الكيميائية بما في ذلك مع الجنتامايسين، أرسانيلاتي، وجهاز، هو أسهل، ويمكن أن تسفر عن نتائج يمكن الاعتماد عليها10،،من1112. ومع ذلك، القوقعة قد تتضرر أيضا وفقدان الدهليزية قد تتطور على مدى الساعة11. بالإضافة إلى ذلك، آثار المواد الكيميائية في الدماغ، والتي ينبغي الحفاظ عليها لتقييم دقيق، غير واضحة. قدم لأول مرة في الدراسات الحيوانية في عام 184215 لابيرينثيكتومي الجراحية وذكر أولاً في الفئران في عام 193616. هذه التقنية قد استخدمت منذ ذلك الحين في العديد من الدراسات الحيوانية5،17،،من1819. Labyrinthectomy الجراحية طريقة محددة، يمكن الاعتماد عليها، وبسيطة نسبيا. 13 , 14 -وعلاوة على ذلك، أعراض الضرر الدهليزية تعتبر فورا بعد الجراحة. هنا، نحن تصف لنا تقنية جراحية للجرذ لابيرينثيكتومي.
Protocol
Representative Results
Discussion
هذا الأسلوب طريقة مفيدة لإنشاء فقدان الوظيفة الدهليزية المفاجئ ودائمة وكاملة. ويمكن استخدام هذا لدراسة الأمراض الدهليزية، مثل التهاب الأعصاب الدهليزية، والورم الصوتية، ومرض مينيير. العديد من الدراسات قد استخدمت هذه التقنية لدراسة اللدونة العصبية من الأنوية الدهليزية أو عملية مركزية ذ?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
كان يؤيد هذا البحث بمنحه من كوريا الصحة التكنولوجيا والتطوير د المشروع من خلال كوريا الصحة الصناعة تطوير معهد (خيدي)، تموله وزارة الصحة والرعاية الاجتماعية، جمهورية كوريا (منح رقم: HI15C2651).
Materials
| ASPIRATOR KB-012 | KOH BONG & CO., LTD. | KB-012 | Medical aspirator |
| Blade: #15 | Fine Science Tools | #10015-00 | Blades for #7 Scalpel Handles, #15 |
| Carbon Steel Burrs | Fine Science Tools | #19007-05 | shaft diameter: 2.3 mm, length: 44 mm, package of 10 burrs |
| Carl Zeiss Surgical GmbH | Carl Zeiss | #6627100863 | Surgical microscope |
| Dumont #3c | Fine Science Tools | #11231-20 | Standard tip 0.17 x 0.10 mm, 11 cm |
| Dumont #5SF | Fine Science Tools | #11252-00 | |
| Dumont #7B | Fine Science Tools | #11270-20 | Serrated 0.17 x 0.10 mm, 11 cm |
| Extra Fine Bonn: straight | Fine Science Tools | #14084-08 | Iris scissors, best suited for microdissection under high magnification |
| Fine Iris Scissors: straight | Fine Science Tools | #14094-11 | Made from martensitic stainless steel, combined with molybdenum and vanadium |
| Finger Loop Ear Punch | Fine Science Tools | #24212-01 | 1 mm. Provides stability and control for researchers using the numbering system |
| Hartman | Fine Science Tools | #13002-10 | Tip width: 1 cm, serrated, 10 cm |
| Short Scalpel Handle #7 Solid | Fine Science Tools | #10003-12 | #7 short, 12 cm |
| Small Vessel Cauterizer | Fine Science Tools | #18000-03 | Replacement tip, straight knife, keeps bleeding to a minimum and therefore provides a surgical field clear of clamps and hemostats |
| Strong 207S | SAESHIN | 207S | Powerful torque at low speed, available with speed or on/off foot controller |
| Suction Tubes | JEUNGDO B&P CO., LTD. | H-1927-8 | Frazier, 18 cm |
| VICRYL | ETHICON | W9570T | Synthetic absorbable sterile surgical suture |
| Weitlaner-Locktite | Fine Science Tools | #17012-13 | Maximum spread: 4.5 cm, 2 x 3 blunt teeth, 11 cm |
| Zoletil | Virbac, France | Tiletamine-zolazepam | |
| Rompun | Bayer | Xylazine | |
| Rimadyl | Pfizer | Carprofen | |
| Septra | Pfizer | Trimethoprim-sulfonamide |
References
- Curthoys, I. S., Halmagyi, G. M. Vestibular compensation: a review of the oculomotor, neural, and clinical consequences of unilateral vestibular loss. Journal of Vestibular Research. 5 (2), 67-107 (1995).
