22C 3 kullanarak Anti-PD-L1 antikor konsantre biyopsi ve küçük hücreli dışı akciğer kanserli hastalarda sitoloji örnekleri
Summary
22C 3 antikor konsantre üzerinde yaygın olarak kullanılan kullanır bir tahlil geliştirdiğimiz uygunluk ile pembrolizumab, tedavi için akciğer kanseri hastalarının güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde değerlendirmek için yetenek laboratuvarları dünya çapında genişletmek için immunohistokimyasal autostainer, biyopsi ve sitoloji örnekleri için.
Abstract
Pembrolizumab tedavinin küçük hücreli dışı akciğer kanseri (NSCLC) PD-L1-gelişmiş ifade ile hastaların birinci ve ikinci basamak tedavisi için onaylanmıştır. PD-L1 mesaj PD-L1 immünhistokimya (IHC) 22C 3 arkadaşı teşhis tahlil ile test, (TPS) sayı hangi bir tümör oranını verir, tümör dokusu üzerinde doğrulandı. Biz 22C 3 antikor (Ab) konsantre üzerinde yaygın olarak kullanılan bir IHC autostainer biyopsi ve sitoloji örnekleri için kullandığı bir en iyi duruma getirilmiş laboratuar geliştirilen test (LDT) geliştirdi. PD-L1 TPS 120 eşleştirilmiş bütün tümör doku bölümleri ve biyopsi örnekleri ile değerlendirildi ve biyopsi ve sitoloji örnekleri 70 ile eşleştirilmiş (bronş yıkama, n = 40; plevral efüzyon, n = 30). Konsantre tabanlı LDT biyopsi (~ %100) ve sitoloji arasındaki yüksek bir uyumluluk oranı her iki TPS PD-L1 IHC 22C 3 arkadaşı tahlil kullanarak kararlı PD-L1 IHC ifade karşılaştırıldığında (~ %95) örnekler gösterdi. 22C 3 Ab noktaları (≥1%, ≥50%) kesti. PD-L1 ifade her iki tümör doku ve sitoloji örnekler, belirlemek için 22C 3 Ab konsantre kullanarak burada anlatılan en iyi duruma getirilmiş LDT NSCLC hastalar ile tedavi için uygunluğu değerlendirmek için yetenek laboratuvarları dünya çapında genişleyecektir pembrolizumab tedavinin güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde.
Introduction
Son klinik deneyler pembrolizumab, programlanmış hücre ölümü 1 arasındaki etkileşimi (PD-1) engelleyen bir insanlaşmış monoklonal Igg4 kappa izotip antikor ve hastalarının tedavisinde PD-L1 ve PD-L2, onun ligandlar etkinliğini göstermiştir Gelişmiş NSCLC1,2,3,4.
Şu anda, pembrolizumab PD-L1-ifade NSCLC ≥50% ve hiçbir epidermal büyüme faktörü reseptörü (EGFR) veya Anaplastik Lenfoma kinaz (ALK) genomik tümör anomalileri3 bir PD-L1 ifade TPS her iki tedavi-naif hastalarda tedavisi için onaylanmıştır ve için daha önce bir PD-L1 TPS ≥1%1‘ in tedavi.
PD-L1 protein ifade IHC tarafından tespit anti-PD-1/PD-L1 tedaviler için yaygın bir akıllı biyomarker tahlil olarak kullanılmıştır. Pembrolizumab klinik çalışmalarda, PD-L1 formalin sabit parafin gömülü (FFPE) doku örnekleri ile elde edilen TPS PD-L1 IHC 22C 3 arkadaşı tahlil5kullanarak tespit edilmiştir. Bu tahlil ABD Gıda ve İlaç Dairesi (FDA) tarafından onaylanmıştır ve CE-Avrupa’da işaretlenmiş tümör PD-L1 TPS5belirlenmesi için olmuştur.
Ek genel seçenekleri PD-L1 TPS 22C 3 antikor konsantre kullanan UMTH ile güvenilir ve yüksek kaliteli değerlendirmeler için kurumlar arasında klinik hasta pembrolizumab uygunluk ile ilgili kararlar desteklemek için gerekli olan tedavi. Patoloji Laboratuvarı, çok sayıda arkadaşı tanılama PD-L1 IHC 22C 3 tahlil için erişemez. Bu nedenle, güvenilir ve tutarlı UMTH ek, yaygın olarak kullanılan IHC autostainer platformları ile uyumlu geliştirilmesi esastır.
