Nous présentons ici un protocole décrivant les technique d’oxygénation par membrane extracorporelle veino-veineuse (ECMO) dans un non-intubés, spontanément les souris de la respiration. Ce modèle murin d’ECMO peut être implémenté efficacement dans des études expérimentales de l’aigu et les pneumopathies terminale.
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Article de méthode
Oxygénation par Membrane extracorporelle veino-veineuse chez une souris
* These authors contributed equally
Dans cet article
Résumé
Résumé
L’utilisation d’oxygénation extracorporelle (ECMO) a considérablement augmenté ces dernières années. ECMO est devenu une thérapie efficace et fiable pour les aigus ainsi que les pneumopathies terminale. Avec l’augmentation de la demande clinique et l’utilisation prolongée d’ECMO, optimisation procédurale et prévention des dommages de plusieurs organes sont d’une importance cruciale. Le but du présent protocole est de présenter une technique détaillée d’une ECMO veino-veineuse dans un non-intubés, respirant spontanément des souris. Ce protocole illustre la conception technique de l’ECMO et étapes chirurgicales. Ce modèle murin d’ECMO facilitera l’étude de la physiopathologie associé à ECMO (p. ex., inflammation, événements hémorragiques et thromboemboliques). En raison de l’abondance des souris génétiquement modifiées, les mécanismes moléculaires impliqués dans les complications liées à l’ECMO peuvent également être disséqués.
Introduction
Oxygénation extracorporelle (ECMO) est un système de support de vie temporaire qui reprend les fonctions des poumons et cœur pour permettre la perfusion et échanges gazeux adéquat. Hill et al.1 décrit la première utilisation de l’ECMO chez les patients en 1972 ; Cependant, il seulement est devenu employé couramment après sa candidature est retenue au cours de la grippe H1N1 en 20092. Aujourd'hui, l’ECMO est régulièrement utilisée comme une procédure de sauvetage dans le coeur de terminale et de maladies pulmonaires3. ECMO veino-veineuse est plus en plus employée comme alternative à une ventilation....
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Protocole
Des expériences ont été effectuées sur des souris C57BL/6 mâles, âgés de 12 semaines. Cette étude a été réalisée conformément aux directives de la loi allemande de Animal sous protocole TSA 16/2250.
1. matériel préparation
Remarque : Toutes les étapes sont effectuées dans des conditions propres, non stériles. Il faudrait des conditions stériles si l’animal doit être survécu après l’opération.
- Introduire 3 fenestrations dans un tube polyuréthane 2-Fr en utilisant une lame chirurgicale sous une loupe avec un grossissement de 16 X.
Remarque : Tous les fenestrations doivent se trouver dans le tiers dista....
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Résultats
Ce protocole décrit la méthode de l’ECMO veino-veineuse chez une souris. Ce modèle est fiable et reproductible et par rapport à notre modèle décrit antérieurement de CEC avec arrêt respiratoire et circulatoire12,13, il est moins techniquement difficile à établir.
ECMO débit dans le système veineux a été maintenu entre 1.5 et 5 mL/min. La pression artérielle moyenne a été.......
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Discussion
Nous avons décrit précédemment, un modèle réussi de la DGPC dans une souris12,13. Pour mettre en œuvre un tel modèle pour aiguë ou des troubles pulmonaires de terminale nous avons développé un circuit ECMO veino-veineuse de facile à utiliser pour la souris. Différentes du modèle de la DGPC, veino-veineuse ECMO n’exige pas des interventions chirurgicales complexes comme sternotomie et clampage de l’aorte, réduisant ainsi le risque de blessure saignements chez un a.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Remerciements
Ce projet a été soutenu par KFO 311 subvention du Deutsche Forschungsgemeinschaft.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Sterofundin | B.Braun Petzold GmbH | PZN :8609189 | en 1:1 avec Tetraspan |
| Tetraspan 6 % Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN : 05565416 | en 1:1 avec Sterofundin |
| Heparine Natrium 25.000 | Ratiopharm GmbH | PZN : 3029843 | 2,5 UI par ml de solution d’amorçage |
| NaHCO3 8,4 | . Braun Melsungen AG | PZN : 1579775 | 3 % dans la solution d’amorçage |
| Carprofène | Zoetis Inc., États-Unis | PZN :00289615 | 5mg/kg/BW |
| 1 Fr Cathéter PU | Instechlabs INC., États-Unis | C10PU-MCA1301 | artère carotide |
| 2 Fr Cathéter PU | Instechlabs INC., USA | C20PU-MJV1302 | veine jugulaire |
| 8-0 Suture en soie tressée | Ashaway Line & Twine Co., USA | 75290 | ligature |
| Isoflurane | Piramal Critical Care GmbH | PZN :9714675 | narcose |
| Ciseaux à ressort - 6mm | Lames Fine Science Tools GmbH | 15020-15 | instruments |
| Ciseaux à ressort - 2mm Lames | Fine Science Tools GmbH | 15000-03 | instruments |
| Halsted-Mosquito Hemostat | Fine Science Tools GmbH | 13009-12 | Instruments |
| Dumont #55 Forceps | Fine Science Tools GmbH | 11295-51 | instruments |
| Castroviejo Micro Porte-Aiguilles - 9cm | Fine Science Tools GmbH | 12060-02 | instruments |
| Micro Serrefines | Science Tools GmbH | 18555-01 | instruments |
| Bulldog Serrefine | Fine Science Tools GmbH | 18050-28 | instruments |
| Isoflurane Vaporizer Dräger 19.1 | Drä ; gerwerk AG & Co. KGaA | anesthésie 1,3 -2,5 % | |
| Dispositif d’acquisition de données multicanaux avec logiciel ISOHEART | Hugo Sachs Elektronik GmbH, Allemagne | pression invasive, ECG, t & deg ; C | |
| Appareil portable i-STAT | Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, États-Unis | Analyse des gaz | |
| du sang Cartouches i-STAT CG4+ et CG8+ | Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, États-Unis | Analyse des gaz du sang | |
| C57Bl/6 souris, mâle, 30 g, 14 semaines | Charles River Laboratories | hébergé 1 semaine avant |
Références
- Hill, J. D., et al. Prolonged Extracorporeal Oxygenation for Acute Post-Traumatic Respiratory Failure (Shock-Lung Syndrome). New England Journal of Medicine. 286 (12), 629-634 (1972).
- Noah, M. A., et al.
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Réimpressions et autorisations
