Un modèle polyvalent d’Infestation de tiques dures sur des lapins de laboratoire
Summary
Nous avons mis au point un système simple et versatile pour nourrir les tiques dures sur des lapins de laboratoire. Notre protocole non-laborieux utilise des matériaux facilement accessibles et peut être ajusté selon les besoins des divers paramètres expérimentaux. La méthode permet de surveillance confortable et/ou un échantillonnage des tiques pendant toute la période d’alimentation.
Abstract
L’utilisation d’animaux vivants dans la recherche de tiques est cruciale pour une variété de fins expérimentales, y compris le maintien des colonies de tiques dures en laboratoire. Tiques, tous les stades de développement (à l’exception de le œuf) sont hématophages, en acquérant un repas de sang lorsqu’il est attaché à leurs hôtes vertébrés est essentiel pour la réussite de leur cycle de vie. Nous démontrons ici une méthode simple qui utilise des capsules facilement ouvrables pour l’alimentation des tiques dures sur les lapins. Les avantages de la méthode proposée sont sa simplicité, de courte durée et de surtout polyvalent ajustement aux besoins des conditions expérimentales spécifiques. La méthode rend possible l’utilisation de chambres multiples (de différentes tailles) sur le même animal, permettant l’alimentation de plusieurs étapes ou différents groupes expérimentaux, tout en réduisant la condition animale dans l’ensemble. Les matériaux non irritant et facilement accessibles minimise la gêne pour les animaux, qui peuvent être facilement récupérées à partir d’une expérience et proposés pour adoption ou réutilisées si le protocole éthique lui permet.
Introduction
Les tiques dures (Ixodidae) sont bien connus comme les arthropodes alimentation lentes et peuvent être fixés sur un hôte pendant plusieurs jours ou semaines, selon les espèces et le développement étape1. Ces arthropodes hématophages obligatoires sont des vecteurs d’une grande variété d’agents infectieux, tels que les bactéries, protozoaires et virus et donc présentent un risque important pour l’homme et de la santé animale1. Quand étudie la biologie de la tique ou évaluation de nouvelles méthodes de contrôle, la mise en place d’une tique efficace système d’alimentation est cruciale pour efficacement les expériences de conception et accomplir les objectifs de l’étude. Récemment, plusieurs systèmes d’alimentation artificielle tique (évitant l’utilisation d’animaux vivants) ont été développés2,3,4 , et ils devraient être utilisés chaque fois que possible. Toutefois, ces systèmes n’ont pas été en mesure de remplacer complètement les tiques se nourrissent des animaux vivants, et ils ne sont pas des substituts appropriés pour de nombreuses conditions physiologiques nécessaires à des études scientifiques. Par conséquent, dans certains cas, l’utilisation d’hôtes animaux expérimentaux est cruciale pour garantir la pertinence des résultats expérimentaux.
Lapins néo-zélandais de laboratoire ont montré pour être les hôtes plus appropriées et accessibles pour plusieurs piqûre tique espèces5,6,7,8,9. Deux stratégies communes de tique se nourrissant de lapins ont été fréquemment utilisés : un) se nourrissant des oreilles de lapin recouverts de coton tissu ou chaussettes6,7et b) alimentation en coton sacs9, nylon bouteilles10 ou néoprène chambres11 collée au dos du lapin. L’alimentation sur les oreilles du lapin n’est pas un système élégant, car les tiques (surtout les débuts, larves ou nymphes) peuvent ramper et attacher profondément dans le conduit auditif, ce qui est mal à l’aise pour l’animal et rend le contrôle des tiques alimentation et/ou la récupération des engorgés tiques sont difficiles. Ce système est également limité à seulement deux groupes de tique sur oreilles entièrement couverts par les chaussettes protégés par collier élisabéthain, ce qui représente une gêne importante pour l’animal. Autres systèmes9,10,11 sont certainement plus avancées et bien adapté pour l’entretien de colonie de tiques dures. Cependant, ils sont limités dans le nombre de groupes expérimentaux placés chez le lapin, ainsi que dans les tailles/formes modifiables des chambres alimentation. En outre, ces protocoles exigent souvent clopinant les pattes arrière de lapin afin d’éviter les rayures et l’utilisation de colliers élisabéthains pour empêcher le toilettage.
Dans les présentes, nous proposons une méthode simple, non-laborieux et très efficace pour nourrir plusieurs groupes de tiques dures dans les chambres fermées collés au lapin retour couvert par une veste, éliminant le besoin de colliers élisabéthains ou clopinant pendant l’expérience. Plus précisément, notre système utilise des élastiques gélules composées d’une feuille de mousse d’éthylène-vinyle acétate (EVA) couvertes par le filet de moustique et collés sur le lapin rasé revient avec la solidification de rapide (3 min) de colle latex non irritant. Cette technique permet la fixation de plusieurs capsules de forme ou de taille désirée, et quelques semaines après l’expérience les lapins sont complètement rétablis. Le système est destiné principalement aux stades larvaire et adulte tiques dures, mais avec une petite modification, il peut être utilisé pour les larves aussi bien. Les méthodes de base mousse EVA pour tique dure d’alimentation peuvent être adaptées à d’autres types de vertébrés hôtes, par exemple les moutons (qui apparaît comme l’une des alternatives dans le présent document).
