男性と女性からのナイーブの仲間にアメリカトリパノソーマの性行
Summary
シャーガス病のcruziエージェントには、長期的な無症候性感染症臨床的に認められた病理に突然発展するが生成されます。次の研究プロトコルでは、親から子孫に性的送信T. クルーズトリパノソーマ感染症を解明する短期家族ベース疫学的研究について説明します。
Abstract
アメリカのトリパノソーマ症は、輸血や病院や研究所では誤って汚染された食物の摂取を介してサシガメによって人間に送信されます。加えて、クルーズトリパノソーマ感染は先天性 chagasic 母から彼女の子孫に、男性パートナーの貢献子宮内で汚染が知られています。巣と amastigotes と trypomastigotes、卵巣の卵胞膜細胞、goniablasts と精細管の内腔の塊の示唆されたt. 原因感染症、性感.ここに研究のプロトコルは、二倍体血単核細胞およびヒトの半数体の配偶子に寄生虫核 DNA を示す家族調査の人口の結果を示します。したがって、収集 1 年離れて 3 つの独立した生体試料は、 t. の原因の感染症が子孫に性感を確認しました。特定の興味深いことに、 t. の原因抗体が欠席した寄生虫抗原に対する免疫寛容を退屈させる家族の子孫の大半で。胚の成長の最初の週後鶏t. の原因に難治性の免疫寛容を示したし、鞭毛を接種した卵から孵化した雛は特定の抗体を生産することができませんでした。また、人間の精液の注入射精腹腔内や精巣上体、精細管、精管欠損症の炎症子宮管のt. の原因amastigotes が得られた素朴なマウスの膣に再現の免疫特権臓器の反応。T. の原因の繁殖-子孫に転送された後で感染症の取得で起因した素朴な仲間と感染した男性と女性のマウス。したがって、人口や社会団体を含む堅牢な教育、情報、コミュニケーション プログラムはシャーガス病を防ぐために必要と認められます。
Introduction
Trypanosomatidae 哺乳類のホストで trypomastigote と amastigote のライフ サイクル段階を経るし、昆虫ベクトルで epimastigotes として存在するファミリーに属する原虫クルーズトリパノソーマ(サシガメ: クロタマゴバチ) 腸の培養。ここ数十年、いくつかの研究は triatomine バグ無料1,2,3,4,5,を考慮する 4 つの大陸の国でシャーガス病の存在を示しています。6,7,8,9,10,11,12,13;アメリカトリパノソーマの分散が、北半球へのラテン アメリカの移民に起因した最初がシャーガス病の土着の場合がある可能性を拒否できなくできる3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14. t. 原因伝送のみ認識可能な内因性ソースは chagasic 母親の妊娠15; の約 10% で子孫に伝寄生虫に帰されています男性パートナーの貢献精液射精を子宮内で感染症が埋もれていた。
1 世紀以上前、捜査官16,17観察細胞内のt. の原因卵巣の卵胞膜細胞および胚の amastigotes ライン シャーガス病の場合は急性の精巣の細胞。巣およびt. の原因trypomastigotes と amastigotes、卵巣の卵胞膜細胞、goniablasts および致命的な急性シャーガス病例の精細管 (図 1) の内腔の群生の臓器の免疫特権を開発します。炎症のない状態で再現、肺浸潤18,19.最近十年間にいくつかの実験的研究示されているt. の原因のラウンド amastigote 形態の巣、精細管、精巣上体、精管も子宮、チューブおよび卵巣のように鋭く感染マウス莢膜細胞1,,2021,22。さらに、彼らの子孫、 t. の原因核 DNA (nDNA) に親シャーガス患者からミトコンドリア DNA を人間の半数体生殖線細胞23、検証した原生動物の譲渡を文書化する研究の過程で、寄生虫のライフ サイクルのステージは、chagasic マウス24の射精で観察されました。これらの調査結果は、 t. の原因 –感染抗体1,25,26の不在でホストの子孫によって達成される免疫寛容に関する報告書と一致しています。また、他の大陸3,4,5,6,7,8 固有のシャーガス病の広がりを提案した疫学的報告書 ,9,10、11,12,13 1 シャーガス病が性的に送信することができますを示している実験の研究によってサポートされています.現在の調査疫学家族研究プロトコルおよびt. クルーズトリパノソーマ感染症が性行為で伝達されることを表します。
Protocol
人間、ブラジリア大学の医学部の動物研究委員会、それぞれ研究プロトコル 2500.167567 10411/2011 でヒトと実験動物のすべてのプロシージャを承認しました。(プロトコル ナンバー 054/2009 と CONEP 11163/2009) 公共財団病院ガスパール ヴァイアナの倫理委員会は、フィールド研究の拡張子に、省の保健委員会人間研究 (CONEP 2585 年 04 月) のための無料の同意フォームを承認しました。プロトコルは DNA ?…
Representative Results