Ayrıca, UMTH NSCLC hastalar sık sık kullanılabilir tek numune türü vardır sitoloji numuneleri kullanılarak kurmaya gerek yoktur. Bronkoskopi 100 tümör hücreleri belirtiyorsa PD-L1 IHC 22C 3 arkadaşı tahlil rezeksiyonu, çekirdek iğne biyopsileri ve bronchoscopies için doğrulanır. Her ne kadar yukarıdaki örnek türleri sık sık elde edilen, sitoloji örnekleri daha kolay toplanan ve bazı kurumlar6,7en yaygın olarak bulunan örnek türü vardır. Ancak, orada şu anda doğrulanan hiçbir teşhis tahlil sitoloji örnekleri PD-L1 ifadede değerlendirilmesi için kullanılabilir; güvenilir UMTH sitoloji örnekleri ile uyumlu daha fazla yüksek kaliteli PD-L1 test kolaylaştırmak.
Ayrıca, bir LDT klinik doğrulanmasını kurarken, IHC ilgili klinik olarak doğrulanmış ticari test8için benzer bir şekilde yapılmalıdır. Örneğin, birkaç önemli adımlar antikor titrasyonu, tedavi öncesi gecikmeler, kuluçka süresi ve güçlendirme sistemleri9gibi seri bölümlerde aynı sinyal almak için doğrulanması gerekir.
Son zamanlarda 22C 3 antikor konsantre tümör biyopsi ve sitoloji örnekleri10,11PD-L1 ifade değerlendirmek için kullandığı bir en iyi duruma getirilmiş LDT geliştirdik. Liberal düşünce topluluğu karşı “altın standart” PD-L1 IHC 22C 3 tahlil10,11ile yüksek bir uyum bulduk. Güvenilir, yüksek kaliteli PD-L1 bölgeler arasında genel olarak test bu klinik olarak doğrulanan iletişim kuralını destekler.
Protocol
Representative Results
Discussion
Biz 22C 3 PD-L1 antikor konsantre ol, karşılık gelen klinik olarak doğrulanmış ticari test10,11ile karşılaştırarak kullanarak en iyi duruma getirilmiş bir LDT doğrulanmış var. 22C 3 antikor tabanlı LDT biyopsi (~ %100) ve PD-L1 IHC 22C 3 tahlil ≥1% TPS ve ≥50% kesme noktaları TPS olarak kullanarak kararlı PD-L1 IHC ifade karşılaştırıldığında sitoloji (~ %95) örnekler arasında yüksek bir uyumluluk oranı gösterdi yoğunlaşmıştı…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışmada Merck & Co., Inc., Kenilworth, NJ, ABD tarafından sponsor oldu. Fon çalışma tasarım, veri toplama ve analizi, yayımlamaya karar veya el yazması hazırlanması hiçbir rol oynamıştır.
Materials
| NovaPrep HQ1 | Novacyt | NA | Preservative solution for cytology specimens |
| Novaprep® HQ+ B | Novacyt | NA | Mucolytic solution |
| Tissue-Tek VIP 6 | Sakura | 6042 VIP 6 | |
| Tissue-Tek TEC 5 Tissue Embedding Console System | Sakura | 5229 TEC 5 | |
| microscope glass slide SuperFrost Plus | Thermo Fisher Scientific | 4951PLUS4 | |
| DL-Dithiothreitol powder | Sigma-Aldrich | D3801 | |
| Heidolph Multi Reax Vortex Shaker | Thermo Fisher Scientific | 13-889-410 | |
| Shandon Cytoblock | Thermo Fisher Scientific | 7401150 | |
| 22C3 anti-PD-L1 concentrate antibody | Agilent Dako | #M365329 | |
| PD-L1 IHC 22C3 pharmDx | Agilent Dako | SK006 | |
| Autostainer Link 48 | Agilent Dako | AS480 | |
| BenchMark ULTRA autostainer | Ventana | #750-600 | |
| OptiView HQ Universal Linker | Ventana | #760-700 | |
| OptiView HRP Multimer | Ventana | #760-700 | |
| OptiView Amplification H2O2 | Ventana | #760-099 | |
| OptiView Amplifier | Ventana | #760-099 | |
| OptiView Amplification Multimer | Ventana | #760-100 | |
| OptiView DAB | Ventana | #760-700 | |
| OptiView Copper | Ventana | #760-700 | |
| Hematoxylin II | Ventana | #790-2208 | |
| Bluing Reagent | Ventana | #760-2037 | |
| Cell Conditioning 1 (CC1) | Ventana | #950-124 | |
| Tissue-Tek Film Coverslipper | Sakura | 4742 |
References
- Garon, E. B., et al. Pembrolizumab for the treatment of non-small-cell lung cancer. The New England Journal of Medicine. 372 (21), 2018-2028 (2015).