- Smith, P. F., Curthoys, I. S. Mechanisms of recovery following unilateral labyrinthectomy: a review. Brain Research. Brain Research Reviews. 14 (2), 155-180 (1989).
- Lacour, M., Helmchen, C., Vidal, P. P. Vestibular compensation: the neuro-otologist’s best friend. Journal of Neurology. 263, S54-S64 (2016).
- Darlington, C. L., Smith, P. F. Molecular mechanisms of recovery from vestibular damage in mammals: recent advances. Progress in Neurobiology. 62 (3), 313-325 (2000).
- Shinder, M. E., Ramanathan, M., Kaufman, G. D. Asymmetric gene expression in the brain during acute compensation to unilateral vestibular labyrinthectomy in the Mongolian gerbil. Journal of Vestibular Research. 16 (4-5), 147-169 (2006).
- Dutheil, S., Brezun, J. M., Leonard, J., Lacour, M., Tighilet, B. Neurogenesis and astrogenesis contribution to recovery of vestibular functions in the adult cat following unilateral vestibular neurectomy: cellular and behavioral evidence. Neurosciences. 164 (4), 1444-1456 (2009).
- Gunther, L., et al. N-acetyl-L-leucine accelerates vestibular compensation after unilateral labyrinthectomy by action in the cerebellum and thalamus. PLoS One. 10 (3), e0122015 (2015).
- Pericat, D., Farina, A., Agavnian-Couquiaud, E., Chabbert, C., Tighilet, B. Complete and irreversible unilateral vestibular loss: a novel rat model of vestibular pathology. Journal of Neuroscience Methods. 283, 83-91 (2017).
- Cass, S. P., Goshgarian, H. G. Vestibular compensation after labyrinthectomy and vestibular neurectomy in cats. Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 104 (1), 14-19 (1991).
- Vignaux, G., et al. Evaluation of the chemical model of vestibular lesions induced by arsanilate in rats. Toxicology and Applied Pharmacology. 258 (1), 61-71 (2012).
- Berryhill, W. E., Graham, M. D. Chemical and physical labyrinthectomy for Meniere’s disease. Otolaryngologic Clinics of North America. 35 (3), 675-682 (2002).
- Morgenstern, C., Mori, N., Arnold, W. Experimental studies on the effect of labyrinth anesthesia. Archives of Oto-Rhino-Laryngology. 237 (3), 255-261 (1983).
- Nadasy, G. L., Raffai, G., Feher, E., Schaming, G., Monos, E. A simple standard technique for labyrinthectomy in the rat: a methodical communication with a detailed description of the surgical process. Physiology International. 103 (3), 354-360 (2016).
- Hitier, M., Besnard, S., Vignaux, G., Denise, P., Moreau, S. The ventrolateral surgical approach to labyrinthectomy in rats: anatomical description and clinical consequences. Surgical and Radiologic Anatomy. 32 (9), 835-842 (2010).
- Flourens, M. J. . Recherches experimentales sur les propriétés et les fonctions du système nerveux dans les animaux vertébrés. , (1824).
- T’Ang, Y., Wu, C. F. The effects of unilateral labyrinthectomy in the albino rat. Chinese Journal of Physiology. 10, 571-598 (1936).
- Chang, M. Y., et al. MicroRNAs 218a-5p, 219a-5p, and 221-3p regulate vestibular compensation. Scientific Reports. 7 (1), 8701 (2017).
- Bergquist, F., Ludwig, M., Dutia, M. B. Role of the commissural inhibitory system in vestibular compensation in the rat. The Journal of Physiology. 586 (18), 4441-4452 (2008).
- Cameron, S. A., Dutia, M. B. Cellular basis of vestibular compensation: changes in intrinsic excitability of MVN neurones. NeuroReport. 8 (11), 2595-2599 (1997).
- Park, M. K., Lee, B. D., Lee, J. D., Jung, H. H., Chae, S. W. Gene profiles during vestibular compensation in rats after unilateral labyrinthectomy. Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 121 (11), 761-769 (2012).
- Yamamoto, H., Tominaga, M., Sone, M., Nakashima, T. Contribution of stapedial artery to blood flow in the cochlea and its surrounding bone. Hearing Research. 186 (1-2), 69-74 (2003).
- Potegal, M., Abraham, L., Gilman, S., Copack, P. Technique for vestibular neurotomy in the rat. Physiology & Behavior. 14 (2), 217-221 (1975).
- Tung, V. W., Burton, T. J., Dababneh, E., Quail, S. L., Camp, A. J. Behavioral assessment of the aging mouse vestibular system. Journal of Visualized Experiments. (89), e51605 (2014).
- de Jeu, M., De Zeeuw, C. I. Video-oculography in mice. Journal of Visualized Experiments. 65 (65), e3971 (2012).
