Method Article

Contrôles non destructifs suivi du développement de dégradable axée sur l’échafaud tissulaire des vaisseaux sanguins à l’aide de la tomographie à cohérence optique

DOI:

10.3791/58040

October 3rd, 2018

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Un protocole étape par étape pour les essais non destructifs et longue période suivi le processus de remodelage vasculaire et la dégradation de l’échafaudage en culture en temps réel de biodégradables polymériques axée sur l’échafaud tissulaire des vaisseaux sanguins avec stimulation pulsatile à l’aide de la tomographie par cohérence optique est décrite ici.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ingénierie des greffons vasculaires aux propriétés structurelles et mécaniques similaires à des vaisseaux sanguins naturels sont censés satisfaire la demande croissante de pontage artériel. Caractérisation de la dynamique de croissance et le processus de remodelage des polymères dégradables axée sur l’échafaud tissulaire des vaisseaux sanguins (TEBVs) avec une stimulation pulsatile sont cruciales pour l’ingénierie des tissus vasculaires. Les techniques d’imagerie optiques se démarquent comme de puissants outils pour surveiller la vascularisation du tissu machiné permettant l’imagerie haute résolution en culture en temps réel. Cet article démontre une non destructive et rapide en temps réel d’imagerie stratégie pour surveiller la croissance et la rénovation des TEBVs dans les cultures à long terme en utilisant la tomographie par cohérence optique (OCT). La morphologie géométrique est évaluée, y compris le processus de remodelage vasculaire, épaisseur de paroi et comparaison de l’épaisseur de la TEBV à des moments différents de la culture et de la présence de stimulation pulsatile. Enfin, les PTOM fournit des possibilités pratiques pour l’observation en temps réel de la dégradation du polymère dans les tissus reconstituante profonde sous stimulation pulsatile ou pas et dans chaque segment du navire, par contre l’évaluation de l’utilisation de dégradation du polymère balayage électronique microscopic(SEM) et microscope polarisé.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tissulaire des vaisseaux sanguins (TEBVs) est le matériau plus prometteurs comme une prothèse vasculaire idéal1. Afin de développer les greffes pour être cliniquement utile avec des propriétés structurales et fonctionnelles similaires comme navires indigènes, plusieurs techniques ont été conçus pour maintenir les fonctions vasculaires2,3. Bien qu’il y a eu des navires conçus avec des taux de perméabilité acceptable pendant l’implantation et à l' étude clinique de Phase III4, culture à long terme et des coûts élevés montrent également la nécessité de suivre le dév....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. dégradable PGA échafaudage base tissulaire navires Culture

  1. Fabrication de l’échafaudage de la PGA
    1. Coudre maille PGA (diamètre de 19 mm et 1 mm d’épaisseur) autour de tubes en silicone stérilisé par l’oxyde d’éthylène (longueur 17 cm, diamètre 5,0 mm et 0,3 mm d’épaisseur) à l’aide de la suture de 5-0.
    2. Coudre en polytétrafluoroéthylène (ePTFE, 1cm de longueur) avec suture 4-0 sur chaque extrémité de la maille PGA et se chevauchent de 2 mm.
    3. Tremper les échafaudages PGA avec la main en 1 mol/L, NaOH pendant 1 min pour ajuster la structure spatiale de la maille et le faire tremper avec de l’eau de la culture de tissus grade trois....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Le système de culture en trois dimensions se composait d’une chambre de culture dans le bioréacteur et le système de perfusion avec un cycle fermé de fluide10,13 (Figure 1). Le cathéter d’imagerie OCT a été inséré dans l’extrémité distale de la jonction en Y et tiré vers l’arrière dans le tube de silicone pour l’imagerie. L’imagerie OCT a été utilisée pour délimiter la caractérisation structurale de b.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pour générer conçu navires avec structure et propriétés mécaniques similaires à ceux des natifs des vaisseaux sanguins peuvent entraîner pour raccourcir le temps pour l’usage clinique et sont le but ultime de l’ingénierie vasculaire. Les techniques d’imagerie optiques permettent la visualisation de l’ingénierie des tissus vasculaires composants spécifiques, qui ne peut pas contrôler des constructions individuelles tout au long des greffes de la culture et de l’exposition à un milieu de culture sans compromettre la stéril.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont aucun intérêt financier concurrentes.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Nous tenons à remercier la Science et la technologie de planification de projet de la Province du Guangdong en Chine (2016B070701007) pour soutenir ce travail.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
synthétiqueen maille PGA
ConnecteurCole Parmer
Cole Parmer
St. Jude Medical, IncILUMIEN&trade ; OPTIS&commerce ; SYSTÈME
microscopique électronique à balayagePhilipsFEI Philips XL-30
microscope polariséOlympusOlympus BX51
suturesJohnson & Pompe
Institut cardiovasculaire
Logiciel d’imagerie LightLabSt. Jude Medical, Inc
Tube en silicone Système OCT intravasculaire pulsatile Johnson du Guangdong

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chan-Park, M. B., et al. Biomimetic control of vascular smooth muscle cell morphology and phenotype for functional tissue-engineered small-diameter blood vessels. Journal of Biomedical Materials Research Part A. 88, 1104-1121 (2009).
  2. Ballyns, J. J., Bonassar, L. J. Image-gui....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Optical Coherence TomographyTissue Engineered Blood VesselsDegradable ScaffoldPulsatile StimulationVascular RemodelingWall Thickness AnalysisScanning Electron MicroscopyPolarized MicroscopyPGA ScaffoldHuman Umbilical Artery Smooth Muscle Cells

Related Articles