- Herbst, R. S., et al. Pembrolizumab versus docetaxel for previously treated, PD-L1-positive, advanced non-small-cell lung cancer (KEYNOTE-010): a randomised controlled trial. The Lancet. 387 (10027), 1540-1550 (2016).
- Reck, M., et al. Pembrolizumab versus Chemotherapy for PD-L1-Positive Non-Small-Cell Lung Cancer. The New England Journal of Medicine. 375 (19), 1823-1833 (2016).
- Langer, C. J., et al. Carboplatin and pemetrexed with or without pembrolizumab for advanced, non-squamous non-small-cell lung cancer: a randomised, phase 2 cohort of the open-label KEYNOTE-021 study. The Lancet Oncology. 17 (11), 1497-1508 (2016).
- Buttner, R., et al. Programmed Death-Ligand 1 Immunohistochemistry Testing: A Review of Analytical Assays and Clinical Implementation in Non-Small-Cell Lung Cancer. Journal of Clinical Oncology. 35 (34), 3867-3876 (2017).
- Folch, E., Costa, D. B., Wright, J., VanderLaan, P. A. Lung cancer diagnosis and staging in the minimally invasive age with increasing demands for tissue analysis. Translational Lung Cancer Research. 4 (4), 392-403 (2015).
- Padmanabhan, V., et al. Improving Adequacy of Small Biopsy and Fine-Needle Aspiration Specimens for Molecular Testing by Next-Generation Sequencing in Patients With Lung Cancer: A Quality Improvement Study at Dartmouth-Hitchcock Medical Center. Archives of Pathology & Laboratory Medicine. 141 (3), 402-409 (2017).
- Tsao, M. S., et al. . IASLC ATLAS of PD-L1 Immunohistochemistry Testing in Lung Cancer. , (2017).
- Thunnissen, E., de Langen, A. J., Smit, E. F. PD-L1 IHC in NSCLC with a global and methodological perspective. Lung Cancer. , 102-105 (2017).
- Ilie, M., et al. Use of the 22C3 anti-PD-L1 antibody to determine PD-L1 expression in multiple automated immunohistochemistry platforms. PLoS One. 12 (8), e0183023 (2017).
- Ilie, M., et al. Use of the 22C3 anti-programmed death ligand 1 antibody to determine programmed death ligand 1 expression in cytology samples obtained from non-small cell lung cancer patients. Cancer Cytopathology. 126 (4), 264-274 (2018).
- Skov, B. G., Skov, T. Paired Comparison of PD-L1 Expression on Cytologic and Histologic Specimens From Malignancies in the Lung Assessed With PD-L1 IHC 28-8pharmDx and PD-L1 IHC 22C3pharmDx. Applied Immunohistochemistry & Molecular Morphology. 25 (7), 453-459 (2017).
- Russell-Goldman, E., Kravets, S., Dahlberg, S. E., Sholl, L. M., Vivero, M. Cytologic-histologic correlation of programmed death-ligand 1 immunohistochemistry in lung carcinomas. Cancer Cytopathology. 126 (4), 253-263 (2018).
- Heymann, J. J., et al. PD-L1 expression in non-small cell lung carcinoma: Comparison among cytology, small biopsy, and surgical resection specimens. Cancer Cytopathology. 125 (12), 896-907 (2017).
- Stoy, S. P., Rosen, L., Mueller, J., Murgu, S. Programmed death-ligand 1 testing of lung cancer cytology specimens obtained with bronchoscopy. Cancer Cytopathology. 126 (2), 122-128 (2018).
- Ilie, M., Hofman, P. Reproducibility of PD-L1 assessment in non-small cell lung cancer-know your limits but never stop trying to exceed them. Translational Lung Cancer Research. 6 (Suppl 1), S51-S54 (2017).