Protocol
Representative Results
Discussion
L’étape la plus importante dans cet ensemble du protocole est de coller la capsule fermement sur la peau rasée. Pour cette raison, une pression constante pendant au moins 3 minutes est essentielle, surtout dans les coins. Lorsque inoculer les tiques dans la capsule, il est important de les appliquer dans le coin opposé de celui ouvert afin d’éviter les tiques s’échapper durant l’étanchéité. Lorsque vous planifiez les expériences, s’assurer que toutes les capsules sont couverts par la veste pour éviter…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Nous reconnaissons l’assistance technique de Evelyne Le Naour, Français Institut National de recherche agronomique (INRA), Alain Bernier (INRA) et Océane Le Bidel (ANSES). Consuelo Almazán a été soutenu par une bourse de recherche du laboratoire d’Excellence, biologie intégrative des maladies infectieuses émergentes (LabEx IBEID), l’Institut Pasteur. Les lapins et les moutons ont été achetés par l’ANSES. Partie de ce travail a été financé par les instituts nationaux de la subvention RO1AI090062 de santé au parc d’y.. Dr Jeffrey L. Blair est reconnu pour la révision du manuscrit.
Materials
| New Zealand Rabbits (2.5-3.5 kg) | Charles River | Strain Code 571 | |
| Rambouillet sheep | Local provider-tick free farm | Female 6 months old | |
| EVA foam 5 mm thick | Cosplay Shop | EVA-PE451kg (950mm x 450mm) | 10 mm PE45kg foam from the Cosplay Shop may be used for the large adult tick species |
| Foam Sheet 9" X 12" 6 mm-White | Amazon | FOAMSHT6-20 | 6 mm-EVA foam ca be ordered via Amazon as an alternative to the foam from Cosplay Shop |
| Full length rabbit jackets | Harvard Apparatus, Inc. | 620077- medium, 6270078 – large | |
| Non-toxic latex glue | Tear mender | Fabric & Leather Adhesive | |
| Tubular cotton orthopedic stockinette | BSN Medical | 9076 (12-15 cm wide) | |
| Mosquito mesh | Loisirs Creatifs | Very fine filter nylon mesh fabric | Any mosquito mesh, or curtain material with the mesh size less than 50 microns is suitable. |
| Leukoplast | BSN medical S.A.S | LF 72361-02 | |
| Adhesive hook-and-loop tape | AIEX store | AIEX 39.37 Feet/12m Hook and Loop Self Adhesive Tape Roll, 20 mm width, white colour | Fullfiled by Amazon |
| Fast drying glue | Fixtout | Superglue |
References
- Sonenshine, D. E., Roe, M. Ticks, People and Animals. Biology of Ticks, Vol I. , (2014).
- Kröber, T., Guerin, P. M. In vitro feeding assays for hard ticks. Trends in Parasitology. 23 (9), 445-449 (2007).
- Bonnet, S., Jouglin, M., Malandrin, L., Becker, C., Agoulon, A., L’hostis, M., Chauvin, A. Transstadial and transovarial persistence of Babesia divergens DNA in Ixodes ricinus.ticks fed on infected blood in a new skin-feeding technique. Parasitology. 134 (2), 197-207 (2007).
- Bonnet, S., Liu, X. Laboratory artificial infection of hard ticks: A tool for the analysis of tick-borne pathogen transmission. Acarologia. 52 (4), 453-464 (2012).
- Khols, G. M. Tick rearing methods with special reference to the Rocky Mountain Wood Tick, Dermacentor andersoni Stiles. Culture methods for invertebrate animals. , (1937).
- Faccini, J. L. H., Chacon, S. C., Labruna, M. B. Rabbits (Oryctolagus cuniculus) as experimental hosts for Amblyomma dubitatum Neumann (Acari: Ixodidae) [Coelhos (Oryctolagus cuniculus) como hospedeiros experimentais de Amblyomma dubitatum Neumann (Acari: Ixodidae). Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia. 58 (6), 1236-1239 (2006).
- Chacon, S. C., Freitas, L. H. T., Barbieri, F. S. Relationship between weight and number of engorged Amblyomma cooperi. Nuttal (sic) and Warburton, 1908 (Acari: Ixodidae) larvae and nymphs and eggs from experimental infestations on domestic rabbits. Brazilian Journal of Veterinary Parasitology. 13, 6-12 (2004).
- Sonenshine, D. E. Maintenance of ticks in the laboratory. Maintenance of Human, Animal, and Plant Pathogen Vectors. , (1999).
- Levin, M. L., Schumacher, L. B. M. Manual for maintenance of multi-host ixodid ticks in the laboratory. Experimental and Applied Acarology. 70 (3), 343-367 (2016).
- Bouchard, K. R., et al. Maintenance and experimental infestation of ticks in the laboratory setting. Biology of Disease Vectors. , (2005).
- Jones, L. D., Davies, C. R., Steele, G. M., Nutall, P. A. The rearing and maintenance of ixodid and argasid ticks in the laboratory. Animal Technology. 39, 99-106 (1988).
- Slovák, M., Labuda, M., Marley, S. E. Mass laboratory rearing of Dermacentor reticulatus ticks (Acarina, Ixodidae). Biologia, Bratislava. 57 (2), 261-266 (2002).
- Rechav, Y., Dauth, J. Development of resistance in rabbits to immature stages of the Ixodid tick Rhipicephalus appendiculatus. Medical and Veterinary Entomology. 1, 177-183 (1987).
- Zacarias do Amaral, M. A., Azevedo Prata, M. C., Daemon, E., Furlong, J. Biological parameters of cattle ticks fed on rabbits. Brazilian Journal of Veterinary Parasitology. 21 (1), 22-27 (2012).