プロトコルに従ってこの調査は臨床および寄生虫の検査によるシャーガス病の急性のケースを検出することを目的しました。直接顕微鏡検査と培養寄生虫の成長のために静脈採血を受けた。シャーガス病 21 急性例は血のt. の原因を示した。研究プロトコル セキュリティで保護されたt. 原因ECI1 の分離-急性シャーガス病から ECI21、DNA サンプル展示調査の?…
Discussion
人間シャーガス病が性病種族内のt. の原因に由来かどうかの質問に答えた家族ベースの研究プロトコルについて論じる本、感染症。初期の研究を提供できなかったt. の原因の感染症、性行為感染の証拠おそらくシャーガス病についての情報と利用可能なデータは別途個別3,4から得られたので 5,<sup class…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我々 は、研究所の施設とイザベラ ドラーダ、カーラ アラウージョと巧妙なゴメスの批判的なコメント、ブルーノ ・ Dalago、ラファエル ・ アンドラーデの技術的な支援を認めます。我々 は科学の進歩 (FAPDF)、国立研究評議会、省科学技術 (研究集会/MCT) のための基礎および機構の人材育成、教育省にお世話になっている (岬/私)、ブラジル、これらを支援するため調査。
Materials
| BCIP and NBT redox system | Sigma-Aldrich | 681 451 001 | |
| Blood DNA Purification columns | Amersham Biosciences | 27-9603-01 | |
| d-ATP, [α-32P], 250 µCi. | Perkin Elmer | BLU012H | |
| DNA, Solution Salt Fish Sperm | AMRESCO | 064-10G | |
| dNTP Set, 100 mM Solutions | GE Healthcare | 28-4065-51 | |
| Eco RI | Invitrogen | 15202-021 | |
| Goat anti-human IgG- alkaline phosphatase conjugated | Southern Biotech | 2040-04 | |
| Goat anti-human IgG- FITC conjugated | Biocompare | MB5198020 | |
| Hybond – N+ nylon membrane | GE Healthcare | RPN303B | |
| Hybridization oven | Thomas Scientific | 95-0031-02 | |
| Micro imaging software cell Sens software | Olympus, Japan | ||
| Molecular probes labeling System | Invitrogen | 700-0030 | |
| Nsi I | Sigma-Aldrich | R5584 1KU | |
| Plasmid Prep Mini Spin Kit | GE Healthcare | 28-9042-70 | |
| Plate reader | Bio-Tek GmBH | 2015 | |
| Rabbit anti-chicken IgG-alkaline phosphatase conjugated | Sigma-Aldrich | A9171 | |
| Rabbit anti-chicken IgG-FITC conjugated | Sigma-Aldrich | F8888 | |
| Rabbit anti-mouse IgG- alkaline phosphatase conjugated | Sigma Aldrich | A2418 | |
| Rabbit anti-mouse IgG-FITC conjugated | Biorad | MCA5787 | |
| Spin Columns for radio labeled DNA purification, Sephadex G-25, fine | Sigma-Aldrich | G25DNA-RO | |
| Taq DNA Polymerase Recombinant | Invitrogen | 11615-010 | |
| Thermal cycler system | Biorad, USA | 1709703 | |
| Vector Systems | Promega | A1380 |
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Citer Cet Article
Almeida, A. B., Araújo, P. F., Bernal, F. M., Rosa, A. d. C., Valente, S. A., Teixeira, A. R. Sexual Transmission of American Trypanosomes from Males and Females to Naive Mates. J. Vis. Exp. (143), e57985, doi:10.3791/57985 (2019).