Une méthode de nanoparticules argent pour améliorer le Syndrome de l’atrésie des voies biliaires chez les souris
Summary
Cet article décrit en détail une méthode basée sur les nanoparticules d’argent pour améliorer le syndrome de l’atrésie des voies biliaires dans un modèle de souris expérimentales atrésie des voies biliaires. Une solide compréhension de la préparation du réactif et la technique d’injection de souris néonatales permettra de familiariser les chercheurs avec la méthode utilisée dans les études de modèles de souris néonatales.
Abstract
Atrésie des voies biliaires (BA) sont une forme sévère de cholangite avec une mortalité élevée chez les enfants dont l’étiologie n’est pas encore pleinement compris. Les infections virales peuvent être une cause possible. Le modèle animal typique utilisé pour l’étude BA est établi en inoculant une souris néonatale avec un rotavirus rhésus. Nanoparticules d’argent auraient dû être divulgués exercent des effets antibactériens et antiviraux ; leur fonction dans le modèle de souris de BA est évaluée dans cette étude. Actuellement, lors des expérimentations animales BA, les méthodes utilisées pour améliorer les symptômes des souris BA sont généralement symptomatiques traitements administrés par l’intermédiaire de denrées alimentaires ou d’autres drogues. Le but de cette étude est de démontrer une nouvelle méthode pour améliorer le syndrome BA chez la souris par injection intrapéritonéale de nanoparticules d’argent et de fournir des méthodes détaillées pour la préparation de la formulation de gel argent NANOPARTICULAIRE. Cette méthode est simple et largement applicable et peut être utilisée pour le mécanisme de BA, ainsi que dans les traitements cliniques de recherche. Basé sur le modèle de souris de BA, quand les souris présentent un ictère, le gel de prêts argent nanoparticule est injecté par voie intrapéritonéale à la surface du foie plus bas. On observe l’état de survie, et on examine les indicateurs biochimiques et histopathologie du foie. Cette méthode permet une compréhension plus intuitive des deux la mise en place du modèle BA et les nouveaux traitements de BA.
Introduction
BA est une forme de cholestase caractérisée par un ictère persistant et a une mortalité élevée en l’absence d’une transplantation hépatique. Les infections virales sont étroitement associées à la pathogenèse de la BA. Le cytomégalovirus, le réovirus et antirotavirus ont été suggérés comme agents pathogènes en BA1,2,3. Au cours de la période néonatale, la réponse du système immunitaire immature à une infection virale provoque un dérèglement immunitaire contre les canaux biliaires extra – et intra-hépatique, conduisant à l’apoptose des cellules épithéliales biliaires, infiltration de cellules inflammatoires dans le portail Area, obstruction des canaux biliaires intrahépatiques et extra-hépatiques et enfin, une fibrose du foie4,5,6.
Le modèle animal couramment utilisé pour les études BA implique l’inoculation de souris néonatale avec le rotavirus rhésus (RRV). La souris développe généralement jaunisse après 5-6 jours, montrant un faible poids corporel et selles acholic. Le rôle de la réponse immunitaire dans le processus de la maladie est essentiel, surtout pour les cellules tueuses naturelles de (NK) ; l’épuisement de ces cellules avec un anticorps anti-NKG2D réduit considérablement les dommages causés par le BA7. En outre, des autres cellules, y compris les CD4+ T, des cellules CD8+ T cellules, cellules dendritiques et les cellules T régulatrices, ont tous démontrés que jouent un rôle dans la maladie8,9,10,11. Toutes les données indiquent la nature indispensable du système immunitaire dans le cadre de BA.
Nanoparticules d’argent (AgNPs) sont sont avérées pour avoir des effets bénéfiques contre certaines maladies infectieuses, y compris les infections bactériennes12 et infections virales13,14,15. Toutefois, sauf usage dermatologique, peu d’études ont utilisé AgNPs un traitement clinique, principalement en raison de leur toxicité potentielle. Dans l’expérimentation animale, les chercheurs ont généralement étudié l’efficacité de l’AgNPs administré via orale16 ou intraveineuse méthodes17. Toutefois, aucun d’autres chercheurs n’ont étudié l’efficacité de l’AgNPs administrés via une injection intrapéritonéale (i.p.) chez des souris néonatales d’expériences, qui est une méthode simple et rapide conduisant à une incidence plus directe sur le foie et les voies biliaires tout en réduire la toxicité d’autres systèmes, tels que le système immunitaire. AgNPs ont démontré qu’affectent les cellules NK activité18; par conséquent, nous avons testé les effets thérapeutiques de l’AgNPs administré par injection intrapéritonéale chez la souris BA.
Protocol
Representative Results
Discussion
AgNPs pièce puissantes propriétés antibactériennes à large spectre et une forte perméabilité22; en outre, ils sont utilisés pour produire une gamme de médicaments antibactériens23. Cependant, AgNPs peut prendre du temps pour effacer une fois qu’ils s’accumulent dans les organes, et cette persistance peut conduire à des effets toxiques24,25. Une précédente étude a examiné la toxicité aiguë et gé…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
L’AgNPs utilisées ici ont été un cadeau de C. M. Che dans le département de chimie de l’Université de Hong Kong. Ce travail a été financé par la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (no 81600399) et de la Science et la technologie projet de Guangzhou (No.201707010014).
Materials
| BALB/c mouse | Guangdong Medical Experimental Animal Center | SYXK2017-0174 | Animal experiment |
| Rhesus rotavirus (RRV) | ATCC | ATCC VR-1739 | Establish biliary atresia mouse model |
| MA104 cells | ATCC | ATCC CRL-2378.1 | For laboratory use only |
| DMEM | Thermo Fisher | 10569010 | Mammalian Cell Culture |
| Fetal Bovine Serum | Thermo Fisher | 10099141 | Mammalian Cell Culture |
| collagen Type I | CORNING | 354236 | For research use only |
| PBS buffer | OXOID | BR0014G | For washing |
| NaOH | Sigma | 1310-73-2 | Adjust the PH value |
| AgNP | Antibacterial Note: The AgNps was a gift from Prof CM Che. in the Department of Chemistry, the University of Hong Kong. |
||
| Insulin syringe with integrated needle | BD | 9161635S | For medical use |
| 15-mL Centrifuge Tube | Corning | 430791 | For laboratory use only |
| 1.5-mL Microcentrifuge Tube | GEB | CT0200-B-N | For laboratory use only |
| Microscope | Nikon | ECLIPSE-Ci | For laboratory use |
| Dissecting/Intravital microscope | Nikon | SMZ 1000 | For laboratory use |
| anti-Mouse NKp46 FITC | eBioscience | 11-3351 | For research use only |
| anti-Mouse CD4 PE-Cyanine5 | eBioscience | 15-0041 | For research use only |
| Monoclonal Mouse Anti-Human CD4 | DAKO | 20001673 | For research use only |
| anti-NKG2D | RD | MAB1547 | For research use only |
| BD FACSCanto Flow Cytometer | BD Biosciences | FACS Canto Plus | For laboratory use only |
References
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