Labyrinthectomy chirurgica del ratto per studiare il sistema vestibolare
Summary
Questo protocollo descrive la labyrinthectomy chirurgica di un topo, che è un metodo utile per lo studio del sistema vestibolare.
Abstract
Per studiare il sistema vestibolare o il processo di compensazione vestibolare, un numero di metodi è stato sviluppato per causare danno vestibolare, tra cui labyrinthectomy chirurgica o chimica e neurectomia vestibolare. Labyrinthectomy chirurgica è un metodo relativamente semplice, affidabile e rapido. Qui, descriviamo la tecnica chirurgica per ratto labyrinthectomy. Un’incisione postauricular fatta in anestesia generale per esporre il canale uditivo esterno e la membrana timpanica, dopo di che la membrana timpanica e gli ossicini vengono rimossi senza stapes. L’arteria dello stapes, che si trova tra la staffa e la finestra ovale, è una struttura vulnerabile e dovrà essere conservato per ottenere un campo chiaro chirurgico. Un buco a fenestrate il vestibolo è realizzato con una fresa trapano 2,1 mm superiore a stapes. Poi, 100% etanolo è iniettato attraverso questo foro e aspirato più volte. Dissezione meticolosa sotto un microscopio e un attento controllo del sanguinamento sono essenziali per ottenere risultati affidabili. Sintomi di perdita vestibolare, quali nistagmo, inclinazione testa e un movimento di rotolamento, sono visibili immediatamente dopo la chirurgia. Il test di sedia rotarod o rotazione può essere utilizzato per oggettivamente e quantitativamente valutare la funzione vestibolare.
Introduction
L’organo vestibolare è essenziale per il controllo di equilibrio e con gli occhi. Una normale funzione vestibolare dipende simmetrici segnali afferenti dagli organi vestibolari nei due orecchi interni. Ipofunzione vestibolare o perdita induce vertigini, nistagmo e squilibrio posturale. Dopo danno acuto, la funzione vestibolare recupera spontaneamente entro alcuni giorni, un processo conosciuto come il compenso vestibolare1,2. Il compenso vestibolare dei deficit statico è un processo di recupero legata allo squilibrio dell’attività spontanea che riposa fra i nuclei vestibolari ipsilaterale e controlaterali. Il compenso vestibolare dei deficit dinamico avviene principalmente tramite sostituzioni sensoriali e comportamentali (utilizzando input visivo o somatosensoriali)3. Questi processi sono attraenti per plasticità neuronale studi4,5.
Un numero di metodi è stato sviluppato per studiare il sistema vestibolare e i meccanismi alla base della plasticità neuronale durante il compenso vestibolare, come labyrinthectomy chirurgico e chimico e neurectomia vestibolare5,6 ,7,8. Neurectomia vestibolare è un certo modo di indurre perdita vestibolare completa, ma è una procedura più complessa e invasiva e può indurre danni cerebrali8,9. Questo metodo richiede una maggiore abilità chirurgica e richiede più tempo che labyrinthectomy. Labyrinthectomy chimici, tra cui la gentamicina, arsanilate e tetracaina, è più facile e può produrre risultati affidabili10,11,12. Tuttavia, la coclea può anche essere danneggiata e perdita vestibolare può svilupparsi nel tempo11. Inoltre, gli effetti delle sostanze chimiche sul cervello, che deve essere conservato per una valutazione accurata, sono poco chiari. Labyrinthectomy chirurgico è stato introdotto negli studi sugli animali in 184215 e in primo luogo è stato segnalato nel ratto in 193616. Questa tecnica è stata usata da allora in molti animale studia5,17,18,19. Labyrinthectomy chirurgica è un metodo specifico, affidabile e relativamente semplice. 13 , 14 inoltre, i sintomi di danno vestibolare sono visti immediatamente dopo la chirurgia. Qui, descriviamo la nostra tecnica chirurgica per ratto labyrinthectomy.
Protocol
Representative Results
Discussion
Questa tecnica è un metodo utile per la creazione di perdita di funzione vestibolare improvvisa, permanente e completa. Questo potrebbe essere utilizzato per lo studio di patologie vestibolari, come neurite vestibolare, un tumore acustico e la malattia di Meniere. Molti studi hanno utilizzato questa tecnica per studiare la plasticità neuronale dei nuclei vestibolari o il relativo processo centrale5,17,18,<sup class=…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questa ricerca è stata sostenuta da una sovvenzione dalla Corea Health Technology R & D Project attraverso Corea salute industria Development Institute (KHIDI), finanziato dal Ministero della salute & benessere, Repubblica di Corea (concessione numero: HI15C2651).
Materials
| ASPIRATOR KB-012 | KOH BONG & CO., LTD. | KB-012 | Medical aspirator |
| Blade: #15 | Fine Science Tools | #10015-00 | Blades for #7 Scalpel Handles, #15 |
| Carbon Steel Burrs | Fine Science Tools | #19007-05 | shaft diameter: 2.3 mm, length: 44 mm, package of 10 burrs |
| Carl Zeiss Surgical GmbH | Carl Zeiss | #6627100863 | Surgical microscope |
| Dumont #3c | Fine Science Tools | #11231-20 | Standard tip 0.17 x 0.10 mm, 11 cm |
| Dumont #5SF | Fine Science Tools | #11252-00 | |
| Dumont #7B | Fine Science Tools | #11270-20 | Serrated 0.17 x 0.10 mm, 11 cm |
| Extra Fine Bonn: straight | Fine Science Tools | #14084-08 | Iris scissors, best suited for microdissection under high magnification |
| Fine Iris Scissors: straight | Fine Science Tools | #14094-11 | Made from martensitic stainless steel, combined with molybdenum and vanadium |
| Finger Loop Ear Punch | Fine Science Tools | #24212-01 | 1 mm. Provides stability and control for researchers using the numbering system |
| Hartman | Fine Science Tools | #13002-10 | Tip width: 1 cm, serrated, 10 cm |
| Short Scalpel Handle #7 Solid | Fine Science Tools | #10003-12 | #7 short, 12 cm |
| Small Vessel Cauterizer | Fine Science Tools | #18000-03 | Replacement tip, straight knife, keeps bleeding to a minimum and therefore provides a surgical field clear of clamps and hemostats |
| Strong 207S | SAESHIN | 207S | Powerful torque at low speed, available with speed or on/off foot controller |
| Suction Tubes | JEUNGDO B&P CO., LTD. | H-1927-8 | Frazier, 18 cm |
| VICRYL | ETHICON | W9570T | Synthetic absorbable sterile surgical suture |
| Weitlaner-Locktite | Fine Science Tools | #17012-13 | Maximum spread: 4.5 cm, 2 x 3 blunt teeth, 11 cm |
| Zoletil | Virbac, France | Tiletamine-zolazepam | |
| Rompun | Bayer | Xylazine | |
| Rimadyl | Pfizer | Carprofen | |
| Septra | Pfizer | Trimethoprim-sulfonamide |
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